HPLC法测定蒙成药陶都格其－7中栀子苷的含量

海长江

内蒙古自治区通辽市医院，内蒙古 通辽 028000

HPLC法测定蒙成药陶都格其－7中栀子苷的含量

海长江

内蒙古自治区通辽市医院，内蒙古 通辽 028000

目的：建立高效液相色谱法测定蒙成药陶都格其－7中栀子苷含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为十八烷基键和硅胶；流动相为乙腈－水（15：85）；流速：1.0mL／min；检测波长：238nm；柱温为室温；进样量：10μL。结果：栀子苷的进样量在4.2～16μg（r＝0.9999）范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系，平均回收率为100.29%，RSD为0.14%（n＝6）。结论；该方法简单、快速、准确，可用于蒙成药陶都格其－7中栀子苷的含量测定。

陶都格其－7；HPLC；栀子苷；含量测定

蒙成药陶都格其－7出自《医法海鉴》，性凉，由诃子、栀子、川楝子、通经草、铁屑（制）、小茴香、甘草等七味组成，具有清热明目的功能，主治眼睑糜烂、昏朦症、视力减退等眼病［1］。本方剂型原为搅合剂，但通辽市蒙医研究所、内蒙古民族大学附属医院等医疗机构制剂室均制出水丸。采用高效液相色谱法对陶都格其－7中的栀子苷含量进行测定，方法简单、快速、准确，可用于蒙成药陶都格其－7的质量控制。

1 仪器与试药

LC－10ATvp型高效液相色谱仪（日本岛津）；AUW120型电子天平（日本岛津）；BS－600型电子天平（上海友生）；AS系列超声波清洗机（天津奥特塞恩斯）。

栀子苷对照品（中国药品生物制品鉴定所，批号：110749－200714）；陶都格其－7（通辽市蒙医研究所制剂室，批号：20120101、20130532）；乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯，水为超纯水。

2 方法［2］与结果

2.1 色谱条件 填充剂为十八烷基键和硅胶，流动相为乙腈－水（15：85），检测波长为238nm，流速为1.0mL／min，柱温为室温，供试品与对照品进样量为10μL。

2.2 对照品的溶液制备 取栀子苷对照品4.2mg，精密称定，置100mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 供试液的制备 取套都格其－7研细，约取1g，精密称定，置50mL的三角瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声处理20min钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密吸取续滤液10mL，置25mL量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀。

2.4 阴性对照液的制备 取缺栀子阴性对照品约取1g精密称定，置50mL的三角瓶中，照供试品溶液的制备方法制备，即得。

2.5 专属性考察 分别吸取栀子苷对照品溶液、供试品、阴性样品溶液各10μL进样，按上述色谱条件进行检测。结果供试品溶液中栀子苷与杂峰完全分离，阴性样品溶液无干扰。谱图见图1、2、3。

2.6 线性关系考察 分别精密吸取栀子苷对照品溶液1、2、3、4mL置10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密吸取上述溶液10μL，注入液相色谱仪，测定其峰面积。并以峰面积（Y）对栀子苷的进样量（X）进行线性回归，得回归方程：Y＝5.38157e－005*X－0.164976，r＝0.9999。结果表明，栀子苷对照品进样量在4.2～16μg范围内，与峰面积具有良好的线性关系。

2.7 精密度实验 精密吸取对照品溶液10μL，在相同色谱条件下分别重复进样6次，分别测定峰面积的积分值，栀子苷的RSD为0.57%（n＝6），结果表明仪器精密度良好。

2.8 稳定性实验 精密吸取同一供试品10μL，每隔2h注入液相色谱仪，记录色谱图，测定其峰面积积分值，结果RSD为0.75%（n＝6），表明供试品溶液在12小时内稳定性良好。

2.9 重现性实验 密吸取同一份供试品溶液各10μL，在上述色谱条件下分别重复进样6次，记录色谱图，测定其峰面积积分值，结果栀子苷的平均含量2.15μg／mL，RSD 为1.39%（n＝6），分析方法重复性良好。

2.10 加样回收率 取已知含量的供试品1.00g，分别精密加入一定量的对照品，按2.2.2项下的方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定，计算加样回收率。结果见表1，栀子苷的平均回收率为100.29%，RSD为0.14%（n＝6）。

表1 加样回收试验测定结果

2.11 样品含量测定 吸取供试品溶液10μL注入液相色谱仪，记录色谱图，测定峰面积。结果见表2。

3 结论

通过蒙成药陶都格其－7中栀子苷含量的连续测定、阴性溶液的干扰试验、样品稳定性、仪器精密度及其加样回收率的试验，表明该方法简单、快速、准确，可用于蒙成药陶都格其－7中栀子苷的含量分析。

［1］蒙医学编辑委员会.中国医学百科全书·蒙医学［M］.上海：上海科学技术出版社，1992：264.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典（第一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：附录36.

R284.2

A

1007－8517（2013）16－0028－02

2013.06.22）