化橘红多糖的提取工艺优化

2009-07-01 03:27江明树
中国民族民间医药·上半月 2009年10期
关键词:提取工艺正交试验多糖

马 超 江明树

【摘要】化橘红经热水提取、乙醇沉淀配合法进一步分离纯化得化橘红多糖(ECP),随后对化橘红多糖提取工艺进行优化。

【关键词】化橘红;多糖;提取工艺;正交试验

【中图分类号】R284.2【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)10-0010-01

1材料与方法

1.1材料化橘红(本实验所用材料从化州的化橘红采集得到)。

1.2化橘红多糖(ECP)的提取晒干的化橘红经粉碎过筛处理后,称取干燥的化州橘红细粉100g,经石油醚、乙醚提取脱脂,加入80%乙醇250mL,加水800mL于90℃水浴浸提2次,过滤,滤液减压浓缩至100mL,加入5倍体积95%乙醇醇析后,依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤,干燥即得半粗多糖。将半粗品溶水后,取30mL,在搅拌下滴加10g/L(1%)鞣酸溶液,升温煮沸,离心弃沉淀,加入20g/L(2%)活性炭搅拌10min,漏斗过滤,透析5 h后,加一定比例的乙醇,静置24h后,过滤,沉淀用70%乙醇反复洗涤,直至洗液内无鞣酸为止,得沉淀物后经低温干燥即得精制化橘红多糖粉末。

1.3化橘红多糖(ECP)的含量测定采用苯酚-硫酸测定法,用分光光度计测定490nm下多糖样品含量[4]

1.4化橘红多糖(ECP)提取条件的优化实验

1.4.1浸提时间选择实验在料水比1:30 ,浸提温度90℃条件下,分别在2h、3h、4h、5h进行浸提,比较浸提时间对ECP得率的影响。

1.4.2浸提温度选择实验在料水比1:30,浸提时间4h条件下,分别在70℃、80℃、90℃、100℃进行浸提,比较温度对ECP得率的影响。

1.4.3料水比选择实验在浸提温度90℃,浸提时间4h条件下,选择料水比为1:20、1:30、1:40、1:50条件下浸提,比较料水比对ECP得率的影响。

1.4.4正交试验根据单因素试验确定的条件范围,选取三个因素的三个不同水平进行正交试验(L9(33)),得出化橘红多糖(ECP)提取最优条件。

2结果与讨论

2.1单因素分析

2.1.1浸提时间对多糖得率的影响见表1。

2.1.2料水比对多糖得率的影响见表2。

2.1.3温度对多糖得率的影响见表3。

2.2正交实验根据单因素实验结果,确定正交因素水平范围如表4所示,根据最佳优化条件进行验证性实验,所得多糖得率为16.25%。

本研究通过对化橘红可溶性多糖提取工艺、分离纯化,通过单因素实验和正交实验研究了化橘红多糖的提取工艺,确定了料水比是影响提取率的关键因素其次是温度,浸提时间为最次要因素,对化橘红多糖的提取工艺达到了极显著水平。化橘红多糖提取的最优条件为:料水比为1:40,浸提温度为100 ℃浸提时间为4h,所得多糖得率为16.25%。

(收稿日期:2009.03.28)

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