恩拉霉素在动物生产中的应用进展

黄 萍，万有能，邓 红，汪 超

（重庆市畜牧科学院，重庆 荣昌 402460）

1 恩拉霉素的理化性质

恩拉霉素是由包括13个不同种类的17个氨基酸分子和脂肪酸分子所组成的有机碱，其主要成分为恩拉霉素A和B，此外还含有少量的恩拉霉素C和D。恩拉霉素的盐酸盐为白色结晶性粉末，分子量约为2 500，熔点为238～245℃，易溶于二甲亚砜，可溶于甲醇、含水乙醇，难溶于丙酮，不溶于苯、氯仿。恩拉霉素的盐酸盐对热、光照和潮湿有极好的稳定性。恩拉霉素在饲料中具有很高的稳定性，在室温条件下长期储藏很少降解，在制成颗粒料的过程中也非常稳定，与饲料混合后在室温下长期储藏效价下降甚微。恩拉霉素在肠道内不被降解，能够保持原有的抗菌活性，对革兰氏阳性菌有很强的抗菌作用。

2 恩拉霉素的抗菌活性

恩拉霉素是一种在需氧和厌氧条件下对革兰氏阳性菌均具有较强的抑制和杀灭作用的多肽类抗生素，该抗生素只在微生物繁殖期产生作用，而在分裂期不产生作用。恩拉霉素敏感菌包括梭状芽孢杆菌、链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌等，MIC（最小抑菌浓度）小于0.39～3.12 lg/mL，但枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌对恩拉霉素最为敏感。恩拉霉素对大肠杆菌、绿脓杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌等革兰氏阴性菌的MIC值大于100 lg/mL，几乎无抑杀作用。恩拉霉素与目前临床常用的其他抗生素间几乎不存在任何交叉耐药性。

3 恩拉霉素对动物生产的影响

目前有关恩拉霉素对动物生产的影响多集中于仔猪和肉鸡。有研究表明，恩拉霉素能显著提高仔猪的生产性能。在21～49日龄仔猪的饲粮中添加适当剂量的恩拉霉素（5×10-6～20×10-6），可使仔猪日增重提高19.06%～23.13%，日采食量和料重比分别呈现提高和降低趋势；但高剂量添加（80×10-6）可使仔猪日增重降低12.81%，日采食量和料重比分别出现降低和升高趋势。饲料中添加10×10-6恩拉霉素对28～63日龄小猪的生长有较好的促进作用，能降低增重成本和料肉比，并明显提高日增重。在育成猪日粮中添加1×10-6恩拉霉素可显著改善生产性能，若要达到5%以上的生长改善效果，则恩拉霉素的添加量须在2.5×10-6以上。

恩拉霉素可显著改善肉鸡的生产性能，但对肌肉品质和免疫功能无显著影响。以1～49日龄肉鸡为试验对象进行研究，添加165×10-6恩拉霉素，肉鸡的全期增重较空白对照组提高3.2%。对0～42日龄肉鸡的研究表明，在日粮中添加10×10-6恩拉霉素的生长效果优于添加100×10-6金霉素和75×10-6杆菌肽锌，其日增重较后者分别提高0.56%和6.17%，饲料转化率分别降低1.43%和7.2%，但三者间的屠宰率、半净膛率、全净膛率和腹脂重占活重的比例差异不显著。日粮中添加恩拉霉素（1～21 日龄 5×10-6，22～42 日龄 3×10-6）可改善肉仔鸡1～21日龄的日增重及22～42日龄的日采食量和日增重，但对肉鸡的肌肉滴水损失、pH值和肉色（亮度、红度和黄度)等无显著改善作用。在鸡日粮中添加恩拉霉素，对肉用仔鸡胸腺重指数和法氏囊重指数无显著影响。另有报道称，恩拉霉素可降低粪便中的水分含量，减少鸡粪臭味，肉鸡啄肛癖也呈现下降趋势。

4 恩拉霉素对动物肠道菌群的影响

肠道菌群对动物生长发育有着重要关系，抗生素对动物生产性能的影响与肠道菌群有着密切关系。目前有关恩拉霉素对动物肠道菌群结构影响的报道较少。在21日龄仔猪日粮中分别添加5×10-6、20×10-6和80×10-6恩拉霉素，可使直肠总菌数减少，直肠中大肠杆菌数量随剂量增加而增加，乳酸杆菌以及乳酸杆菌与大肠杆菌的比值随着恩拉霉素剂量增加而降低，并都在80×10-6组达到显著水平；停药后，5×10-6和20×10-6恩拉霉素添加组的仔猪乳酸杆菌和大肠杆菌的比值显著下降，导致肠道菌群失衡。通过PCR-DGGE技术对肉鸡肠道大肠杆菌16SrDNA基因的V3区进行分析，结果表明：在肉仔鸡日粮中添加12.5×10-6恩拉霉素改变了鸡肠道微生物组成，但肠道微生物种类未发生变化。

5 饲料中恩拉霉素的检测方法

饲料中抗生素常采用微生物法检测，原理是：对抗生素敏感的试验菌在适当条件下所产生的抑菌圈大小与抗生素浓度呈正相关关系。目前，饲料中恩拉霉素含量检测均采用此法。饲料预混剂中恩拉霉素含量检测可参照农业部《进口兽药质量标准》（1999年版），但该法存在缓冲液的应用不合理和检测结果偏低的问题。刘雅妮（2006）等对其进行了优化，将《进口兽药质量标准》检测方法中pH值4.0的醋酸盐缓冲液改为pH值7.8的磷酸盐缓冲液，将储备液浓度由1000单位/mL降低为200单位/mL，提取时间延长至2～3h，优化了检测条件，不但能充分提取样品中的恩拉霉素，而且检测数据更准确可靠。

配合饲料中恩拉霉素含量检测目前尚无国家标准，但已有学者建立了微生物学方法可供参考使用，该方法包括提取、分离纯化、标准曲线制备和试样测定等步骤，主要细节包括：（1）用50%甲醇溶液提取试样，经填料为甲醇预处理的多孔苯乙烯一二乙烯苯聚合物树脂层析柱层析，收集组分后蒸干，再用50%甲醇溶液溶解；（2）用枯草芽孢杆菌混悬液、制备好的双碟和不同浓度梯度的恩拉霉素标准液制备标准曲线并建立回归方程；（3）按标准曲线的制备方法测定试样抑菌圈直径；（4）用已建立的回归方程计算试样中恩拉霉素的含量。此方法相关系数为0.9991，回收率大于85%，RSD小于15%，最低检测限理论上可以达到0.2mg/kg，完全可满足饲料中恩拉霉素实际检测的需要。

4 小结

目前有关恩拉霉素作为饲料添加剂的应用研究多停留在改善动物生产性能等表观方面，而有关恩拉霉素作用机理和毒副作用的研究报道并不多见，有待进一步研究。此外，恩拉霉素检测方法相当烦琐，研发测定饲料和畜产品中恩拉霉素含量的低成本快速检测方法对动物生产有着十分重要的意义。

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