顶空气相色谱法测定吡罗昔康原料药有机溶剂残留量

李 育，赵靖霞，杨根金，董 昕，李 玲，苏 笠,张 薇

(第二军医大学药学院分析测试中心，上海 200433)

顶空气相色谱法测定吡罗昔康原料药有机溶剂残留量

李 育，赵靖霞，杨根金，董 昕，李 玲，苏 笠,张 薇

(第二军医大学药学院分析测试中心，上海 200433)

目的建立吡罗昔康原料药中有机溶剂残留量的气相色谱测定法。方法采用顶空气相色谱，使用HP-INNOWAX毛细管色谱柱(30 m×0．32 mm×0．25 μm)；以高纯氮气为载气，FID为检测器，测定吡罗昔康原料药中甲醇、乙醇、甲苯及二甲苯4种有机溶剂的残留量。结果4种有机溶剂均达到了完全分离，在所考察范围内线性关系良好。结论该方法灵敏度、准确度均达到有机溶剂残留量的检测要求，适用于吡罗昔康原料药中有机溶剂残留的检测。

顶空气相色谱；吡罗昔康；有机溶剂残留

吡罗昔康(piroxicam)，又名炎痛喜康，是一种非甾体类抗炎药物，具有明显的解热、镇痛、抗炎作用，为《中国药典》1995年版[1]新增品种，用于治疗类风湿性关节炎和急性肌肉骨骼疾患，包括腱鞘炎、肩周炎、扭伤各种劳损和腰痛[2,3]。由于该药在合成过程中使用了甲醇、乙醇、甲苯和二甲苯等有机溶剂，其溶剂残留量的检测方法未见文献报道。为控制产品质量，本文采用顶空气相色谱法同时测定上述4种有机溶剂的残留量。研究结果表明方法简便、灵敏、准确，是控制该药中有机溶剂残留的可靠方法。

1 仪器与试药

Thermo Trace GC Ultra型气相色谱仪，配置有FID检测器、Triplus顶空进样装置和Xcalibur色谱处理软件。甲醇、无水乙醇、甲苯、二甲苯均为分析纯，DMA(N,N-二甲基甲酰胺)为Sigma-Aldrich公司色谱纯，原料药吡罗昔康由本研究组自制。

2 色谱条件及顶空条件

色谱柱为HP-INNOWAX毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm× 0.25 μm)，进样口温度250 ℃，检测器(FID)温度250 ℃。柱温为程序升温， 40 ℃保持2 min，以2 ℃/min升至70 ℃，再以60 ℃/min升至180 ℃保持3 min。载气为N2；流速为2 ml/min，分流比10:1。顶空瓶平衡温度90 ℃，平衡时间30 min，进样量2 ml。

3 溶液的配制

3.1对照品溶液 精密量取甲醇0.35 ml、乙醇0.6 ml、甲苯0.1 ml、二甲苯0.25 ml，置于100 ml容量瓶中混合，加DMA稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密移取上述储备溶液1 ml置于10 ml容量瓶中，用DMA稀释至刻度，摇匀制成对照品溶液。

3.2供试品溶液 取吡罗昔康原料药约1 g，精密称定，置于10 ml容量瓶中，加DMA稀释至刻度，摇匀即得供试品溶液。

4 方法与结果

4.1线性关系考察 分别精密量取对照品储备液0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 ml，分别置于10 ml容量瓶中，加DMA稀释至刻度，摇匀，配制成不同浓度系列混合对照品溶液。各取5.0 ml置顶空瓶中，自动进样，以各溶液的浓度X (μg/ml)为横坐标，测定的峰面积Y为纵坐标，进行线性回归，结果见表1。

表1 4种溶剂回归方程与线性范围试验结果

4.2精密度试验 取对照品溶液按上述顶空气相色谱条件，连续重复取样6次，甲醇, 乙醇,甲苯和二甲苯溶剂峰面积的RSD(n=6)分别为4.32%, 5.41%, 4.94%, 5.56%。

4.3方法专属性试验 取对照品溶液按上述顶空气相色谱条件测定，结果见图1。在色谱图中，甲醇、乙醇、甲苯、二甲苯分离度良好，DMA溶剂中的杂质不干扰其它残留溶剂的测定。

图1对照品溶液色谱图

1-甲醇，2-乙醇，3-甲苯，4、5、6、7-二甲苯(为邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯和乙苯的混合物)，8- DMA

4.4最低检测限试验 取对照品溶液不同比例稀释后按上述顶空气相色谱条件测定，依据信噪比3:1测得甲醇、乙醇、甲苯、二甲苯最低检测限分别为：2.77，4.73，0.87，2.15 μg/ml。

4.5回收率试验 精密称取吡罗昔康原料药0．5 g，共3份，分别精密加入对照品储备液1 ml，置10 ml量瓶中，加DMA溶解并稀释至刻度，摇匀，按上述顶空气相色谱条件测定，计算得甲醇, 乙醇, 甲苯, 二甲苯的回收率(n=3)分别100.7%,101.3%, 96.3%, 93.6%,RSD分别为0.43%, 1.31%, 0.99%, 0.17%。

4.6样品测定 分别取批号为011225、020108、020124的供试品溶液, 按上述顶空气相色谱条件测定(图2)。结果显示，3批样品中均未检出残留溶剂。表明3批原料药有机溶剂残留量均符合中国药典的规定。

图2吡罗昔康原料药色谱图

5 讨论

考察了DMF(N,N -二甲基甲酰胺)和DMA作2种基质溶剂， DMF与二甲苯色谱峰有干扰， 而DMA和4种残留溶剂分离度能达到要求，并且在响应的位置上没有杂质峰干扰，故选择DMA作为溶剂。通过实验选择了对色谱峰的稳定性，分离度，响应值最佳的顶空平衡温度90 ℃及平衡时间30 min。

二甲苯为一混合溶剂，为邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯和乙苯的混合物，在色谱图中显示4个色谱峰，与药典描述相一致。

顶空气相色谱法具有操作简便，污染少，重现性良好[4]等优点。笔者采用顶空气相色谱法测定了4种残留溶剂，科学验证了本法本仪器在准确度，精密度，线性及范围，专属性，最低检测限上均能达到药典规定的要求。甲醇、乙醇、甲苯以及二甲苯等4种有机溶剂均为生产过程中引入的对人体有害的有机溶剂，本法的建立进一步地为吡罗昔康的质量控制和安全使用提供了科学依据，具有十分重要的意义。

[1] 《中国药典》2005年版.二部[S]. 2005: 247.

[2] 曹 玲，唐树荣，万 嵘. HPLC法测定吡罗昔康注射液的含量[J]. 药物分析杂志，2001, 21(1): 47.

[3] 郭 萌，高爱军. 吡罗昔康片中吡罗昔康的含量测定及含量均匀度检查[J].中华实用中西医杂志, 2007, 20(10): 919.

[4] 李英华,吕秀阳,吕丽丽,等. 顶空气相色谱法在药物分析中的应用[J]. 药物分析杂志, 2005, 25(11): 1404.

2009-09-18

[修回日期] 2009-11-26

Determinationofresidualbyheadspacegaschromatographyorganicsolventsinpiroxicam

LI Yu, ZHAO Jing-xia, YANG Gen-jin，DONG Xin, LI Ling, SU Li，ZHANG Wei

(Center of Pharmaceutical Analysis, College of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai 200433，China)

ObjectiveTo establish a headspace capillary gas chromatgraphy for determination the residual organic solvents in piroxicam.MethodsThe residual solvents in piroxicam which are methanol , ethanol, toluene and dimethybenzene were determined by headspace GC on HP-INNOWax column(30 m×0．32 mm×0．25 μm)，with FID detector，high purity nitrogen as the carry gas.ResultsFour residual organic solvents consisting of methanol, ethanol, toluene and dimethybenzene in piroxicam were completely separated and the samples coincided with the requirements.ConclusionThe method is sensitive and accurate. It is suitable to the determination of residual organic solvents in piroxicam.

headspace gas chromatgraphy；piroxicam；residual organic solvents

李 育(1984-)，女，学士.Tel：(021)81871337.

张 薇.Tel：(021)81871336，E-mail：smmuzhangwei@gmail.com.

R917

A

1006-0111(2011)01-0031-02