五种伞形科植物提取物抑菌活性研究

胡林峰 吕文彦 周琳 李肖

摘要：采用生长速率法测定当归（Ａｎｇｅｌｉｃａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、白芷（Ａ. ｄａｈｕｒｉｃａ）、窃衣（Ｔｏｒｉｌｉｓ ｓｃａｂｒａ）、柴胡（Ｒａｄｉｘ Ｂｕｐｌｅｕｒｉ）和防风（Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａ ｄｉｖａｒｉｃａｔａ）５种伞形科（Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ）植物乙醇提取物对６种植物病原真菌的抑菌活性。结果表明，浓度为０．１ ｇ（干样）／ｍＬ时，除当归提取物对小麦赤霉病菌（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ）外，５种不同植物提取物对６种植物病原真菌菌丝生长有一定程度的抑制作用。当归提取物能完全抑制水稻纹枯病菌（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ）、小麦纹枯病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ）和番茄灰霉病菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）菌丝的生长。白芷提取物和窃衣提取物能够完全抑制水稻纹枯病菌和小麦纹枯病菌菌丝的生长。

关键词：伞形科（Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ）；植物提取物；病原真菌；生长速率法；抑菌活性

中图分类号：Ｓ４８２．２９ 文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０12）16－3490-02

Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｆｉｖｅ Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ Ｐｌａｎｔ Ｅｘｔｒａｃｔｓ Ａｇａｉｎｓｔ Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏｇｅｎｓ

ＨＵ Ｌｉｎ－ｆｅｎｇ１ａ，Ｌ?譈 Ｗｅｎ－ｙａｎ１ｂ，ＺＨＯＵ Ｌｉｎ２，ＬＩ Ｘｉａｏ１ａ

（１.Ｈｅｎａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ａ． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ； ｂ． School of Resources and Enviroment， Ｘｉｎｘｉａｎｇ ４５３００３， Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ， Ｈｅｎａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５０００２， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ Iｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ５ ｐｌａｎｔ（Ａｎｇｅｌｉｃａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ，Ａ. ｄａｈｕｒｉｃａ，Ｔｏｒｉｌｉｓ ｓｃａｂｒａ，Ｒａｄｉｘ Ｂｕｐｌｅｕｒ，Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａ ｄｉｖａｒｉｃａｔａ）ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔ ６ ｐｌａｎｔ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ． Ｂｉｏａｓｓａｙ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ５ ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｈａd ｃｅｒｔａｉｎ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ６ ｐｌａｎｔ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ０．１ ｇ／ｍＬ（ｄｒｙ ｓａｍｐｌｅ）． Ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ Ａ. ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｍｙｃｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ， Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ ａｎｄ Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ completely． Ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ Ａ. ｄａｈｕｒｉｃａ ａｎｄ Ｔ. ｓｃａｂｒａ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｍｙｃｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｒ. ｃｅｒｅａｌｉｓ ａｎｄ Ｔ. ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ； ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔ； ｐａｔｈｏｇｅｎ； ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ｍｅｔｈｏｄ； ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ

当归（Ａｎｇｅｌｉｃａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、白芷（Ａｎｇｅｌｉｃａ ｄａｈｕｒｉｃａ）、窃衣（Ｔｏｒｉｌｉｓ ｓｃａｂｒａ）、柴胡（Ｒａｄｉｘ Ｂｕｐｌｅｕｒｉ）和防风（Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａ ｄｉｖａｒｉｃａｔａ）都是伞形科（Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ）植物，具有一定的药用价值，主要用于活血、抗菌、消炎等。伞形科植物在抗菌活性方面的表现近年来逐渐受到研究者重视［１－５］。研究认为，伞形科植物产生的挥发油及苯丙素类化合物是其主要抑菌活性物质［６］。试验对５种伞形科植物药用部位提取物的抑菌活性进行了初步研究，测定其乙醇提取物对几种主要农作物病原真菌的抑制作用，以探索其在农用杀菌剂领域的开发和应用前景。

１试验材料

１．１供试植物样品

２００９年从河南省新乡市郊区采集供试植物，室内阴干后用植物粉碎机粉碎，过２０目筛，低温贮存备用。具体情况见表１。

１．２供试菌种

６种植物病原菌为棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ），小麦赤霉病菌（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ），水稻纹枯病菌（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ），苹果炭疽病菌（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ ｃｉｎｇｕｌａｔａ），小麦纹枯病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ），番茄灰霉病菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）。以上菌种由河南科技学院制药工程生物测定实验室提供，试验前７ ｄ转接至培养皿平板中活化培养备用。

２试验方法

２．１植物提取物的制备

植物样品各取２００ ｇ置于３ ０００ ｍＬ三角瓶中，加入９５％乙醇溶液浸泡植物材料进行冷浸提取，浸泡３ ｄ后过滤，添加新溶液。反复浸提３次，溶剂总量４ ０００ ｍＬ。合并滤液，蒸发溶剂得各植物提取物。称量提取物质量，计算提取率（表２）。

２．２抑菌活性测定及数据分析

采用生长速率法［７，８］测定提取物对病原菌的离体抑菌活性。将植物提取物用丙酮和水等体积混合溶剂配制成１ ｇ（干样）／ｍＬ的提取液，取１ ｍＬ提取液用培养基定容至１０ ｍＬ，混匀后倒入直径９ ｃｍ培养皿中制成含药平板。含药平板中提取物浓度为０．１ ｇ（干样）／ｍＬ。试验设相应的溶剂为对照，每处理重复３次。用直径４ ｍｍ打孔器从活化培养病原菌的平板边缘打制菌饼，按无菌操作将菌饼倒扣接种于含药平板中央。在（２５±２）℃培养箱中培养７２ ｈ，十字交叉法测量菌落直径。按以下公式计算抑制率。

菌落生长直径＝菌落直径－菌饼直径；

抑制率＝■×100%。

采用ＳＰＳＳ １３．０软件对数据进行统计分析。

３结果与分析

采用生长速率法测定５种植物提取物对小麦纹枯病菌、小麦赤霉病菌、苹果炭疽病菌、棉花黄萎病菌、水稻纹枯病菌和番茄灰霉病菌菌丝生长的抑制作用，结果见表３。

５种植物提取物的生测结果表明，浓度为０．１ ｇ（干样）／ｍＬ时，除当归提取物对小麦赤霉病外，５种植物提取物对植物病原真菌的菌丝生长表现出不同程度的抑制作用。其中白芷提取物对水稻纹枯病菌，当归提取物对番茄灰霉病菌、水稻纹枯病菌和小麦纹枯病菌，窃衣提取物对小麦纹枯病菌具有完全抑制菌丝生长的作用。当归提取物对苹果炭疽病菌，防风提取物对小麦纹枯病菌，窃衣提取物对番茄灰霉病菌抑制率均高于９０.00％，分别为９１．９４％、９０．９１％和９０．６４％。总体上看，５种植物提取物对棉花黄萎病菌抑制率偏低，抑菌效果较好的是白芷、当归和窃衣提取物。白芷和窃衣提取物抑菌作用较强，对６种病原菌抑制率均达到５０.00％以上。当归提取物对６种病原菌具有较强的选择性，对番茄灰霉病菌、水稻纹枯病菌、小麦纹枯病菌的抑制率达到１００.00％，对苹果炭疽病菌抑制率也达到９０.00％以上，但对小麦赤霉病菌未检测到抑菌作用。

４小结与讨论

试验研究了５种伞形科植物药用部位的乙醇提取物对６种植物病原真菌的抑制作用。抑菌活性测定结果表明，白芷、当归和窃衣３种植物提取物对供试的多种病原真菌表现出较强的抑制作用，其抑菌活性成分均值得进一步研究。

伞形科植物在我国分布广泛，约有９０个属，５００余种，多种伞形科植物被人工栽培，其产品主要用作蔬菜和中草药［６，９］。以伞形科植物为对象进行系统的抑菌活性筛选及活性成分分离研究，有助于发现新的抑菌活性材料和活性物质。

参考文献：

［１］ 欧阳广娜．当归药效成分提取研究进展［Ｊ］． 实用中医药杂志，２０１１，２７（８）：５６９－５７０．

［２］ 夏黎明，姚成．中药白芷的研究现状［Ｊ］． 中医药研究，２００２，１８（５）：５６－５８．

［３］ 张义玲，冯成强，孟繁蕴，等．药用柴胡属植物产地与化学成分相关性研究［Ｊ］．生命科学研究，２００６，１０（４）：８６－８９．

［４］ 高咏莉．生药防风的化学成分与药理作用研究进展［Ｊ］． 山西医科大学学报，２００４，３５（２）： ２１６－２１８．

［５］ 中国科学院植物志编缉委员会．中国植物志第三分册：被子植物门双子叶植物纲伞形科（二）［Ｍ］．北京：科学出版社，１９８５．

［６］ 李端，周立刚，姜微波，等．伞形科植物抗菌成分的研究进展［Ｊ］．西北农林科技大学学报（自然科学版），２００５，３３（Ｓ１）：１６１－１６６．

［７］ 方中达．植病研究方法［Ｍ］．第三版．北京：中国农业出版社，１９９８．

［８］ 慕立义．植物化学保护研究方法［Ｍ］．北京：中国农业出版社，１９９４．

［９］ 袁昌齐．中国伞形科植物的民族植物学研究［Ｊ］．中国民族民间医药杂志，１９９９（４）：２２１－２２４．