老鹰茶的化学成分研究

王 静，陆维丽，张义龙，唐敏芳，汤文建，李俊

◇药学研究◇

老鹰茶的化学成分研究

王 静，陆维丽，张义龙，唐敏芳，汤文建，李俊

目的研究老鹰茶的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20及制备型HPLC等色谱方法分离化合物，利用NMR、MS波谱学方法鉴定其结构。结果从老鹰茶70%乙醇回流提取物的乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离得到9个化合物，分别鉴定为儿茶素（1）、表儿茶素（2）、菜豆酸（3）、山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷（4）、松属素-7-O-β-D-葡萄糖苷（5）、香树素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷（6）、2，4，6-三羟基苯丁酮-2-O-β-D-葡萄糖苷（7）、腺苷（8）、（＋）-异落叶松脂醇-9-O-β-D-葡萄糖苷（9）。结论化合物3～9为首次从樟科木姜子属植物中分离得到，1、2为首次从该植物中分离得到。

老鹰茶；乙酸乙酯；正丁醇；结构鉴定

老鹰茶系樟科木姜子属毛豹皮樟的叶，叶片呈椭圆形，面绿背白，俗称“白茶”，分布于云南、贵州、四川、安徽等地。民间饮用表明老鹰茶具有解毒消肿、明目益思、生津止渴、解表防暑等功效，且无毒副作用，为药食同源植物，长期饮用有益于健康［1］。近年来药理学研究［2］表明老鹰茶具有抗氧化、降糖、降脂、抗炎及免疫调节等功效，具有较大的开发和应用前景。为合理开发其药用资源，明确药效物质基础，该实验对老鹰茶的化学成分进行了较系统的研究，从中分离得到24个化合物［2－7］，继续从老鹰茶70%乙醇提取物的乙酸乙酯部位和正丁醇部位中分离得到9个化合物。将这些化合物进行药理活性筛选，期望得到具有明显药理活性的化合物，进而开发成疗效确切、毒副作用小、质量可控的天然药物，为进一步开发老鹰茶提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 药材老鹰茶采自安徽省宁国县茶厂，阴干备用，经安徽医科大学药学院谢晋老师鉴定为樟科木姜子属毛豹皮樟的叶。原植物标本（LC200805）保存于安徽医科大学药学院。

1.2 仪器与试剂AV-300、400型核磁共振光谱仪（瑞士Bruker公司，TMS为内标）；Agilent 1260－6224液质联用仪（美国安捷伦公司）；岛津LC-8A高效制备液相（日本岛津公司）；依利特Hypersil-ODS柱（250.0 mm×4.6 mm，5 μm，山东奥秘科技有限公司）；薄层层析硅胶和柱色谱硅胶（青岛海洋化工厂）；薄层色谱GF254板（烟台江友硅胶开发有限公司）；Sephadex LH-20（瑞典Pharmacia公司）；普通试剂均为分析纯；色谱甲醇、乙腈；氘代试剂（北京崇熙科技孵化器有限公司）。

1.3 方法取老鹰茶叶10 kg，以10倍量体积分数70%乙醇回流提取3次，时间分别为2、1、1h。过滤，合并滤液，减压回收乙醇，得到总浸膏。浸膏用水分散，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取。乙酸乙酯部分（130 g）经正相硅胶柱层析，氯仿－甲醇系统梯度洗脱，得到5个部分；二氯甲烷－甲醇（10∶1→5∶1）洗脱部分经硅胶柱色谱反复分离，并结合Sephadex LH-20和制备型HPLC纯化得到化合物1（16 mg）、2（13 mg）、3（21 mg）。正丁醇部分（2.0 kg）用蒸馏水加热溶解，经D101大孔树脂柱吸附，用乙醇－水系统梯度洗脱，将乙醇部位分为10%、30%、50%、95%4个部分，分别对95%和50%部分用硅胶柱进行反复分离，并结合ODS、Sephadex LH-20、制备型HPLC纯化得到化合物4（68 mg）、5（34 mg）、6（18 mg）、7（42 mg）、8（72 mg）、9（8 mg）。

2 结果

儿茶素1：类白色粉末，分子式为C15H14O6，TOFHRMS：m/z［M］＋calcd for C15H14O6：290.079 0，found：290.078 6。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：2.45（1 H，m，overlap with solvent，4a-H），2.68（1 H，dd，J＝4.3，16.4 Hz，4b-H），4.01（1 H，m，3-H），4.63（1 H，d，J＝4.5 Hz，2-H），4.73（1 H，s，3-OH），5.71（1 H，d，J＝2.0 Hz，6-H），5.89（1 H，d，J＝2.0 Hz，8-H），6.66（2 H，s，5′，6′-H），6.89（1 H，s，2′-H），8.69（1 H，s，4′-OH），8.77（1 H，s，3′-OH），8.87（1 H，s，7-OH），9.08（1 H，s，5-OH）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：28.2（4-C），65.0（3-C），78.1（2-C），94.1（8-C），95.1（10-C），98.5（6-C），114.8（2′-C），114.9（5′-C），118.0（6′-C），130.7（1′-C），144.5（3′，4′-C），155.8（9-C），156.3（7-C），156.6（5-C）。以上数据与文献［8－9］报道基本一致，故鉴定化合物1为儿茶素，见图1。

表儿茶素2：类白色粉末，分子式为C15H14O6，TOF-HRMS：m/z［M］＋calcd for C15H14O6：290.079 0，found：290.078 8。1H-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：2.35（1 H，dd，J＝8.0，16.0 Hz，4a-H），2.66（1 H，dd，J＝5.2，16.0 Hz，4b-H），3.17（1 H，d，J＝5.0 Hz，3-H），4.84（1 H，d，J＝5.0 Hz，2-H），5.69（1 H，d，J＝2.0 Hz，6-H），5.89（1 H，d，J＝2.0 Hz，8-H），6.59（1 H，dd，J＝1.4，8.0 Hz，6′-H），6.68（1 H，d，J＝8.0 Hz，5′-H），6.72（1 H，d，J＝1.4 Hz，2′-H），8.78（1 H，s，4′-OH），8.83（1 H，s，3′-OH），8.91（1 H，s，7-OH），9.15（1 H，s，5-OH）。13C-NMR（75 MHz， DMSO-d6）δ：27.9（4-C），66.5（3-C），81.1（2-C），94.1（8-C），95.3（10-C），99.2（6-C），114.6（2′-C），115.3（5′-C），118.6（6′-C），130.8（1′-C），145.0（3′，4′-C），155.5（9-C），156.3（7-C），156.6（5-C）。以上数据与文献［8］报道基本一致，故鉴定化合物2为表儿茶素，见图1。

图1 9种化合物的化学结构式

菜豆酸3：白色粉末，分子式为C15H20O5，TOFHRMS：m/z［M］＋calcd for C15H20O5：280.131 1，found 280.130 1。1H-NMR（300 MHz，C5D5N）δ：1.21（3 H，s，9′-H），1.55（3 H，s，7′-H），2.08（3 H，d，J＝0.7 Hz，6-H），2.64（1 H，dd，J＝17.8，2.3 Hz，5′pro-R-H），2.88（1 H，dd，J＝17.6，2.3 Hz，3′pro-S-H），2.97（1 H，dd，J＝17.8，2.4 Hz，5′pro-S-H），3.13（1 H，d，J＝17.7 Hz，3′pro-R-H），3.89（1 H，d，J＝7.5 Hz，8′pro-R-H），4.31（1 H，dd，J＝7.5，2.8 Hz，8′pro-S-H），5.13（1 H，brs，OH），6.20（1 H，s，2-H），6.80（1 H，d，J＝16.0 Hz，5-H），6.97（1 H，brs，COOH），9.04（1 H，d，J＝16.0 Hz，4-H）。13C-NMR（75 MHz，C5D5N）δ：16.3（9′-C），20.3（7′-C），21.3（6-C），49.4（6′-C），53.3（5′-C），54.2（3′-C），78.3（8′-C），82.9（1′-C），87.3（2′-C），121.1（2-C），132.6（4-C），133.8（5-C），149.3（3-C），169.1（1-C），208.8（4′-C）。以上数据与文献［10］报道基本一致，故鉴定化合物3为菜豆酸，见图1。

山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷4：淡黄色粉末，分子式为C27H31O15，TOF-HRMS：m/z［M＋Na］＋calcd for C27H30NaO15：617.147 7，found：617.146 7。1HNMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：0.98（3 H，d，J＝6.1 Hz，CH3），5.31（1 H，d，J＝6.9 Hz，1″-H），5.32（1 H，d，J＝4.3 Hz，1‴-H），6.20（1 H，d，J＝1.7 Hz，6-H），6.41（1 H，d，J＝1.8 Hz，8-H），6.87（2 H，d，J＝8.8 Hz，3′，5′-H），7.98（2 H，d，J＝8.7 Hz，2′，6′-H），10.09（1 H，brs，4′-OH），10.81（1 H，brs，7-OH），12.56（1 H，brs，5-OH）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：17.7（6‴-C），66.9（6″-C），68.3（5‴-C），70.0（4″-C），70.4（2‴-C），70.6（3‴-C），71.9（4‴-C），74.2（2″-C），75.8（5″-C），76.4（3″-C），93.8（8-C），98.7（6-C），100.8（1‴-C），101.4（1″-C），104.0（10-C），115.1（3′，5′-C），120.9（1′-C），130.9（2′，6′-C），133.3（3-C），156.5（2-C），156.9（9-C），159.9（4′-C），161.2（5-C），164.1（7-C），177.4（4-C）。以上数据与文献［11］报道基本一致，故鉴定化合物4为山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷，见图1。

松属素-7-O-β-D-葡萄糖苷5：白色粉末，分子式为C21H22O9，ESI-MS（EI）C21H22O9：［M＋Na］＋＝441.1，［M－H］－＝417.0，［M＋Cl］－＝453.0。1HNMR（300 MHz，CD3COCD3）δ：2.86（2 H，dd，J＝3.0，17.1 Hz，3a-H，OH），3.25（1 H，dd，J＝12.8，17.1 Hz，3b-H），3.28（1 H，dd，J＝3.4，16.6 Hz，6″α-H），3.43-3.72（7 H，m，Glu-H，OH），3.88（1 H，m，Glu-H），5.09（1 H，d，J＝7.2 Hz，1″-H），5.63（1 H，dd，J＝3.0，12.7 Hz，2-H），6.16（1 H，d，J＝2.0 Hz，6-H），6.21（1 H，d，J＝2.0 Hz，8-H），7.45（3 H，m，3′，4′，5′-H），7.59（2 H，m，2′，6′-H），12.08（1 H，s，5-OH）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：42.2（3-C），60.6（6″-C），69.5（4″-C），73.0（2″-C），76.3（3″-C），77.1（5″-C），78.7（2-C），95.5（8-C），96.7（6-C），99.6（1″-C），103.3（10-C），126.8（2′，6′-C），128.6（3′，5′-C），128.7（4′-C），138.5（1′-C），162.6（9-C），163.0（5-C），165.4（7-C），196.9（C-4）。以上数据与文献［12］报道基本一致，故鉴定化合物5为松属素-7-O-β-D-葡萄糖苷，见图1。

香树素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷6：白色粉末，分子式为C20H20O10，TOF-HRMS：m/z［M＋Na］＋calcd for C20H20NaO10：443.094 9，found：443.094 8。1HNMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：3.03（1 H，dd，J＝3.2，11.6 Hz，6″a-H），3.10-3.58（4 H，m，ara-H），4.67（1 H，d，J＝4.4 Hz，1″-H），4.76（1 H，d，J＝8.5 Hz，3-H），5.35（1 H，d，J＝8.5 Hz，2-H），5.87（2 H，s，6，8-H），6.76（2 H，d，J＝8.5 Hz，3′，5′-H），7.25（2 H，d，J＝8.5 Hz，2′，6′-H）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：62.5（5″-C），65.6（4″-C），70.2（2″-C），71.6（3″-C），75.2（3-C），81.2（2-C），95.3（8-C），96.2（6-C），100.6（1″-C），102.5（10-C），115.1（3′，5′-C），126.5（1′-C），129.0（2′，6′-C），157.7（4′-C），162.0（9-C），163.5（5-C），167.9（7-C），194.3（4-C）。以上数据与文献［13］报道基本一致，故鉴定化合物6为香树素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷，见图1。

2，4，6-三羟基苯丁酮-2-O-β-D-葡萄糖苷7：淡黄色粉末，分子式为C16H22O9，TOF-HRMS：m/z［M＋Na］＋calcd for C16H22NaO9：381.115 6，found：381.114 9。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：0.91（3 H，t，J＝7.4 Hz，4′-H），1.58（2 H，m，3′-H），3.05（2 H，m，2′-H），3.21（1 H，m，2″-H），3.30（3 H，m，3″，4″，5″-H），3.51（1 H，m，6″-Ha），3.71（1 H，dd，J＝3.2，11.7 Hz，6″-Hb），4.92（1 H，d，J＝7.3 Hz，1″-H），5.93（1 H，d，J＝2.1 Hz，5-H），6.11（1 H，d，J＝2.1 Hz，3-H），10.59（1 H，brs，4-OH）。13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ：13.8（4′-C），17.7（3′-C），45.5（2′-C），60.5（6″-C），69.5（4″-C），73.3（2″-C），76.9（3″-C），77.3（5″-C），94.2（3-C），96.8（5-C），100.6（1″-C），105.1（1-C），160.9（2-C），164.5（4-C），165.6（6-C），205.7（1′-C）。以上数据与文献［14］报道基本一致，故鉴定化合物7为2，4，6-三羟基苯丁酮-2-O-β-D-葡萄糖苷，见图1。

腺苷8：类白色粉末，分子式为C10H13O4N5。1HNMR（300 MHz，DMSO-d6＋D2O）δ：3.56（1 H，dd，J＝3.4，12.4 Hz，5′-Ha），3.66（1 H，dd，J＝3.1，12.4 Hz，5′-Hb），4.00（1 H，m，4′-H），4.14，4.56（2 H，m，2′，3′-H），5.86（1 H，d，J＝6.3 Hz，1′-H），7.28（2 H，s，NH），8.13（1H，s，2-H），8.32（1 H，s，8-H）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：61.7（5′-C），70.7（2′-C），73.5（3′-C），85.9（4′-C），88.0（1′-C），119.4（5-C），140.0（8-C），149.1（4-C），152.4（2-C），156.2（6-C）。以上数据与文献［15］报道基本一致，故鉴定化合物8为腺苷，见图1。

（＋）-异落叶松脂醇-9-O-β-D-葡萄糖苷9：淡黄色粉末，分子式为C26H34O11，TOF-HRMS：m/z［M＋Na］＋calcd for C26H34NaO11：545.199 3，found：545.198 7。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：1.71（1 H，m，8-H），1.90（1 H，m，8′-H），2.72（2 H，d，J＝7.8 Hz，7′-H），3.01（4 H，m，glu-H），3.11（1 H，m，glu-H），3.43（2 H，m，9，9′-Ha，），3.62（2 H，m，9，9′-Hb），3.70（3 H，s，3′-H），3.72（3 H，s，3-H），3.89（1 H，dd，J＝1.2，9.7 Hz，glu-H），3.95（1 H，d，J＝7.8 Hz，1″-H），4.04（1 H，d，J＝10.8 Hz，7-H），4.43，4.90，4.97，5.22（5 H，glu-OH，9′-OH），6.07（1 H，s，5′-H），6.49（1 H，dd，J＝1.4，8.0 Hz，6-H），6.61（1 H，s，2′-H），6.69（1 H，d，J＝8.0 Hz，5-H），6.80（1 H，d，J＝1.4 Hz，2-H），8.44（1 H，s，4′-OH），8.75（1 H，s，4-OH）。13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ：32.6（7′-C），37.5（8′-C），44.2（8-C），45.6（7-C），55.5（3′-C），55.6（3-C），61.1（6″-C），62.8（9′-C），67.6（9-C），70.0（4″-C），73.6（2″-C），76.7（3″-C），76.9（5″-C），104.2（1″-C），111.8（2′-C），113.9（2-C），115.5（5-C），116.3（5′-C），121.2（6-C），127.1（1′-C），132.8（6′-C），137.0（1-C），144.1（4′-C），144.5（4-C），145.5（3′-C），147.2（3-C）。以上数据与文献［15］报道基本一致，故鉴定化合物9为（＋）-异落叶松脂醇-9-O-β-D-葡萄糖苷，见图1。

3 讨论

从老鹰茶叶的乙酸乙酯和正丁醇部分分离得到9个化合物，根据其NMR、MS波谱数据及文献值，对其结构进行分析，分别鉴定为儿茶素（1）、表儿茶素（2）、菜豆酸（3）、山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷（4）、松属素-7-O-β-D-葡萄糖苷（5）、香树素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷（6）、2，4，6-三羟基苯丁酮-2-O-β-D-葡萄糖苷（7）、腺苷（8）、（＋）-异落叶松脂醇-9-O-β-D-葡萄糖苷（9），化合物3～9为首次从樟科木姜子属植物中分离得到，1和2为首次从该植物中分离得到。从老鹰茶中分离得到的化合物有黄酮类化合物、多酚类或酚酸类化合物、萜类化合物等，主要化学成分是黄酮类化合物，包括黄酮醇类、二氢黄酮类、黄烷醇类、黄烷醇骈香豆素类，这为进一步开发利用老鹰茶这一药用资源提供了科学依据。

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Chemical constituents from Litsea Coreana L.

Wang Jing，Lu Weili，Zhang Yilong，et al
（School of Pharmacy，Anhui Provincial Laboratory on Bioactivity of Natural Products，Anhui Medical University，Hefei 230032）

ObjectiveTo study the chemical constituents in Litsea Coreana L.MethodsThe constituents were isolated and purified by silica gel，ODS，and Sephadex LH-20 column chromatographies as well as HPLC.Their chemical structures were elucidated on the basis of spectral data.ResultsThe compounds were isolated from the ethyl acetate and n-butyl alcohol fractions of ethanol extract and identified as Catechin（1），Epicatechin（2），Phaseic acid（3），Kaempferol-3-O-β-D-rutinose（4），Pinocembrin-7-O-β-D-glucopyranoside（5），Aromadedrin-3-O-α-L-arabinopyranoside（6），2，4，6-trihydroxybutyrophenone-2-O-β-D-glucopyranoside（7），adenoside（8），（＋）-isolariciresinal-9-O-β-D-glucopyranoside（9），respectively.ConclusionCompounds 3～9 are firstly isolated from Litsea Lam.genus，and compounds 1 and 2 are isolated from this plant for the first time.

Litsea Coreana L.；ethyl acetate；n-butyl alcohol；structure identification

R 284.1

A

1000－1492（2014）04－0479－05

2013－10－10接收

国家自然科学基金（编号：20802003）；安徽省科技攻关项目（编号：06013134B）

安徽医科大学药学院，安徽天然药物活性研究省级实验室，合肥 230032

王 静，女，硕士研究生；汤文建，男，博士，副教授，硕士生导师，责任作者，E-mail：tangwjster＠gmail.com