GC法测定聚卡波非钙中残留异丙醇

邢琳琳，聂 磊

（1.山东大学药学院，山东济南250012；2.山东新华制药股份有限公司，山东淄博255000）

GC法测定聚卡波非钙中残留异丙醇

邢琳琳1，2，聂 磊1

（1.山东大学药学院，山东济南250012；2.山东新华制药股份有限公司，山东淄博255000）

目的建立顶空气相色谱法测定聚卡波非钙中残留异丙醇的方法。方法采用气相色谱顶空进样法，ZB－624毛细管柱，以氮气为载气，FID检测器。结果残留异丙醇含量在50～5 000μg·g－1范围内具有良好的线性，线性方程为Y＝－2 933＋4 947X，相关系数r＝0.999 66（n＝5），平均回收率为94.6%，RSD＝1.79%，检测限为2.5μg·g－1。结论该方法灵敏、准确，可以有效控制聚卡波非钙中异丙醇残留。

聚卡波非钙；异丙醇；气相色谱法

聚卡波非钙（calcium polycarbophil）最早由美国雅培公司开发，在欧美、日本已广泛使用，用于肠易激综合征（IBS）及各种原因便秘症状的缓解。2011年9月，聚卡波非钙片（商品名为利波非）在中国上市。该药适用于不宜摄入钠的患者，如水肿、高血压、心衰的慢性便秘等患者［1］。在聚卡波非钙原料药的生产过程中用到了异丙醇，因此可能在聚卡波非钙中残留，异丙醇为《中国药典》2010年版中规定的要求限制使用的第三类溶剂［2］，考虑到其毒害，为了聚卡波非钙的用药安全，需要建立准确、可靠的分析方法用于聚卡波非钙原料药中残留异丙醇含量的检测［3～8］，对其残留量加以控制，以确保药品中残留的异丙醇不会对人体造成危害。

1 仪器和试药

1.1 仪器 气相色谱仪（岛津GC－2010），顶空进样器（PE Turbomatrix40），电子天平（Mettler XS105），色谱柱：ZB－624（6%氰丙基苯基－94%二甲基聚硅氧烷，30 m×0.53 mm，膜厚3.0μm）。

1.2 试药 异丙醇（分析纯）；水（超纯水）；聚卡波非钙（山东新华制药股份有限公司，批号：14037、14038、14039）等。

2 方法和结果

2.1 色谱条件 采用程序升温方式，柱温：70℃保持7 min，以每分钟30℃的升温速率升至100℃，保持5 min；检测器温度：250℃；进样口温度：150℃；检测器：氢火焰离子化检测器（FID）；载气：N2；载气流速：5 mL·min－1；分流比：10∶1。

自动顶空进样器条件：炉温：90℃；针温：100℃；传输线温度：105℃；加热时间：30 min；加压时间：2 min；进样体积：1 mL。

2.2 溶液制备 标准溶液：称取异丙醇约0.1 g，于已加有少量超纯水的100 mL容量瓶中，然后加超纯水稀释至刻度，摇匀，作为标准溶液A。取1.0 mL标准溶液A，于200 mL容量瓶中，加超纯水至刻度，摇匀，作为标准溶液B。取标准溶液B 5.0 mL，于20 mL顶空瓶中，加1.0 g无水硫酸钠，密封。

供试品溶液：精密称取聚卡波非钙样品约200 mg，于50 mL的带盖离心管中，加10 mL超纯水，密封离心管，剧烈振摇使样品充分分散，然后在振荡器上机械振摇60 min后（平放于振荡器上），放在离心机内，转速2 000 rpm，离心10 min，将上清液小心转移至20 mL容量瓶中；再加5 mL超纯水，密封离心管，剧烈振摇，然后在振荡器上机械振摇30 min后，离心10 min，将上清液小心转移至同一20mL容量瓶中；再加5 mL超纯水，重复上述操作，将上清液小心转移至同一20 mL容量瓶中，用超纯水稀释至刻度，摇匀。取上述溶液5.0 mL，于20 mL顶空瓶中，加1.0 g无水硫酸钠，密封。

样品空白溶液：精密称取已于105℃干燥48 h的聚卡波非钙样品0.2 g，按供试品溶液的制备方法制备。

2.3 专属性测试 取空白溶液、标准溶液、样品空白溶液、标准加样品空白的混合溶液（向已于105℃干燥48 h的样品中加入5.0 mL标准溶液和5.0 mL超纯水，按样品制备方法同法操作），依次放入自动顶空进样器中，依法测定，结果空白溶液、样品空白溶液中在异丙醇峰附近均无干扰峰。图谱见1，2。

图1 标准溶液色谱图

2.4 线性试验 精密称取异丙醇适量，用水溶解并稀释成每1 mL中分别含0.5、5、10、30、50μg的溶液，依法测定，以浓度（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线图，计算回归方程，Y＝－2 933＋4 947X，r＝0.999 66（n＝5），异丙醇浓度在50～5 000μg·g－1范围内，具有良好的线性。

图2 混合溶液色谱图

2.5 回收率试验 精密称取9份聚卡波非钙（105℃干燥48 h）0.2 g，分别加入异丙醇溶液（10、100、1 000μg·mL－1）各1 mL，按供试品溶液制备方法同法制备，使测试液中异丙醇含量分别为0.5、5、50 μg·mL－1（每个浓度制备3份），取标准溶液进样6次、样品空白溶液进样1次、准确度测试液各进样1次，依法测定，平均回收率为94.6%，具有良好的准确度。测试数据见表1。

表1 回收率试验结果

2.6 重复性试验 按标准溶液制备方法制备6份标准溶液于顶空瓶中，将顶空瓶依次放入自动顶空进样其中，依法测定，计算异丙醇峰面积的RSD＝1.4%，重复性良好。

2.7 检测限与定量限 取适当浓度的异丙醇溶液加入样品空白溶液中，依法制备，同法配制3个顶空瓶溶液。顶空进样测定，记录色谱图，当信噪比S／N＝3时，即为异丙醇的检测限，经测定此时异丙醇浓度为0.025μg·mL－1，相当于样品中异丙醇含量2.5 ppm；当信噪比S／N＝10时，即为异丙醇的定量限，经测定此时异丙醇浓度为0.100μg·mL－1，相当于样品中异丙醇含量10.0 ppm。

2.8 样品测定 分别取3个批号的聚卡波非钙样品（批号：14037、14038、14039），依法测定，结果3批样品中均未检出异丙醇残留。

3 讨论

3.1 本方法是应日本雅培公司要求开发。在此之前，中方和日方对聚卡波非钙中残留异丙醇的分析方法做了大量的研究工作，气相色谱、液相色谱均做了方法研究。因聚卡波非钙本身理化性质的原因，到目前为止，该样品尚未找到能有效溶解它的溶剂，给方法研究带来很大难度。我们曾经尝试用酸、碱破坏的方法对样品进行溶解，但酸碱试剂中存在的不明有机杂质给方法的专属性带来很大的困难，在异丙醇峰附近存在很多比异丙醇峰峰面积大得多的不明峰，给检测限、定量限和专属性带来干扰。通过全面考察聚卡波非钙的整个工艺流程，我们最终确定了现有方法，经过验证，该方法准确可靠、重现性好，日本雅培公司对该方法予以了肯定和接受。

3.2 顶空瓶压力的确定在方法开发过程中，最初的顶空瓶加压压力定在10 psi（约0.069 MPa），但出现了顶空预进样现象，通过多次试验，最后调节顶空加压压力到13 psi（约0.090 MPa），预进样现象消除。

4 结论

用气相色谱顶空进样法对聚卡波非钙中残留异丙醇进行测定，回收率高，检测灵敏度高，重现性好，测定结果准确可靠，各项验证的结果均符合要求，证明该分析方法适用于聚卡波非钙中残留异丙醇的测定。

［1］ 韩振杰，袁耀宗.聚卡波非钙的药理及临床研究［J］.中国新药与临床杂志，2012，31（6）：291－294.

［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版（二部）［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：附录.

［3］ 赵劲松，张弘，周天杰，等.西沙比利原料中异丙醇残留量的气相色谱测定［J］.中国药业，2003，12（4）：38－39.

［4］ 王春霞，王新牛，张言军，等.用GC测定阿替洛尔片中异丙醇残留［J］.医学信息，2013，26（4）：457－458.

［5］ 刘路，张圣华，宋冬梅，等.雷贝拉唑钠中有机溶剂残留的顶空毛细管气相色谱法测定［J］.中国医药工业杂志，2013，44（11）：1148－1150.

［6］ 刘冬，杨敬芝，杜守颖，等.顶空气相色谱法测定大孔树脂提取物中的残留溶剂研究［J］.药物分析杂志，2009，29（11）：1877－1880.

［7］ 冯光玲，丁文娟，冯爱国，等.毛细管气相色谱法测定依诺昔酮原料药中6种有机溶剂残留量［J］.中国药房，2014，25（13）：1210－1211.

［8］ 王梅.毛细管气相色谱法测定尼莫地平原料药中残留溶剂［J］.中国医学杂志，2012，47（14）：1168－1169.

Determ ination of isopropanol in calcium polycarbophil by gas chromatography

XING Lin-lin1，2，NIE Lei1
（1.School of Pharmaceutical Sciences，Shandong University，Jinan 250012，China；2 Shandong Xinhua Pharmaceutical Co.，Ltd.，Zibo 255000，China）

ObjectiveUsing GCmethod for the determination of isopropanol in calcium polycarbophil.MethodsU-sing Head－Space GCmethod，the column was ZB－624 capillary column；The carrier gas was nitrogen and FID detector was adopted.ResultsIsopropanol had a good linearity in the range of 50～5 000μg·g－1，the linear equation was Y＝－2 933＋4 947X（r＝0.999 66）（n＝5）.The average recovery was 94.6%，and the RSD＝1.79%.The detectability was 2.5μg·g－1.ConclusionThemethod was sensitive and accurate，and suitable for the determination of isopropanol in calcium polycarbophil.

Calcium polycarbophil；Isopropanol；GC

R927.1

A

2095－5375（2014）08－0461－003

山东省研究生教育创新计划（No.SDYY12074）

邢琳琳，女，研究方向：药物分析，E－mail：13853328043＠163.com

聂磊，男，博士研究生，副教授，研究方向：中药质量评价，Tel：0531－88382330，E－mail：nielei2004＠sdu.edu.cn