Fascin蛋白及 NF-kB在宫颈鳞癌中的表达及其意义

韩耀伟,佟丽波,余繁荣

(佳木斯大学附属第一医院妇产科,黑龙江 佳木斯 154003)

随着分子生物学技术的发展,同时存在的分子事件基因表达亦逐渐被认识,从中明确肿瘤的发生发展、侵袭和转移是一个多步骤、多阶段及多基因参与的分子生物学变化过程。fascin蛋白是一种结构独特、进化保守的细胞骨架蛋白,是近年来肿瘤研究领域的热点之一。它定位于细胞质、丝状伪足、微棘中 ,在细胞内与 f-肌动蛋白结合,参与细胞与细胞之间、细胞与基质之间的相互作用,有助于细胞的迁移和运动。N F-kB广泛存在于人体组织细胞中,通常与其抑制蛋自 IkB相结合,并以非活性状态贮存于细胞质中。在诸如生长因子、致炎细胞因子、免疫受体、病毒与病毒蛋白等刺激因子作用下激活。从而在免疫、炎症、细胞的生存、增殖分化和凋亡等方面起到广泛而重要的作用。本课题主要以免疫组化方法联合检测 fascin蛋白和 N F-kB正常宫颈上皮组织、宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌上皮组织中的表达,进一步探讨fascin蛋白和 NF-kB在宫颈鳞癌组织表达的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集佳木斯大学第一附属医院病理科2004～ 2009年临床和病理资料完整的22例宫颈鳞癌根治术组织标本,取材部位为肿瘤组织中心和10例标本切缘正常宫颈组织,28例宫颈上皮内瘤变病变组织。

1.2 主要试剂

鼠抗人 fascin单克隆抗体;兔抗人 NF kappa B/p50蛋白免疫组化多克隆抗体;SP免疫组化试剂盒(即用型 )。以上均为美国 Maxim公司产品,前者购自北京康为世纪生物有限公司,后二者购自福建迈新生物技术开发公司。

1.3 方法

所有标本均为手术切除新鲜标本,取材后中性甲醛固定,石蜡包埋,厚 4 μm连续切片,行 HE及免疫组织化学染色。

1.4 结果判定

fascin蛋白和 NF-KB抗原阳性物质呈棕黄色颗粒状,fascin蛋白主要定位于细胞浆中;N F-KB主要定位于细胞浆中。染色结果判定参照1996年全国免疫组化技术与诊断标准化专题研讨会意见:＜25%的细胞着色,阴性(-);25%～ 50%的细胞着色,弱阳性(+ );51%～ 70%的细胞着色,中度阳性(++);＞70%的细胞着色,强阳性(+++)。

1.5 统计方法

采用 SPSS11.0软件包统计数据结果,具体应用i2检验。相关分析采用 Spearman等级相关。

2 结果

2.1 fascin蛋白和 N F-kB在宫颈鳞癌不同部位的表达

fascin蛋白、NF-kB的表达与宫颈鳞癌临床病理因素的关系,见表1。

表1 fascin蛋白在三种不同宫颈上皮中的表达

2.2 fascin蛋白与 N F-KB表达的相关性

见表2。

表2 fascin蛋白、NF-kB在宫颈鳞癌组织表达的相关性

3 讨论

本研究对标本进行免疫组化等实验分析,发现在不同分化程度及临床病理分期的宫颈鳞癌以及正常组织的肿瘤标志分子的不同表达,来了解宫颈鳞癌发生、发展的可能分子机制。fascin表达增高可以引起细胞膜的突起增多,且多表达于微棘以及迁移方向的最前缘,可引起细胞间黏附连接的解聚和细胞相互黏附活性减少[1～3],上述生物学特性决定了fascin蛋白可能参与多种肿瘤的侵袭与转移。Fascin蛋白表达上调可作为一些癌症判断预后的标志,目前关于 fascin与肿瘤预后关系的研究较多 ,如在胃癌、大肠癌、食管癌、肺癌、乳腺癌、皮肤癌等恶性肿瘤的预后研究中,fascin的高表达常提示分化程度低及预后差。1986年 Sen和 Baltimore首先发现 NF-kB并对其进行了描述。N F-kB是最先在成熟的 B细胞中被发现的一种核蛋白。N F-kB通常与其抑制蛋白IkB相结合,并以非活性状态贮存于细胞质中。N F-KB(IkB)激活作用的刺激因子涉及范围很广,主要包括生长因子 (如 N GF、 GM-CSF)、致炎 细胞 因子 (如 IL-1、 TN F-a)、免 疫 受体 (如 CD40、 FasL)、 神 经毒素、细菌 及其产 物LPS、病毒与病毒蛋白及某些理化因素 (如紫外线)等[4～7]。本研究还发现,fascin蛋白与 NF-KB在宫颈鳞癌细胞的表达呈正相关,即 NF-KB阳性率越高,fascin蛋白阳性率也高,从而可以推测 fascin蛋白与 NF-KB在宫颈鳞癌的发生、发展过程中存在相互关联、共同作用。这是应该由于 fascin基因的启动子和第一个内含子有22个 NF-kB和24个 TATA核心因子 (TATA core factor,TCF)的结合位点,转录因子与fascin基因的位点结合后 ,促进其转录,从而导致 fascin表达上调,进而促进宫颈鳞癌的浸润和转移。所以联合检测 fascin蛋白与 N F-KB在判断肿瘤生物学行为及预后方面有更大意义。

[1] Kureishy N,Sapountzi V,Prag S,et al.Fascins,and their roles in cell structure and function[J].Bioessays,2002,24:350-361

[2] LoKW,Cheung ST,Leung SP,et al.Hypermethulation of the P16 gene in nasophearyngeal carcinoma[J].Cancer Res,1996,56:20-21

[3] Andres A,Maria J.Double versus single renal allografes from aged donors[J].Transplatation,2000,69:20-60

[4] Rong J,Xu LY,Cai W J,et al.Expression of fascin 1 gene in the process of the immortalized esophageal carcinoma carcinogenesis[J].At Zheng,2004,23:243-248

[5] Guvakova M A,Boettiger D,Adams JC.Induction of fascin spikes in breast cancer cells by activation of the insulin-like growth factor-I receptor[J].Int J Biochem Cell Biol,2002,34:685-698

[6] Tao YS,Edwards RA,Tubb B,et al.beta-Catenin associates with the actin-bundling protein fascin in a noncadherin complex[J].J Cell Biol,1996,134(5):1271-1281

[7] LeeKW,KimMS,Kang N J,et al.H-Ras selectively up-regulates MM P29and COX-2through activation of ERK1/2and N F-kappaB:An implication for invasive phenotype in rat liver epithelial cells[J].Int J Cancer,2006,119(8):1767-1775