盐酸克林霉素的核磁共振波谱研究

崔雪红

（天津市捷威动力工业有限公司，天津 300384）

盐酸克林霉素 (Clindamycin Hydrochloride)，又称氯林可霉素，氯洁霉素等，于20世纪70年代上市，其抗菌活性强，抗菌谱广，对革兰氏阳性菌有明显抗菌活性。目前国内主要用于人医临床和应用，但在兽药临床上具有广阔的应用前景。该药物化学名为6-(1-甲基-反-4-丙基-L-2-吡咯烷甲酰氨基)-1-硫代-7(S)-氯-6,7,8-三脱氧-L-苏式-α-D-半乳辛吡喃糖苷盐酸盐，已有文献[1]对其进行了结构归属，但部分数据值得商榷，而且所用溶剂为DMSO-d6，对部分信号有掩盖。因此我们选择氘代吡啶作为溶剂（化合物为盐酸盐，吡啶做溶剂较DMSO溶解性更好）重新对其进行了比较全面的波谱表征，并做了详尽的解析和谱峰归属，以期为同类型的有机药物分子的结构鉴定提供一点借鉴。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

盐酸克林霉素由新乡瑞特精细化工有限公司提供（结构式见图1），Pyr-d5为美国CIL公司产品。

核磁共振波谱数据用BRUKER Avance-300核磁共振波谱仪测试，1H和13C NMR及DEPT-135用QNP四核探头检测，1H和13C NMR观测频率分别为300.13MHz和75.47MHz。二维图谱用BBI探头测定。溶剂为 Pyr-d5，兼做1H NMR（δ=8.74ppm）和13C NMR（δ=150.3ppm）内标（均为最低场信号位移数值）。1H NMR谱采样脉冲宽度30°，扫描次数16；13C NMR谱采样脉冲宽度90°，扫描次数10K；DEPT-135扫描次数5K；1H-1H COSY扫描次数为8，采样数据点阵 t2×t1=1024×256；HMQC 和 HMBC 扫描次数均为 8，采样数据点阵 t2×t1=1024×256。（伯）远程偶合相关，归属为C-18，通过HMQC确定δ2.25×10-4为H-18。由此，剩余的一个甲基δ2.98（3H,s）×10-4为 H-16，通过 HMQC 确定 δ41.5×10-4（伯）为 C-16。H-13和 H-14均与 δ37.7（叔）×10-4远程偶合相关，归属为 C-11，HMQC确认 δ2.27×10-4为H-11。

图1 盐酸克林霉素的化学结构

HMBC 谱中，C-13和 C-16均与 δ2.64×10-4远程偶合相关，归属为H-12，通过HMQC，确认δ62.3（仲）×10-4为 C-12，并确认 δ3.64×10-4为 H-12的另一个质子。则剩余的 δ37.2（仲）×10-4为 C-10，HMQC 确认 δ2.12×10-4为 H-10，H-10 的一个质子与H-11叠加在一起较H-11稍低场一些。C-16和C-10与δ4.48×10-4远程偶合相关，归属为H-9，HMQC 确认 δ69.2（叔）×10-4为 C-9。

至此全部谱峰归属完毕，具体数据见表1。

2 结果与讨论

2.1 盐酸克林霉素的1H和13C NMR谱信号的归属

氢谱显示该化合物有30个质子，碳谱显示化合物有18个碳，DEPT-135显示化合物中有4个仲碳，1个季碳，其余13个碳为伯碳和叔碳。

氢谱中由化学位移及偶合常数可以辨认出δ5.83×10-4%（1H,d）为 H-1（异头质子），δ0.73×10-4（3H,t）为H-15，δ1.64×10-4（3H,d）为H-17。结合1H-1H COSY 可以辨认出 H-2（5.02×10-4）、H-3（4.40×10-4）、H-4（4.78×10-4），H-14（1.03×10-4）、H-13（1.20×10-4）及 H-6（5.25×10-4）。结合 HMQC 可确定C-1、C-2、C-3、C-4、C-6、C-13、C-14、C-15 及 C-17。13C NMR中，由化学位移可以知道δ172.0×10-4为 C-8 酰胺羰基碳，HMBC 中，C-8 和 δ9.18（1H,br）远程偶合相关，且δ9.18ppm处质子经重水交换后消失，确认为NH。

HMBC 谱中，H-6和 H-1与 δ71.0（叔）×10-4处碳远程偶合相关，H-6和H-17与δ60.3（叔）×10-4处碳远程偶合相关，分别归属为 C-5（δ71.0×10-4）和C-7（δ60.3×10-4）。通过 HMQC 谱可确定H-5（δ4.87×10-4） 和 H-7（δ4.92×10-4）。H-1 与 δ13.7×10-4

表1 盐酯克林霉素中1H和13C的核磁共振值（溶剂：Pyr-d5）

2.2 讨论

选用吡啶做溶剂，溶剂对信号无掩盖，仅氢谱中质子峰有部分重叠，且HMBC中氨基与C-6、C-8的相关信号及1H-1H COSY中NH与H-6的信号均清晰可辨，较DMSO-d6为好，但羟基峰未能显示。

1H NMR显示H-12的两个质子化学位移相差很大（1×10-4），这是由于五元环的影响，使得 H-12的两个质子不能自由旋转，导致化学环境不同而致。

H-16、H-12及H-9的化学位移较正常值均向低场位移了0.5×10-4左右，这是因为盐酸与该化合物中H-16连接的氮成盐酸盐的原因[2]。H-16的甲基信号较H-18宽，这是由于C-16连接在与盐酸成盐的氮原子上，受14N核电四极矩驰豫效应影响所致[3]，H-9、H-12也是此原因，同时此效应导致H-9和H-12的信号变宽，耦合裂分看不到。

［1］李建军,丁元晨,王璐.检验检疫科学[J].2004,14(3):42-44.

［2］梁晓天.核磁共振高分辨氢谱的解析和应用)[M].北京:Science Press(科学出版社),1982,177-184.

［3］R.M.Silverstein,G.C.Bassler,Terence C.Morrill,Spectrometric Identification of Organic Compounds 5th ed.[M],New York:John Wiley&Sons,1991:185.