神黄豆化学成分研究

黄 波，黄振元，武拉斌，李 雯，姜 北*，黎胜红

1大理学院药学院，大理671000;2中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室，昆明650204

神黄豆化学成分研究

黄 波1，黄振元1，武拉斌1，李 雯1，姜 北1*，黎胜红2*

1大理学院药学院，大理671000;2中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室，昆明650204

对神黄豆Cassia agnes Brenan茎部的化学成分进行了研究。从其甲醇提取物的乙酸乙酯萃取部分分离得到了10个化合物，根据理化性质和波谱数据鉴定其结构分别为：(-)-表阿夫儿茶精(1)、12，13-dihydromicromeric acid(2)、白桦脂醇(3)、8(17)，12E，14-labdatrien-19-ol(4)、β-谷甾醇(5)、胡萝卜苷(6)、二十四烷酰单甘油酯(7)、sitoindoside I(8)、9Z，12Z-octadecadienoic acid(9)和间苯三酚(10)。以上化合物均为首次从神黄豆中发现。

神黄豆;化学成分;结构分析

神黄豆(Cassia agnes Brenan)系豆科(Leguminosae)决明属乔木植物，生山地林中，产云南、广西等省区以及中南半岛。果有类似兴奋剂作用，种子入药，可治胃痛、感冒、疟疾、麻疹、水痘、便泌等［1］，目前还未有对神黄豆化学成分研究的文献报道。为开发利用神黄豆植物资源，近来我们对神黄豆化学成分进行了研究，共计从该植物茎粗提物的乙酸乙酯部位分离、鉴定了10个化学成分，这些化合物均为首次从神黄豆中分离得到。

1 仪器与材料

VG Auto Spec-3000质谱仪;BrukerAM-400、Bruker DRX-500、Avance III-600核磁共振仪。柱色谱硅胶(200～300目)和薄层色谱硅胶GF254均为青岛海洋化工厂生产;凝胶为Sephadex LH-20(Amersham Biosciences，Sweden)。所用试剂均为工业重蒸。神黄豆(Cassia agnes Brenan)茎于2011年1月采自云南省西双版纳，由中国科学院昆明植物研究所黎胜红研究员鉴定，植物标本存放于昆明植物研究所黎胜红研究员实验室。

2 提取分离

神黄豆植物干燥茎10 kg，粉碎后用工业甲醇冷浸提取4次，减压浓缩得浸膏;用水分散浸膏，再用乙酸乙酯萃取，蒸干得浸膏260 g。浸膏用硅胶(200～300目，2.6 kg)柱层析，氯仿-丙酮梯度洗脱(1∶0，9∶1，8∶2，7∶3，5∶5，0∶1)，在TLC检测下合并相似流分得9个组分。将各组分再次硅胶柱层析，组分1 (3 g)经石油醚-乙酸乙酯(15∶1)和石油醚-丙酮(10∶1与3∶1)反复洗脱得化合物4(11 mg)，相应组分再经Sephadex LH-20(氯仿-甲醇1∶1)纯化得化合物3(50 mg)和9(20 mg)。组分2(10 g)经石油醚-丙酮(10∶1)反复洗脱后，重结晶得化合物5(3 g)。组分3(2 g)经反复硅胶柱层析(石油醚-丙酮10∶1)，再经Sephadex LH-20(氯仿-甲醇1∶1)纯化得到化合物2(7 mg)。组分4(5 g)经硅胶柱色谱，用氯仿-甲醇(50∶1)洗脱，再经Sephadex LH-20(甲醇)纯化得化合物7(200 mg)。组分5(3 g)经氯仿-甲醇(10∶1)洗脱，得化合物10(10 mg)。组分6(10 g)经氯仿-甲醇(10∶1)洗脱，重结晶得化合物1(1 g)。组分7(3 g)经氯仿-甲醇(10∶1)洗脱，再经Sephadex LH-20(甲醇)反复纯化得化合物6(201 mg)和8(20 mg)。

3 结构鉴定

化合物1 针状结晶(甲醇);C15H14O5;EI-MS m/z 274［M］+。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ∶7.23(2H，d，J=8.5 Hz，H-2'，6')，6.72(2H，d，J= 8.5 Hz，H-3'，5')，5.90(1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，5.72(1H，d，J=2.2 Hz，H-6)，4.80(1H，s，H-2)，4.02(1H，m，H-3)，2.70(1H，dd，J=16.4，4.5 Hz，CH2)，2.48(1H，dd，J=16.2，3.4 Hz，CH2)。13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ：77.9(d，C-2)，64.8 (d，C-3)，28.2(t，C-4)，156.2(s，C-5)，94.1(d，C-6)，156.4(s，C-7)，95.1(d，C-8)，156.2(s，C-9)，98.4(s，C-10)，130.0(s，C-1')，128.2(d，C-2'，C-6')，114.4(d，C-3'，C-5')，155.7(s，C-4')。由以上数据分析与文献［2］报道一致，故化合物1鉴定为(-)-表阿夫儿茶精。

化合物2 白色晶体(丙酮);C30H48O3;EI-MS m/z 456［M］+。1H NMR(CD3COCD3，400 MHz)δ：5.23(1H，d，J=10.8 Hz，H-30α)，4.71(1H，d，J= 10.8 Hz，H-30β)，3.28(1H，dd，J=11.0，4.6 Hz，H-3)，1.69，1.16，0.97，0.91，0.79，0.74(各3H，s，H-23，24，25，26，27，29)。13C NMR(CD3COCD3，150 MHz)δ：39.4(t，C-1)，28.0(t，C-2)，78.5(d，C-3)，39.7(s，C-4)，56.1(d，C-5)，18.9(t，C-6)，31.3(t，C-7)，41.2(s，C-8)，47.9(d，C-9)，37.6 (s，C-10)，21.3(t，C-11)，37.6(t，C-12)，51.1(d，C-13)，43.0(s，C-14)，30.4(t，C-15)，26.2(t，C-16)，56.8(s，C-17)，38.7(d，C-18)，49.9(d，C-19)，151.6(s，C-20)，35.0(t，C-21)，33.0(t，C-22)，28.8(q，C-23)，15.1(q，C-24)，16.5(q，C-25)，16.6(q，C-26)，16.6(q，C-27)，177.5(s，C-28)，19.6(q，C-29)，110.1(t，C-30)。以上波谱数据与文献［3］报道基本一致，故化合物2鉴定为12，13-dihydromicromeric acid。

化合物3 无色针晶(氯仿);C30H50O2;EI-MS m/z 442［M］+。1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ：4.68 (1H，s，H-29α)，4.56(1H，s，H-29β)，3.18(1H，dd，J=10.9，4.8 Hz，H-3)，2.36(2H，m，H-28)，1.90(3H，s，H-30)，1.33，1.02，0.93，0.78，0.66 (各3H，s，5×CH3)。13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ：38.7(t，C-1)，27.4(t，C-2)，78.9(d，C-3)，38.8 (s，C-4)，55.3(d，C-5)，18.3(t，C-6)，34.3(t，C-7)，41.0(s，C-8)，50.5(d，C-9)，37.3(s，C-10)，20.9(t，C-11)，25.2(t，C-12)，37.2(d，C-13)，42.8(s，C-14)，27.1(t，C-15)，29.2(t，C-16)，47.9(s，C-17)，47.9(d，C-18)，48.8(d，C-19)，150.9(s，C-20)，29.8(t，C-21)，34.0(t，C-22)，28.1(q，C-23)，15.4(q，C-24)，16.1(q，C-25)，16.1(q，C-26)，14.8(q，C-27)，60.6(t，C-28)，109.3(t，C-29)，19.1(q，C-30)。以上波谱数据与文献［4］报道基本一致，故化合物3鉴定为白桦脂醇。

化合物4 油状物(氯仿);C20H32O。1H NMR (CDCl3，500 MHz)δ：6.32(1H，dd，J=15.0，11.0 Hz，H-14)，5.39(1H，t，J=6.3 Hz，H-12)，5.03 (1H，d，J=15.0 Hz，H-15β)，4.87(1H，d，J=11.0 Hz，H-15α)，4.80(1H，s，H-17α)，4.45(1H，s，H-17β)，3.76(1H，d，J=10.5 Hz，H-19β)，3.39(1H，d，J=10.5 Hz，H-19α)，1.76(3H，s，H-16)，1.34 (3H，s，H-18)，0.98(3H，s，H-20)，0.69(3H，s，H-19)。13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ：38.8(t，C-1)，23.2(t，C-2)，38.3(t，C-3)，39.4(s，C-4)，57.1 (d，C-5)，27.0(t，C-6)，35.3(t，C-7)，148.0(s，C-8)，56.1(d，C-9)，39.0(s，C-10)，24.1(d，C-11)，133.9(d，C-12)，133.4(s，C-13)，141.6(d，C-14)，107.7(t，C-15)，15.2(q，C-16)，109.9(t，C-17)，19.0(q，C-18)，65.0(t，C-19)，11.8(q，C-20)。以上波谱数据与文献［5］报道基本一致，故化合物4鉴定为8(17)，12E，14-labdatrien-19-ol。

化合物5 无色晶体(丙酮);C29H50O;EI-MS m/z 414［M］+(100)，396(56)，381(25)，369 (8)，351(9)，329(33)，314(8)，303(45)，289 (8)，273(31)，255(44)，231(21)，213(31)。在TLC上多种不同溶剂系统展开时，与β-谷甾醇标准品Rf值一致，MS数据与文献［6］报道相符，故化合物5鉴定为β-谷甾醇。

化合物6 白色粉末(丙酮);在多种不同溶剂系统中，化合物6与胡萝卜苷标准品共薄层色谱，Rf完全一致，故确定为胡萝卜苷。

化合物7 白色无定形粉末(甲醇);C27H54O4; EI-MS m/z 443［M+H］+;368，351，134，112，98，57。1H NMR(C5H5N，400 MHz)δ：4.70(1H，dd，J =11.0，4.5 Hz，H-1α)，4.64(1H，dd，J=11.0，7.5 Hz，H-1β)，4.44(1H，m，H-2)，4.11(2H，m，H-3)，2.34(2H，t，J=7.5 Hz，H-2')，1.62(2H，m，H-23')，1.29-1.99(40H，m，H3'-22')，0.84(3H，t，J =6.5 Hz，H-24')。以上数据与文献［7］报道基本一致，故化合物7鉴定为二十四烷酰单甘油酯。

化合物8 白色粉末(氯仿-甲醇);C51H90O7。1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ：5.32(1H，d，J= 4.7 Hz，H-6)，4.35(1H，d，J=7.5 Hz，H-1')，4.30 (2H，m，H-6')，3.52(2H，m，H-3'，H-4')，3.45 (1H，m，H-3)，3.40(2H，m，H-2'，H-5')，0.96(3H，s，H-19)，0.90(3H，d，J=6.0 Hz，H-21)，0.85 (3H，d，J=6.6 Hz，H-27)，0.82(3H，t，J=7.8 Hz，H-29)，0.81(3H，d，J=6.8 Hz，H-26)，0.65(3H，s，H-18)。13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ：36.6(t，C-1)，27.2(t，C-2)，73.7(d，C-3)，38.9(t，C-4)，140.3(s，C-5)，122.0(d，C-6)，31.9(t，C-7)，31.8 (d，C-8)，50.1(d，C-9)，36.4(s，C-10)，21.1(t，C-11)，29.6(t，C-12)，42.3(s，C-13)，56.1(d，C-14)，24.3(t，C-15)，38.2(t，C-16)，56.2(d，C-17)，11.9(q，C-18)，19.3(q，C-19)，36.6(d，C-20)，18.8(q，C-21)，34.0(t，C-22)，28.3(t，C-23)，45.7(d，C-24)，29.3(d，C-25)，19.3(q，C-26)，19.8(q，C-27)，23.2(t，C-28)，11.8(q，C-29)，101.2(d，C-1')，76.1(d，C-2')，79.7(d，C-3')，73.3(d，C-4')，70.3(d，C-5')，63.4(t，C-6')，174.2(s，RCOO)，29.1(t，CH2'')，14.1(q，CH3'')。以上波谱数据与文献［8］报道基本相符，故化合物8鉴定为sitoindoside I。

化合物9 黄色油状物(氯仿);C18H32O2。1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ：5.30～5.42(4H，m，H-9，10，12，13)，2.76(2H，m，H-11)，2.37(2H，t，J= 7.5 Hz，H-2)，2.05(4H，m，H-8，H-14)，1.63(2H，m，H-3)，1.25-1.31(14H，overlap，H-4 to H-7，H-15 to H-17)，0.86(3H，t，J=7.0 Hz，H-18)。以上数据与文献［9］报道基本一致，故化合物9鉴定为9Z，12Z-octadecadienoic acid。

化合物 10 黄色粉末;C6H6O3。1H NMR (CD3COCD3，500 MHz)δ：8.24(3H，s，OH-1，3，5)，5.85(3H，d，J=3.0 Hz，H-2，4，6)。13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ：160.0(s，C-1，3，5)，95.3 (d，C-2，4，6)。以上数据与文献［10］报道基本一致，故化合物10鉴定为间苯三酚。

致谢：所有光谱数据均由中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室分析测试中心测定。

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Chemical Constituents from Cassia agnes Brenan

HUANG Bo1，HUANG Zhen-yuan1，WU La-bin1，LI Wen1，JIANG Bei1*，LI Sheng-hong2*1College of Pharmacy，Dali University，Dali 671000，China;2Kunming Institute of Botany，Kunming 650204，China

Ten compounds were isolated from ethyl acetate fraction of the methanolic extract of Cassia agnes Brenan and by means of spectroscopic analysis，their structures were identified as(-)-epiafzelechin(1)，12，13-dihydromicromeric acid(2)，betulin(3)，8(17)，12E，14-labdatrien-19-ol(4)，β-sitosterol(5)，daucosterol(6)，tetracosanoic acid 2，3-dihydroxypropyl ester(7)，sitoindoside I(8)，9Z，12Z-octadecadienoic acid(9)and phloroglucinol(10).All compounds were isolated from this plant for the first time.

Cassia agnes Brenan;chemical constituents;structural analysis

1001-6880(2012)04-0437-03

2011-10-08 接受日期：2012-01-16

*通讯作者 Tel：86-872-2257316;E-mail：northjiang@yahoo.com;shli @mail.kib.ac.cn

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