顶空进样-毛细管气相色谱法测定伊潘立酮原料药中的溶剂残留

唐 俊 张云霞 葛海涛

江苏黄河药业股份有限公司，江苏阜宁 224400

顶空进样-毛细管气相色谱法测定伊潘立酮原料药中的溶剂残留

唐 俊 张云霞 葛海涛

江苏黄河药业股份有限公司，江苏阜宁 224400

目的建立测定伊潘立酮原料药有机残留溶剂的顶空气相色谱法。方法 采用顶空进样毛细管气相色谱法测定，色谱柱为DB-FFAP石英毛细管色谱柱（25 m×320μm×3μm）。氮气为载气，测定伊潘立酮原料药中丙酮、乙醇与石油醚的残留量。 结果 3种溶剂完全分离，在所考察的浓度范围内线性关系良好。伊潘立酮原料药中丙酮和石油醚的残留量的平均值分别为0.0371%、0.0291%，未检出乙醇。 结论 该方法简便、结果准确，适用于伊潘立酮原料药中有机残留溶剂的测定。

伊潘立酮；溶剂残留；顶空进样毛细管气相色谱法

伊潘立酮（IIoperidone)是一种口服新型非典型抗精神病药物[1]，用于治疗精神分裂症，对减轻精神分裂患者的阳性症状（如幻觉、妄想、思维紊乱、敌视、怀疑）和阴性症状（如反应迟钝、情绪淡漠、社交淡漠、少语）均有明显效果。该药于2009年5月6日在美国首次上市，其获准上市标志着对许多现有药物治疗仅部分有效的精神分裂症患者多了新的治疗选择。伊潘立酮在生产制备工艺中使用了有机溶剂乙醇、丙酮以及石油醚，上述溶剂可对人体产生危害，因此必须控制其在产品中的残留量[2]。目前尚未见到关于伊潘立酮的溶剂残留检测方法的研究和报道。本研究参照ICH颁布的残留溶剂研究指导原则及《药品注册管理办法》中的有关技术，建立顶空进样毛细管气相色谱法测定伊潘立酮原料药中3种有机溶剂残留的检查方法，并对其进行考察。

1 仪器与试药

HP6890气相色谱仪，HP7694顶空进样器，Chemstation工作站。乙醇、石油醚及二甲基甲酰胺（DMF）为色谱纯，丙酮为分析纯。伊潘立酮原料药为相关药业公司提供。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：DB-FFAP石英毛细管色谱柱（25 m×320μm×3μm）。柱温：程序升温，初始温度40℃，保持5 min，每分钟20℃升至180℃，保持 3 min；载气：氮气（N2）：流速 :1.0 mL/min，进样口温度：200℃；检测器（FID）温度：250 ℃；顶空进样器加热参数：平衡温度为80 ℃，转移管温度为90 ℃；平衡时间为30 min，进样时间为1 min。

2.2 溶液的配制

2.2.1 混合对照品贮备溶液制备 精密称取乙醇、丙酮及石油醚（60～90℃）适量，置于100 mL容量瓶中，加二甲基甲酰胺稀释至刻度，配制成每毫升含99.2μg乙醇、102.8μg丙酮和101.9μg石油醚的对照品贮备溶液[3]。准确量取5 mL对照品溶液置于顶空瓶中，密封待测。

2.2.2 供试品溶液 准确称取伊潘立酮原料药0.1 g于20 mL顶空瓶中；准确量取5 mL二甲基甲酰胺并溶解样品，密封，作为供试品溶液待测。

2.3 方法学考察

2.3.1 系统适用性实验 取混合对照品贮备溶液2 mL至顶空瓶中，90℃加热30 min后，顶空进样，记录色谱图。见图1。结果各组分的分离度均＞2.0，柱效＞5 000，量取二甲基甲酰胺（DMF）2.0 mL，顶空进样。结果表明空白对测定无干扰。见图2。

图1 混合对照品贮备溶液色谱图

图2 溶剂DMF色谱图

2.3.2 线性试验 精密量取混合对照品溶液0.1、0.5、1.0、2.5和5.0 mL分别置于10 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺至刻度。量取上述溶液及对照品溶液2.0 mL，分别置顶空瓶中，加盖，加热后顶空进样。按上述色谱条件进行分析并记录峰面积。以峰面积Y为纵坐标，浓度X（mg/mL）为横坐标，建立回归线性方程。见表1。

表1 回归方程与线性范围（n=6）

2.3.3 最低检测限 精密量取混合对照品溶液适量，加二甲基甲酰胺适当稀释后，精密量取2.0 mL，顶空进样，直到峰高约为基线噪声的2～5倍之间，得最低检出浓度，丙酮为0.27×10-6，乙醇为 0.5×10-6，石油醚为 0.34×10-6[4]。

2.3.4 精密度 精密量取混合对照品溶液5.0 mL，置100 mL量瓶中，加入DMF稀释至刻度，摇匀。分别置顶空瓶中，加盖，加热后顶空进样。按上述色谱条件进行分析并记录峰面积。计算得各溶剂峰面积的RSD（n=6）分别为1.7%、1.9%、3.1%。

2.3.5 重复性试验 取伊潘立酮原料药（20110301）6份，按照供试品溶液配制的规定，配制供试品溶液，进样测定，记录色谱图，按标准曲线法分别计算各有机溶剂残留量。结果乙醇在该批样品中未检出，丙酮平均含量0.035 9%（RSD=1.61%）,石油醚平均含量0.029%（RSD=2.93%）。

2.3.6 加样回收率 精密量取混合对照品储备液8.0、10.0、12.0 mL分别置100 mL量瓶中，加DMF稀释至刻度，制得相当于检查限度80%、100%、120%对照品溶液3份。取供试品（已知溶剂含量）0.2 g，精密称定，共9份，置20 mL顶空瓶中，分别精密加入上述3种浓度的对照品溶液2 mL（各3份，n=9），密封，振摇溶解[5]，同法进行测定，记录色谱图。由表2的结果可以看出，丙酮、乙醇以及石油醚在各种浓度下的回收率均在90%～110%之间，具有较高的准确性。

表2 加样回收率试验结果

2.3.7 样品测定 取混合对照品溶液和供试品溶液，按上述色谱条件进行检测，取平均值作为测定结果。三批样品结果见表3。从结果来看，伊潘立酮中残留溶剂主要是丙酮和石油醚。

表3 样品测定结果（%，n=5）

3 讨论

伊潘立酮原料药几乎不溶于水，所以选择二甲基甲酰胺为样品的溶解介质，其沸点较该原料药中含有的有机溶剂要高，因此在本研究建立的色谱条件下，二甲基甲酰胺在所有待测组分之后出峰，不干扰样品的测定。

伊潘立酮原料药中3种残留溶剂均为ICH中规定的应控制溶剂，都属于较低沸点、挥发性较高的有机溶剂，且蒸汽压较高，因此适合应用进行分析定量，完全可以用同一个色谱系统来同时定量，而且该顶空进样的进样方式不仅可以减少溶解样品所需的溶剂，还能够很大程度降低样品本身对色谱系统带来的干扰和污染。

本研究方法表明，对丙酮、乙醇以及石油醚的检测具有较高的灵敏度、精密度和准确性，方法丙酮、乙醇以及石油醚的保留时间分别为2.1、4.2、6、6.8及7.3 min，整个分析过程在10 min内完成，方法快速简便。本方法的建立进一步为伊潘立酮的质量控制和安全使用提供科学依据，具有非常重要的意义。

[1]徐勤耀，任白燕，杨琍苹，等.伊潘立酮的合成[J].中国医药工业杂志，2011，42（2）：88-89．

[2]王翰华，王向军，曾苏，等.顶空毛细管气相法测定鸡肝散提取物中有机溶剂残留量 [J].药物分析杂志，2008，28（2）：267-270．

[3]刘雪峰，衷红梅，席志芳，等.顶空气相色谱法测定红霉素原料药中的残留溶剂 [J].科学技术与工程，2010，28（10）：7066-7069．

[4]段东红，康玉英，刘世斌．毛细管气相色谱法检测多潘立酮中的残留溶剂[J].药物分析杂志，2006，13（4）：541-542．

[5]祝波，赵鲁青，陈安珍，等.顶空采样-毛细管气相色谱法分析格列美脲原料药中的溶剂残留 [J].色谱，2009，27（6）：755-759．

Determination of residue organic solvent in crude drug of IIoperidone by headspace-capillary gas chromatography

TANG Jun ZHANG Yunxia GE Haitao
Jiangsu Huanghe Medicine Co.,Ltd.,Fu'ning 224400,China

Objective To determin organic solvent residual volume in IIoperidone raw material by headspace gas chromatography.Methods The residual organic solvents including acetone, ethanol and petroleumether were quantitatively determined by headspace gas chromatography method.A column DB-FFAP(25 m×320μm×3μm)was adopted.N2 was the carrier gas.Results Three residual organic solvents were completely separated.The residues of solvents in IIoperidone were determined as follow,acetone was 0.0371% and petroleumether was 0.0291%,ethanol was not determined.Conclusion The method is simple,sensitive,accurate and be used for the quality control of IIoperidone.

IIoperidone;Residual organic solvent;Headspace gas chromatorgraphy

R927.2

B

2095-0616（2012）03-154-02

2011-12-05）