阿维菌素和甲维盐对家蚕的毒性测定

沈忠明，孙海燕，戴建忠，陈伟国

（1.许村镇农技水利服务中心，浙江海宁314409；2.海宁市蚕桑技术服务站，浙江 海宁 314400）

阿维菌素和甲维盐对家蚕的毒性测定

沈忠明1，孙海燕2，戴建忠2，陈伟国2

（1.许村镇农技水利服务中心，浙江海宁314409；2.海宁市蚕桑技术服务站，浙江 海宁 314400）

本文测定了阿维菌素和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（简称“甲维盐”）4种杀虫剂制剂对家蚕的急性食下毒性和残毒期，结果表明：对3龄起蚕的LC50值分别为阿维菌素乳油7.2343×10-4mg/L，阿维菌素水乳剂7.6512×10-4mg/L，甲维盐微乳剂8.5940×10-4mg/L，甲维盐乳油14.0112×10-4mg/L。阿维菌素和甲维盐4种制剂的相同质量浓度（13.33 mg/L）稀释液喷洒桑树，在桑叶上的残毒期分别为3.2%阿维菌素乳油2400倍约为50 d，1.8%阿维菌素水乳剂1350倍、2.3%甲维盐乳油1725倍约为60 d，2.2%甲维盐微乳剂1650倍＞60 d；阿维菌素类4种制剂对家蚕的急性食下毒性极强，处理间差异较小，但在桑叶上的残毒期很长，处理间差异较大。

阿维菌素；甲维盐；家蚕；毒性

阿维菌素（Avermectin）是由灰色链霉菌（Strepto⁃myces avermitilis）发酵产生的，具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯化合物，被作为杀虫剂在农业和畜牧业中广泛使用。为提高活性、扩大抗虫谱和降低毒性，通过诱变、生物转化和化学修饰等方法，产生了阿维菌素类衍生物，目前已商品化的有伊维菌素（Ivermectin）、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（又名埃玛菌素，简称甲维盐，Emamectin Benzoate）、埃普里诺菌素（又名乙酰氨基阿维菌素，Eprinomectin）、和多拉菌素（Doramectin）等4种化学结构改造产物［1-2］，其中阿维菌素、伊维菌素、甲维盐主要用作农作物杀虫剂［3］。随着对杀虫剂的安全性和环保性要求提高，从传统的乳油制剂向微乳剂和水乳剂等水性化农药剂型发展［4］，由此，使得阿维菌素类杀虫剂的产品类型越来越丰富。尽管近年来阿维菌素类杀虫剂对家蚕的毒性研究报道较多［5-10］，但涉及的杀虫剂剂型种类不多，且以急性毒性研究为主，结合在桑叶上的残毒期测定较少［9-10］。为此，我们比较了阿维菌素和甲维盐4种制剂对家蚕的急性毒性和桑叶上的残毒期，为该类杀虫剂在农业生产上的合理使用和对养蚕生产的安全性评价提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料

供试农药：3.2%阿维菌素乳油，浙江钱江生物化学股份有限公司生产，农药登记证号PD20110266；1.8%阿维菌素水乳剂，浙江钱江生物化学股份有限公司生产，农药登记证号PD20110261；2.3%甲维盐乳油，浙江钱江生物化学股份有限公司生产，农药登记证号PD20096698；2.2%甲维盐微乳剂，浙江海正化工股份有限公司生产，农药登记证号PD20110495。

家蚕品种：白玉×秋丰，浙江省海宁市新兴蚕种制造有限公司生产。

桑树品种：海宁市盐官镇城北村郭建鑫农户的桑园。强桑1号，3年生，中干偏低养成，栽植密度为每667 m2桑园栽植800株。

1.2 对家蚕的急性食下毒性测定

经预备试验，将阿维菌素乳油、阿维菌素水乳剂、甲维盐乳油、甲维盐微乳剂等4种杀虫剂均稀释成5～7个梯度浓度，取适熟桑叶分别浸入不同处理的药液中1 min，取出后自然晾干，置于保鲜盒内备用，各处理区用20头3龄起蚕供试，在26.5±1℃、相对湿度75%～85%的恒温室内饲养，24 h后改用新鲜无毒桑叶继续饲养至4龄饷食，每天调查幼虫中毒死亡率，以清水处理为空白对照，3次重复。采用DPS统计软件对药液质量浓度对数与幼虫死亡率概率值进行线性回归分析［11］，求出致死中浓度（LC50）和95%置信限。

1.3 在桑叶上的残毒期试验

将阿维菌素类4种供试杀虫剂均稀释成有效成份为13.33 mg/L的药液，即3.2%阿维菌素乳油2400倍，1.8%阿维菌素水乳剂1350倍，2.3%甲维盐乳油1725倍，2.2%甲维盐微乳剂1650倍。每种药液分别喷10株桑树，枝条顶端最大叶位以上用标签标记，防止采摘未喷药的桑叶。喷药后15 d开始每隔5 d采摘桑叶饲喂3龄起蚕，直至未见中毒蚕出现，分别于喷药后15 d、20 d、25 d、30 d、35 d、40 d、45 d、50 d、55 d、60 d采叶饲喂3龄起蚕，共10批供试蚕，每个批持续喂饲1个龄期，以蚕能就眠蜕皮为正常，至4龄起蚕时统计中毒蚕头数，各试验小区30头蚕，3次重复。

1.4 对家蚕的中毒症状观察

将桑叶分别浸入有效成份均为13.33 mg/L的阿维菌素类4种供试杀虫剂稀释液中1 min，取出后自然晾干，喂饲3龄起蚕和5龄第3 d蚕，观察记录中毒症状。

2 结果与分析

2.1 阿维菌素和甲维盐对家蚕的急性食下毒性

采用浸叶法测定阿维菌素类4种杀虫剂对3龄起蚕的急性食下毒性，试验结果见表1。对家蚕的毒性大小依次为：阿维菌素乳油的LC50值7.2343×10-4mg/L＞阿维菌素水乳剂的LC50值7.6512×10-4mg/L＞甲维盐微乳剂的LC50值8.5940×10-4mg/L＞甲维盐乳油的LC50值14.0112×10-4mg/L，极差为6.7769×10-4mg/L，即供试的阿维菌素和甲维盐4种制剂对3龄起蚕的急性食下毒性均极强，但不同制剂产品的毒性差异较小。

2.3 阿维菌素和甲维盐对家蚕的残毒期

阿维菌素和甲维盐4种制剂稀释药液喷于桑树后间隔不同时间采叶喂饲3龄起蚕，统计中毒死亡率，结果见表2。3.2%阿维菌素乳油2400倍，喷药后20 d内死亡率为100%，喷药后25 d～45 d的死亡率逐渐下降，50 d后无中毒死亡蚕；1.8%阿维菌素水乳剂1350倍，喷药后25 d内死亡率为100%，喷药后30 d～55 d的死亡率逐渐下降，60 d后无中毒死亡蚕；2.2%甲维盐微乳剂1650倍喷药后40 d内死亡率为100%，喷药后60 d的死亡率仍达54.44%；2.3%甲维盐乳油1725倍，对3龄起蚕的残毒表现与1.8%阿维菌素水乳剂1350倍相似。

表1 阿维菌素和甲维盐4种制剂对3龄起蚕的急性食下毒性测定Table 1 The acute peroral toxicity determination of 4 insecticides on the third period silkworm

表2 阿维菌素和甲维盐4种制剂对3龄起蚕的残毒期测定Table 1 The residual time determination of 4 insecticides on the third period silkworm

试验结果表明，阿维菌素和甲维盐4种制剂在桑叶上的残毒期均很长，3.2%阿维菌素乳油2400倍约为50 d，1.8%阿维菌素水乳剂1350倍、2.3%甲维盐乳油1725倍约为60 d，2.2%甲维盐微乳剂1650倍＞60 d。

2.3 家蚕的中毒症状

阿维菌素和甲维盐4种制剂对家蚕的中毒症状和中毒反映时间基本一致，这与不同种类的急性食下毒性比较接近的结果相符。家蚕食下质量浓度均为13.33 mg/L的4种供试杀虫剂药液处理的桑叶后，3龄起蚕约1 h后表现出拒食，静伏不动；未见明显吐液或吐液量极少；部分蚕死亡前后尾部向背弯曲，侧倒；12 h左右全部死亡，体色清白，蚕体软瘪。5龄第3 d蚕约1 h后食桑明显减缓，2 h后出现静伏，拒食；可见少量吐液，约12 h后死亡，蚕体软瘪，尾部有明显缩皱。

3 结论和讨论

随着阿维菌素类衍生物及其新剂型的开发，阿维菌素类杀虫剂作为高效无公害生物农药在农业生产中的应用仍将扩大，对养蚕生产安全的不利影响随之增加，因此，正确评价阿维菌素类杀虫剂对家蚕的毒性及安全性显得更加重要。

本试验结果表明，阿维菌素和甲维盐4种不同制剂产品对家蚕的急性食下毒性均极强，对3龄起蚕的LC50值为7.2343×10-4～14.0112×10-4mg/L，甚至高于拟除虫菊酯类和杀虫双等农药［12-14］，属于目前大量使用的对家蚕毒性等级最高的杀虫剂品种。本试验测定阿维菌素和甲维盐4种制剂产品在桑叶上的残毒期，质量浓度均为13.33 mg/L的稀释液处理的桑叶，对家蚕的残毒期最短的约50 d，最长的经过60 d后对家蚕的死亡率仍超过50%。

供试的阿维菌素和甲维盐4种制剂对家蚕的急性食下毒性差异不大，但在桑叶上的残毒期则相差很大，由此可见，阿维菌素类杀虫剂的急性食下毒性与残毒期的相关性不强，因此，不能以急性食下毒性结果来评价其对家蚕的风险大小，也不能以某种阿维菌素类杀虫剂的残毒期来推测其它不同种类或剂型，以避免由此造成的家蚕中毒损失。

由于影响阿维菌素在桑叶上残毒期长短的因素很多，其中光照条件对桑叶上阿维菌素的毒性消解十分明显［15-16］。因此，在判断阿维菌素类杀虫剂污染桑园时也必须考虑类似因素，在桑树生长旺盛期，枝叶生长茂盛，光照强度弱，会使阿维菌素类杀虫剂在桑叶上的残留毒性消解减慢。

阿维菌素类杀虫剂的应用趋势是制剂含量逐步提高，种类和剂型不断增加，混配应用十分普及，因此，对于蚕桑地区防止阿维菌素类杀虫剂引起的家蚕中毒必须引起高度重视。

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Determination of Silkworm Toxicity of Avermectin and Emamectin Benzoate

SHEN Zhong-ming1,SUN Hai-yan2,DAI Jian-zhong2,CHEN Wei-guo2
(1.Xucun Agriculture and Water Conservancy Service Center,Haining 314409 Zhejiang,China;
2.Haining Sericultural Technology Service Stations,Haining 314400 Zhejiang,China）

In this paper,the acute peroral toxicity and residual times of 4 insecticides with Avermectin and Emamectin Benzoate preparations were determined.The results showed that the LC50on the third period silkworm were 7.2343×10-4mg/L of Avermectin EC,7.6512×10-4mg/L of Avermectin EW,8.5940×10-4mg/L of Emamectin Benzoate Microemulsion and 14.0112×10-4mg/L of Emamectin Benzoate Emulsifiable Concentrate.The same concentration(13.33 mg/L)of 4 di⁃luted preparations with Avermectin and Emamectin Benzoate were sprayed on the mulberry,and the residual time were 50 d of 2400 times'3.2%Avermectin EC,60 d of 1350 times'1.8%Avermectin EW and 1725 times'2.3%Emamectin Benzoate Emulsifiable Concentrate,and more than 60 d of 1650 times'2.2%Emamectin Benzoate Microemulsion.It was concluded that the 4 Avermectin preparations were extremely toxic on the acute peroral toxicity,and the residual times on the mulberry leaves were very long.

Avermectin;Emamectin Benzoate;silkworm;toxicity

S884.9+6

A

0258-4069［2014］01-015-04

沈忠明（1967-），男，浙江海宁人，农艺师，主要从事蚕桑技术推广工作。E-mail:tsycom@163.com

陈伟国，推广研究员。E-mail:bscwg@163.com