金樱根、茎提取物的抗炎、解热作用对比研究△

谭年秀，王嵩，江振霖，田素英*

(1.广州中医药大学，广东 广州 510006；2.广东药学院中山校区，广东 中山 528458)

金樱根、茎提取物的抗炎、解热作用对比研究△

谭年秀1，王嵩2，江振霖2，田素英2*

(1.广州中医药大学，广东 广州 510006；2.广东药学院中山校区，广东 中山 528458)

目的研究金樱根、茎提取物的抗炎、解热作用。方法通过小鼠足跖肿胀、腹腔毛细血管通透性和大鼠棉球肉芽肿实验观察金樱根、茎提取物的抗炎作用；通过干酵母制备大鼠发热模型，观察金樱根、茎提取物的解热作用。结果金樱根、茎提取物可减轻小鼠足跖肿胀，降低小鼠腹腔毛细血管通透性，对大鼠棉球肉芽肿的生成具有显着的抑制作用；金樱根醇提物和金樱茎水提物对发热大鼠有显著降温作用。结论金樱根、茎提取物对急、慢性炎症模型均有明显的对抗作用；金樱根醇提物和金樱茎水提物具有一定的解热作用。金樱茎在一定条件下可作为金樱根入药。

金樱根；金樱茎；抗炎；解热

金樱根为蔷薇科植物金樱子RosalaevigataMichx.的干燥根，为民间常用药物，具有固精涩肠功效，主要用于治疗滑精、遗尿、痢疾泄泻、崩漏带下、子宫脱垂、痔疾、烫伤等症[1-2]。近年来金樱根受到较广泛的应用，如妇科千金片、金鸡胶囊、广东凉茶、三金片、三金颗粒等[3]。但目前金樱根中常混用金樱茎，二者在抗炎、解热方面有何差异，未见报道。现就其抗炎、解热作用进行研究。

1 材料

1.1 试药

金樱根和金樱茎(购于广州致信药业有限公司，批号：20100820，经广东药学院副教授田素英鉴定为金樱子RoselaevigataMichx.的根和茎)；硫酸链霉素(华北制药股份有限公司，批号：0910102)；青霉素钠(哈药集团制药总厂，批号：A 080506813)；阿司匹林(拜耳医药保健有限公司，批号：BJ01117)；高活性酵母(安琪酵母股份有限公司，批号：GB/T20886)。

1.2 水/醇提取物

分别取金樱根和金樱茎2 kg，打成粗粉，分别用水以及70%乙醇以饮片-溶剂(1∶8)比例超声提取30 min，再置于烧瓶中加热回流30 min，纱布过滤，用旋转蒸发仪以及恒温水浴锅浓缩(醇提物浓缩至无醇味)分别得到金樱根水、醇提物，金樱茎水、醇提物(各含生药量为0.72 g·mL-1)，放入冰箱恒温保存备用。

1.3 动物

SPF级别，KM小鼠，SD大鼠，均购于广东省实验动物中心；许可证号：SCXK(粤)2008-0002。在清洁级动物房内饲养，每天早上喂养饲料以及换水，每2天更换一次垫料，并保持室内干净卫生，使房内通风透气，保证饲料和饮水正常。室温控制在(20±4)℃，湿度为(70±10)%。

2 方法

2.1 动物分组

每个实验均将小鼠或大鼠分为6组，每组10只，分别为金樱根醇提物组(下称根醇组)、金樱根水提物组(下称根水组)、金樱茎醇提物组(下称茎醇组)、金樱茎水提物组(下称茎水组)、阳性药物组、0.9%氯化钠溶液对照组。

2.2 给药剂量设置

分别以成人每天用量的剂量96 g·(60 kg)-1，根据体重换算法：动物用药剂量(g·kg-1)=K×人用量(g·kg-1)，计算小鼠(20 g，K=9.01)、大鼠(200 g，K=6.25)金樱根、茎提取物的剂量，小鼠：14.42 g饮片·kg-1，大鼠：9.97 g饮片·kg-1。阿司匹林0.2 g·kg-1。

2.3 抗炎作用

2.3.1 小鼠足跖肿胀实验 取体重18～22 g健康小鼠60只，雌雄各半，分6组，灌胃给药7 d，阿司匹林阳性组在第4天才开始灌胃给药，第7天末次给药后30 min，测量小鼠右后肢的体积，再往小鼠右后肢肉垫里注射用0.9%氯化钠溶液配制好的10%蛋清溶液(0.1 mL/跖)[4]，每小时测量小鼠右后肢体积，连测6次。计算肿胀率。

肿胀率=(致炎后体积-致炎前体积)/致炎前体积×100%

2.3.2 对小鼠腹腔毛细血管通透性影响 取体重18～22 g健康小鼠60只，雌雄各半，分6组，灌胃给药7 d，于末次给药1 h后，给小鼠尾静脉注射0.3%伊文思蓝[0.1 mL·(10g)-1]，随即腹腔注射0.6%醋酸[0.12 mL·(10g)-1]；20 min后，脱臼处死小鼠，在小鼠下腹部剪开一小口，用0.9%氯化钠洗涤溶液腹腔，收集洗涤液，离心处理15 min(3 000 r·min-1)，取上清液，用721分光光度计590 nm处测量其吸收度。

2.3.3 大鼠棉球肉芽肿实验[5]取体重150～200 g健康大鼠60只，雌雄各半，分6组，腹腔注射戊巴比妥钠溶液(80 mg·kg-1)，待其进入麻醉状态后，将大鼠右前肢腋下的毛剪掉，涂抹碘酒消毒，再用70%乙醇脱碘，用手术剪剪开1 cm长的小口，用眼科镊将灭菌脱脂棉球(每个重20.0 mg，每个棉球滴加青链霉素混合液)埋入皮下，缝合；术后2 h，连续灌胃给药7 d，第8天将大鼠脱臼处死，取出棉球，去除脂肪组织，用真空干燥器烘干棉球(真空度：0.09 MPa，温度：40 ℃)至恒重，减去原棉球重量，得出肉芽肿净重。

2.4 解热作用

实验前3 d每天测体温2次，挑选体温在36.6～38.0 ℃、体温变化不超过0.3℃的大鼠供制备发热模型用。取体重150～200 g健康大鼠60只，雌雄各半，分6组，连续灌胃给药6 d，第7天按[1 mL·(100 g)-1]的剂量给大鼠皮下注射20%酵母粉混悬液，1 h后开始测肛温，然后每1 h测1次，于第4小时有80%以上的大鼠体温升至0.5 ℃以上时即为造模成功。然后每1 h测1次体温，测9 h。以每次测得的体温与基础体温的差值△℃比较其解热效果。

2.5 数据统计

3 结果

3.1 抗炎作用

结果见表1、2、3。

表1 足跖肿胀实验结果

注：1.与空白对比，*P<0.05；2.与阳性对比，#P<0.05；3.与根水对比，△P<0.05；4.与根醇对比，▲P<0.05；下同。

表2 腹腔毛细血管通透性实验结果

表3 棉球肉芽肿实验结果

从表1中可以看出在第1小时时各给药组均有抑制足跖肿胀作用，且根水组、根醇组均强于茎水组、茎醇组，但与阳性组阿司匹林比较差异不具有统计学意义；在第2小时时根水组、根醇组、阳性组、茎水组均有抑制足跖肿胀作用，茎醇组抑制作用不明显，且根水组、根醇组与阳性组阿司匹林、茎水组均没有明显差异；在第3、4小时时根水组、根醇组、阳性组均有抑制足跖肿胀作用，但茎醇组、茎水组抑制作用不明显，且根水组、根醇组均与阳性组阿司匹林差异不具有统计学意义；在第5、6小时时根水组、根醇组、阳性组均均有抑制足跖肿胀作用，但根水组、根醇组没阳性组阿司匹林明显；茎水、茎醇组没有明显的抑制足跖肿胀作用。

从表2中可以看出根水组、根醇组、茎水组和茎醇组与空白组对比，差异均具有统计学意义，说明金樱根、茎水、醇提取物均可抑制炎性物渗出，但作用弱于阿司匹林；根醇组、茎醇组、茎水组、根水组组间比较，差异不具有统计学意义。

从表3中可以看出各组均具有抑制棉球肉芽肿作用，说明金樱根、茎水、醇提取物均对慢性炎症有抑制作用，且根水组最强，但其作用均弱于阳性组阿司匹林；根醇组作用强于与茎水组、茎醇组。

3.2 解热作用

结果见表4。

表4 解热实验结果

从表4中可知根醇组、根水组、茎水组、阳性组与空白组对比，差异具有统计学意义(P<0.05)，说明其有一定的解热作用，但其作用均弱于阿司匹林，茎醇组解热作用不明显；组间比较的结果显示，根醇组弱与根水组。根醇组、根水组解热作用与茎水组对比，差异均具有统计学意义(P<0.05)。

4 讨论

在足跖肿胀实验中，金樱根的水提物和醇提物自始至终均有明显抗炎作用(与空白组比，P<0.05)，且在第1、2、3、4小时时与阳性阿司匹林组差异无统计学意义(P>0.05)；而金樱茎的提取物在第1小时时有抑制足跖肿胀作用，且作用弱于金樱根提取物，在第2小时时茎水组尚有抑制足跖肿胀作用，但明显弱于金樱根的提取物，而茎醇组抑制作用不明显；在第3、4、5、6小时时茎醇组、茎水组抑制作用与空白组比无明显区分(P>0.05)。

在腹腔毛细血管通透性实验中，根水组、根醇组、茎水组和茎醇组均有抗炎作用(与空白组比，P<0.05)，但作用弱于阿司匹林(与阳性组比，P<0.05)；根醇组、茎醇组、茎水组、根水组组间比较差异不具有统计学意义(P>0.05)。

在抑制棉球肉芽肿实验中，金樱根、茎各提取物均具有抑制棉球肉芽肿作用(与空白组比，P<0.05)，且根水组最强，其次是根醇组，其作用均弱于阳性组阿司匹林(与阳性组比，P<0.05)；但根提取物组作用强于与茎提取物组。

以上说明金樱根的水、醇提取物抗炎作用整体上强于其茎的水、醇提取物。但在不同的实验中强弱有所不同，这可能与其所产生的抗炎机制不同有关。

大鼠解热实验结果表明，金樱根的水、醇提取物以及其茎的水提物有一定的解热作用(与空白组比，P<0.05)，但其作用均弱于阿司匹林(P<0.05)，茎醇组解热作用不明显；根醇组弱于根水组(P<0.05)。说明金樱根的解热作用好于金樱茎。

综上结果表明，金樱根的抗炎、解热作用比金樱茎要强些，故建议金樱根中不要混入金樱茎，尤其是地上茎部分。再者无论是金樱根或是金樱茎，其水提取物的抗炎、解热作用在一定程度上均强于其醇提物，这可能与其所含成分不同有关，这有待下一步进行研究。

[1] 江苏新医学院.中药大辞典[M].上册.上海：上海科学技术出版社，1977：1407.

[2] 日华子着，尚志均辑复.日华子本草[M].合肥：安徽科学技术出版社，2005：156.

[3] 刘佩沂,田素英,梅全喜.金樱根的研究进展[J].海峡药学,2010,22(1)：98-100.

[4] 梅全喜，钟希文，高玉桥，等.复方土牛膝糖浆剂抗炎作用的实验研究[J].中药材，2007,30(5)：586-588.

StudyAnti-inflammatoryandAntipyreticEffectofExtractfromRootandStemofRosalaevigataMichx.

TAN Nian-xiu1，WANG-Song2，JIANGZhen-Lin2，TIAN Su-ying2

(1.GuangzhouUniversityofChineseMedicine,Guangzhou510006，China; 2,ZhongshanCampusofGuangdongPharmaceuticalUniversity,Zhongshan,528458,China)

Objective: Study anti-inflammatory,antipyretic effect of extract from root and stem ofRosalaevigataMichx..MethodsTo observe anti-inflammatory action on extract from root and stem ofRosalaevigataMichx..Through mouse model of paw swelling caused by egg white and peritoneal vascular permeability increased by acetic acid,and rat model of cotton-ball granulation.Observe antipyretic effect of extract from roots and stems ofRosalaevigataMichx.on fever rat model caused by dry yeast.ResultsThe extract from root and stem ofRosalaevigataMichx..Both have inhibitory effect on mice paw swelling,peritoneal capillary permeability and rat cotton-ball granuloma.The alcohol extract from root and the water extract from stem have a obvious cooling effect in fever rat model.ConclusionThe extract from root and stem ofRosalaevigataMichx.have inhibitory effect on acute and chronic inflammatory models.The alcohol extract from root ofRosalaevigataMichx.and the water extract from stem have good antipyretic action.The stem could replace the rootas traditional Chinese medicine in certain condition.

RosalaevigataMichx.; Anti-inflammatory;Antipyretic

△

广东省中山市健康基地专项基金(2009H020)

*

田素英，E-mail：zsxqtsy@126.com

2012-03-07)