复方熊胆乙肝胶囊中柴胡鉴别的探讨

张明子，玄龙洙，刘 汇

(吉林省延边州食品药品检验所，吉林 延吉 133000)

复方熊胆乙肝胶囊质量标准收载于《国家药品标准·新药转正标准(第三十四册)》，原质量标准中柴胡药材的薄层色谱鉴别方法背景干扰较大，现象不甚明显。为更有效的控制该制剂的质量，笔者进行了修订，现报道如下。

1 仪器与试药

CQX25－06型超声波清洗器;硅胶G板(青岛海洋化工厂生产)。柴胡对照药材(中国药品生物制品检定所，批号为0992－200001);复方熊胆乙肝胶囊(吉林敖东药业集团延吉股份有限公司，批号分别为090201，090702，100201);试验用水为纯化水，其他化学试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶液制备[1－2]

2.1.1 对照药材溶液制备

取柴胡对照药材1 g，加甲醇15 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，用乙醚提取2次，每次15 mL，弃去乙醚液;再用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次10 mL，合并正丁醇提取液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为对照药材溶液。

2.1.2 供试品溶液制备

制备方法一:原标准方法为取本品内容物2 g，加甲醇20 mL，回流提取1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，用乙醚提取2次，每次15 mL，弃去乙醚液;再用水饱和的正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。

制备方法二:取本品内容物10粒(4.5 g)，加甲醇30 mL，超声提取30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加40%甲醇溶液10 mL分次溶解加在预先处理好的中性氧化铝柱(100～200目，5 g，内径10～15 mm)上，用40%甲醇溶液100 mL洗脱，收集洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加水20 mL使溶解，用乙醚提取2次，每次15 mL，弃去乙醚液;再用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，用氨试液40 mL洗涤1次，弃去氨试液;正丁醇液再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次40 mL，取正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。

制备方法三:取本品内容物3 g，加甲醇25 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL使溶解，用乙醚提取2次，每次15 mL，弃去乙醚液;再用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，用氨试液40 mL洗涤1次，弃去氨试液;正丁醇液再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次40 mL，取正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。

2.1.3 阴性对照品溶液制备

取不含柴胡的阴性样品，按供试品溶液制备方法三制备阴性对照品溶液。

2.2 供试品制备方法选择

照薄层色谱法[2005年版《中国药典(一部)》附录ⅥB]试验，吸取上述3种供试品溶液、对照药材溶液和阴性对照品溶液各3 μL，分别点于硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－甲醇－水(30∶10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰。结果制备方法一在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，背景干扰较大，斑点颜色不太清晰;制备方法二较方法三稍微清晰，但上中性氧化铝柱，洗脱较慢。故供试品溶液的制备选择方法三(见图1和图2)。

图1 制备方法一与制备方法三的比较(温度27℃、相对湿度50%)

图2 制备方法二与制备方法三的比较(温度26℃、相对湿度62%)

2.3 展开剂选择[1－2]

曾采用《国家药品标准·新药转正标准(第三十四册)》中的展开剂三氯甲烷－甲醇－水(30∶10∶1)与2005年版《中国药典(一部)》中的展开剂乙酸乙酯－乙醇－水(8∶2∶1)进行比较，结果原标准展开剂比药典展开剂斑点更清晰，且分离效果好。故对展开剂未作改进(见图3和图4)。

图3 原标准展开剂薄层色谱图

图4 药典展开剂薄层色谱图

3 讨论

原标准要求在同一展开剂下展开2次，修订后因供试品提纯，减少了杂质干扰，只需1次展开也可见清晰的斑点。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:198.

[2]国家药典委员会.国家食品药品监督管理局国家药品标准·新药转正标准[M].北京:人民卫生出版社，2003，34，92.