延边地区感染幽门螺杆菌CagA蛋白与胃癌的相关疾病的分析

李勋 金仁仙 尹花春

大量研究资料表明幽门螺杆菌(helicobacter pylori Hp)感染是胃癌发生及发展过程中的重要的外部致病因子。IARC已于1994年将H p感染列为胃癌的一类致癌原。细胞毒素相关蛋白A(CagA)是由Hp相应的CagA基因编码产生的一种外膜蛋白，是重要毒力因子，是引起萎缩性胃炎、胃溃疡、胃癌等疾病的主要病因。吉林省延边地区是汉族和朝鲜族居住区，本文通过研究该地区不同民族之间Hp感染患者CagA基因菌株阳性率以了解Hp I型菌株在不同民族与胃癌及癌前疾病的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 所有病例均为2012年1月-2013年1月在延边第二人民医院做胃镜检查并H p检查阳性患者571例（朝257例，汉314例），CSG组168例（朝75例，汉93例）、CAG组167例(朝76例，汉91例)、GU组132例(朝60例，汉72例)，GC组104例(朝46例，汉58例)。男268例、女303例，平均年龄为（35.62±13.25）岁。

1.2 检测 (1)Hp的检测：患者全部进行胃镜检查，检查前未用过抗Hp药物，在胃窦小弯侧距离幽门3 cm内的正常粘膜处取2块活组织做快速尿素酶试验，同时做14C尿素呼气试验。(2)H pCagA基因株的检测：CagA抗体的检测试剂盒购自上海晶莹生物技术有限公司。其抗体采用基因工程表达CagA抗原并经纯化而成。参照试剂盒说明书读取OD值。

1.3 统计学方法 数据处理采用SPSS11.0统计软件，率的检验采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

H p阳性患者571例中，CagA基因菌株阳性率朝鲜族为67.3%、汉族为78.0%，两者之间差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。朝鲜族CSG组、CAG组、GU组、GC组CagA基因菌株阳性率为50.7%、73.7%、76.7%、71.7%，汉族为64.5%、79.1%、84.7%、89.7%。朝鲜族与汉族CagA抗体阳性率在CSG组、CAG组、GU组之间差异有统计学意义（P>0.05），胃癌组之间差异有统计学意义（P<0.05）。在朝鲜族组中将CAG组、GU组、GC组分别与CSG组作为对照组相比较CagA基因菌株阳性率均差异有统计学意义（P<0.05）。在汉族组中将CAG组、GU组、GC组分别与CSG组作为对照组相比较CagA基因菌株阳性率均差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表1 CagA基因菌株在不同民族间的阳性率

表2 CagA基因菌株在不同疾病中的阳性率

3 讨论

Hp的毒力因子有：空泡毒素相关基因(cagA)蛋白、空泡毒素(vacA)蛋白、尿素酶等。Hp包括西方株和东亚株，90%～95%从东亚国家分离的菌株为cagA基因阳性。根据是否含有CagA基因H p被分为I型和Ⅱ型菌[1]。I型菌长期定植于胃黏膜上皮细胞中，导致浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生，非典型性增生直至胃癌的发生。近年多项研究发现Hp通过CagA转位、CagA磷酸化、细胞内信号转导通路的改变、引起细胞生长和运动力的异常来参与胃癌的发生。Backert等[2]研究发现游离的CagA蛋白依赖IV分泌系统(T 4SS)将其转位于皮细胞内，并被磷酸化后再与SIIP-2磷酸酶相互作用，最终导致胃黏膜上皮细胞发生“蜂鸟”样改变。这种“蜂鸟”样改变与胃癌密切相关。被激活的SHP-2还可通过抑制FAK激酶的活性。增强CagA蛋白引起“蜂鸣样”的形态学改变[3]。此外CagA蛋白在胃癌的进程中起双重作用：Hp感染早期[4]，AGS细胞中的CagA蛋白引起依赖P 21的G期细胞抑制，导致慢性胃炎和胃溃的发生。在感染的后期[5]，CagA蛋白能促进细胞凋亡和残存的胃上皮细胞代偿性增生，促进胃癌的发生。本研究对吉林省延边地区Hp感染的朝鲜族与汉族CagA基因菌株检测，阳性率分别为68.1%、78.0%。较王珂等[6]报道的吉林省长春地区CagA基因菌株阳性率78.41%相比汉族组接近，但朝鲜族组阳性率明显低。国外对种族与H p感染情况的调查发现种族是H p感染的危险因素。Malaty等[7]研究发现西班牙后裔与黑人感染率相等，显著高于白人。这种种族间的差异可能由于不同人群暴露情况和基因结构不同引起。国内多项汉族与少数民族的对比研究提示两民族间感染率无差异[8-9]。本次研究结论与国内报道大部分相一致。朝鲜族CSG组、CAG组、GU组、GC组CagA基因菌株阳性率分别为50.7%、73.7%、76.7%、71.7%，将CSG组作为对照组分别与CAG组、GU组、GC组比较均有差异。汉族CSG组、CAG组、GU组、GC组CagA基因菌株阳性率分别为64.5%、79.1%、84.7%、89.7%，同样将CSG组作为对照组分别与CAG组、GU组、GC组比较也均有差异。上述结论进一步佐证了CagA基因菌株感染与胃癌及癌前疾病关系更为密切。本次研究还对同一疾病组的CagA基因菌株阳性率进行了横向比较，发现GC组阳性率有差异，且可看出朝鲜族胃癌患者显著少于汉族。其原因本人考虑可能与饮食因素相关，朝鲜族人群长期进食泡菜等腌制食物可减少营养价值流失，尤其是水溶性维生素B和C，它们具有部分抗癌作用。此外其发酵后产生游离氨基酸和乳酸等有机酸能抑制Hp生长，Chatterjee A等[10]研究发现在体外实验中无论是乳酸杆菌还是其有效成分都能抑制H p生长，也有人认为其机制与抑制H p分泌IL-8有关。Lee等韩国学者在这些泡菜中分离出对H p有抑制作用的菌株Lb p lantarum NO 1[11]，在胃腺癌AGS细胞模型中发现对Hp有明显的抑制作用。

综上所述,本地区Hp感染患者中CagA基因菌株阳性率与国内报道结果相似，以I型菌株感染为主，与胃癌及癌前疾病关系密切。对HpCagA基因菌株阳性患者应予以足够重视，应进行H p毒力检测，帮助制定治疗方案及评估预后。

[1] Yuasa Y.Control of gut differentiation and intestinal-type gastric carcinogenesis[J].Nat Rev Cancer,2003,3(8):592-600.

[2] Backert s,Selbach M.Role of type IV secretion in Helicobacterpylori Pathog -enesis[J].Cell Microbiol,2008,10(8):1573-1581.

[3] 汪苏,周建奖,单町人.幽门螺杆菌CagA蛋白研究进展[J].微生物与感染,2008,3(3):175-177.

[4] Yokoyanm K,Higashi H,lshikswa S,et a1.Ftmctional antagonism between Helicobacter pylori CagA and vacuolating toxin VacA in control of the NFAT signaling pathway in gastric epithelial cells[J].Proc Nail Acad sci USA,2005,102:9661-9666.

[5] Yamazaki S,Yamakawa A,Ito Y,et a 1.The CagA protein of Helicobacter pylori is translocated into epithelial ceils and binds to SHP-2 in human gastricmucosa[J].J Infect Dis,2003,187:334-337.

[6] 王珂,李阳.长春地区慢性胃病患者幽门螺杆菌感染状况调查[J].中国实验诊断学,2009,13(8):1048-1050.

[7] Malaty HM,Erans DG,Evans DJ J r,et a1.Helicobacter pylori in Hispanics：comparison with blacks and whites of similar age and socioeconomic class[J].Gastroenterology,1992,103(3):813-816.

[8] 河源,周力.贵州安顺地区汉族与布依族人群感染幽门螺杆菌CagA抗体分布特征与胃相关性疾病的关系[J].贵州医药,2011,35（5）:445-447.

[9] 王美丽,王华.幽门螺杆菌感染情况及其抗体与癌前疾病、胃癌的相关性研究[J].宁夏医学杂志,2012,34(2):114-116.

[10] Chatterjee A,Yasmin T,Bagchi D,et al.The bactericidal.effects ofLactobacillus acidophilus,gareinal and Protykin compared to darithro-mycin，on Helicobacter pylori[J].Biochem,2003,243(1-2):29-35.

[11] Lee Youl,Hae Choon Chang.Isolation and Characterization of Kimchi Lactic Acid Bacteria Showing Anti-Helicobacter pylori Activity[J].The koean society for Microbiology and Biotechnnlogy,2008,36(2):106-114.