VEGF与TK1的检测对乳腺癌的诊断价值

肖 庆，韦庆文，蓝宇萍

乳腺癌是最为常见的妇科恶性肿瘤之一，其预后的判断是一个众所关注的问题。肿瘤的生长和转移是一个多步骤的复杂过程，在很大程度上依赖于肿瘤血管生成。目前的研究认为:血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是肿瘤血管生成过程中作用最强、特异性最高的促血管生长因子［1］，VEGF与乳腺癌血管生成密切相关，并能促进其生长、浸润及转移。另大量临床研究表明，胸苷激酶1 (TK1)是与细胞DNA合成和细胞增殖密切相关的关键酶，在非增殖细胞和健康人血清中含量极微或检测不到，但在乳腺癌患者中TK1伴随着肿瘤细胞的急剧增殖而升高，并与疾病的轻重程度有关［2］。因此检测VEGF和TK1可作为反映乳腺癌生物学行为的指标之一。本研究应用化学发光法检测血清中VEGF与TK1的含量，对这两种指标与临床指标的关系进行分析，旨在为乳腺癌患者的综合治疗和判断术后预后提供相关的理论依据。

1 资料与方法

1.1 资料 选取我院普外科2007～2010年乳腺癌根治术或改良根治术切除标本36例，有淋巴结转移者22例，无淋巴结转移者14例。同时选取乳腺良性病变者26例。患者均为女性，年龄37～65岁，平均年龄(54±7)岁。2组患者术前均未经任何治疗。正常对照组为36例来自体检的正常健康女性，年龄33～65岁，平均年龄(55±8)岁。

1.2 方法 主要试剂:血清VEGF、TK1浓度检测均采用化学发光法，试剂盒购自罗氏公司。标本检测:所有受试者均于晨起7时抽取空腹静脉血约3 m l，分离血清，-20℃冷冻保存，严格按说明书进行操作。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计分析软件处理数据。组间用t检验对检测数据进行处理，结果用±s表示，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清VEGF与TK1的比较 乳腺癌患者的VEGF与TK1值明显高于乳腺良性病变组和正常对照组，差异均有显著性(P＜0.05)，而乳腺良性病变组和正常对照组之间VEGF与TK1值则差异无显著性(P＞0.05)，见表1。

表1 各组血清VEGF与TK1测定结果(±s)

表1 各组血清VEGF与TK1测定结果(±s)

组别 例数年龄(岁) VEGF(ng/ml) TK1(pg/ml) 36 50±5 171.02±15.17 6.60±17.00乳腺良性病变组 26 59±8 75.25±8.20 4.08±1.73正常对照组 26 51±6 52.91±7.23 2.86±1.33 t值乳腺癌组＜0.05 ＜0.05 38.341 40.511 P值

2.2 有否腋窝淋巴结转移血清VEGF及TK1测定 本组乳腺癌病例经病理检查，有腋窝淋巴结转移者为22例，无转移者为14例，淋巴结转移阳性者血清VEGF、TK1水平显著高于阴性者(P＜0.05)，VEGF水平随TK1增高而增加(P＜0.05)，见表2。

2.3 乳腺癌患者血清VEGF及TK1水平的相关分析 从表1和表2可以看出，从正常对照组，乳腺良性病变组到乳腺癌组VEGF及TK1浓度不断升高，且随着乳腺癌血清中TK1表达量升高，VEGF水平也升高，两者之间存在呈正相关关系。TK1是乳腺癌的致癌因子，主要起到促进乳腺癌形成和加速其发展的作用;VEGF对乳腺癌淋巴结转移具有间接促进作用，有助于判断有无淋巴结转移及预后。

表2 有否腋窝淋巴结转移者血清VEGF及TK1测定结果(±s)

表2 有否腋窝淋巴结转移者血清VEGF及TK1测定结果(±s)

注:阳性与阴性比较，△P＜0.05。

淋巴转移情况 例数 年龄(岁) VEGF(ng/l) TK1(pg/ml) 22 54±2 136.40±11.89 7.06±2.13有淋巴结转移 14 57±5 310.11±28.50△ 3.48±1.16无淋巴结转移△

3 讨论

乳腺癌是最为常见的妇科恶性肿瘤之一，其预后的判断是一个众所关注的问题。关于乳腺癌发生的分子机制尚不清楚，其发生是由一系列基因损伤所致基因突变的累积诱导效应下原癌基因的激活以及抑癌基因失活，继而引发细胞的过度增殖或异常的程序性死亡。VEGF是.从牛垂体滤泡星状细胞的体外培养液中纯化出一种特异性作用于血管内皮细胞(EC)并促进有丝分裂的物质，VEGF作为特异性的新生淋巴管刺激因子，可调节肿瘤周淋巴血管生成，肿瘤VEGF过表达引起外周淋巴管直径增加。可以认为VEGF是淋巴管内皮细胞和新生淋巴管的特异性标志物［3］。因此VEGF是肿瘤血管生长及肿瘤生长和转移的关键因素。Mokbel［4］报道，富于VEGF的乳腺癌病例，其预后明显比VEGF表达弱者差，认为乳腺癌VEGF的表达与血管生成及早期复发有关。

TK1为一种嘧啶补救合成DNA的关键酶，是一个S期特殊酶。TK1水平的升降与DNA在细胞周期S期的合成速度密切相关，肿瘤增殖细胞TK1的水平在细胞周期的G1和S期交界处开始升高，随着细胞进入G1晚期，TK1的水平逐渐上升，直至S和G2期交界处。这种高TK1水平从S晚期持续到M早期。TK1在非增殖细胞和健康人血清中含量极微或检测不到，但随着肿瘤细胞的急剧增殖而升高。大量研究表明，TK1检测适用于临床肿瘤的治疗效果监测和预后评估，以及对健康人群发生恶性肿瘤风险的早期预测和筛查［5-6］。从上述试验结果表明，乳腺癌患者组和健康体检组比较差异有显著性(P＜0.05)，由此可见TK1作为辅助诊断机体是否患有乳腺癌作用非常明显，虽然TK1的特异性不高，但TK1有较高的敏感性，因此对早期乳腺癌的发现有很大的辅助作用。本文研究显示，乳腺癌患者血清TK1水平明显高于正常对照组，进一步证明了高水平TK1对乳腺癌的发生具有重要的促进作用，是女性乳腺癌发生的危险因素。

本文研究结果显示，乳腺癌患者血清VEGF及TK1均显著高于正常人，二者浓度过高均可能是发生乳腺癌的危险因素，在其发生发展过程中发挥着重要作用。VEGF及TK1水平存在正相关，这表明VEGF及TK1参与了乳腺血管的病变过程，当TK1浓度过高时，引起DNA复制、转录异常，从而促进肿瘤发生［7］。乳腺癌患者血清VEGF及TK1水平随淋巴结转移而增加，差别具有统计学意义(P＜0.05)，这些对乳腺癌患者的疾病的严重程度也有一定的临床参考价值。目前多数研究认为肿瘤中VEGF含量可以作为预后因子，其高表达预示着患者无瘤生存率(RFS)和总体生存率(OS)的降低［8］，Salven［9］研究发现乳腺良性肿瘤患者的可溶性 VEGF(SVEGF)不高于328 pg/ml，局限性乳腺癌患者的S-VEGF范围是11～539 pg/ml，有转移乳腺癌患者的S-VEGF范围是7～1347 pg/ml，表明乳腺癌的播散伴随循环中VEGF水平的提高。由此可见，VEGF是对乳腺癌预后价值预测的理想标志物。

VEGF可促进乳腺癌血管形成，进而促进乳腺癌的生长、浸润和转移。TK1具有致癌性的主要原因是它能刺激乳腺细胞的过度增殖。TK1浓度大于风险值的，较大一部份都伴随着一些亚健康疾病。随着年龄的增长，生理进程差异，肿瘤病变的频率逐渐增加，可能出现TK1有意义的升高变化。TK1检测增高的体检者应定期检测，若TK1连续几次检测都为阳性且有持续上升趋势，则高度注意急躁早期诊断和预防乳腺癌的发生。

综上所述，VEGF及TK1可作为反映乳腺癌生物学行为的指标之一。根据本文结果，我们认为，乳腺癌的VEGF和TK1表达明显高于乳腺良性病变;VEGF阴性的乳腺癌预后较好;VEGF可以作为乳腺癌的预后指标。联合检测VEGF及TK1水平可以更好地为临床判断预后及治疗提供参考依据。可为乳腺癌的预防及临床干预起到重要的指导作用，对乳腺癌的预防可起到积极作用，降低乳腺癌的发生风险。

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［2］ 沈金根，郑 丽，荆 宁，等.胸苷激酶1在乳腺癌诊断和预后判断中的应用研究进展［J］.中国医药生物技术，2007，2(6):458-459.

［3］ Purushotham AD，Bennett Britton TM，Klevesath MB，et al.Lymph node status and breast cancer-related lymphedema［J］.Ann Surg，2007，12(6):42-45.

［4］ Mokbel K.Recent advanced in breast cancer:the 27th ESMO Congress 2002［J］.Curr Med Res Opin，2009，9(2):142.

［5］ Underwood JCE.General and systematic pathology:with student consult online access(paperback)［M］.4th ed.London:Churchill Livingstone，2004(5):410-432.

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