高效液相色谱法测定丙泊酚注射液中丙泊酚的含量*

马爱玲，张海峰，董玲芳，王漪檬，刘胜群

(河南省人民医院 1.药学部；2.内镜中心，郑州 450003)

高效液相色谱法测定丙泊酚注射液中丙泊酚的含量*

马爱玲1，张海峰1，董玲芳1，王漪檬1，刘胜群2

(河南省人民医院 1.药学部；2.内镜中心，郑州 450003)

目的 建立测定丙泊酚注射液中丙泊酚含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Agilent TC-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(80∶20),检测波长为271 nm,流速为1.0 mL·min-1。结果丙泊酚浓度在25～250 μg·mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8),平均回收率为97.26%(RSD=1.38%)。结论该方法操作简便、灵敏、准确,适用于丙泊酚注射液的含量测定。

丙泊酚注射液；色谱法,高效液相；含量测定

丙泊酚注射液是一种临床常用静脉麻醉药,具有起效快、作用时间短的特点,常用于麻醉诱导与维持[1]。国内已有少量文献采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定丙泊酚注射液含量,色谱条件较为复杂[2-4]。笔者在本实验中采用甲醇-水为流动相,建立了操作简单、专属性好、灵敏度高的高效液相色谱法,适用于丙泊酚注射液的含量测定。

1 仪器和试药

1.1 仪器 戴安P680高效液相色谱仪(美国戴安公司),AUW120D电子天平(日本岛津公司),WH-866旋涡混合器(太仓市华利达实验设备有限公司),TGL-16A(B)高速离心机(常州诺基仪器有限公司), DS3120超声波清洗机(广州市默菲仪器有限公司)。

1.2 试药 丙泊酚对照品(江苏恩华药业股份有限公司,批号:20110826,含量:100.06%)；丙泊酚注射液(阿斯利康医药有限公司,批号:JN240,JN276,JN277,规格:200 mg·20 mL-1)；中/长链脂肪乳注射液(C8～24)(辽宁海思科制药有限公司,批号:121115,规格: 250 mL)；甲醇为色谱纯；水为双蒸水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:Agilent TC-C18柱(250 mm× 4.6 mm,5 μm)；流动相:甲醇-水(80∶20),流速: 1.0 mL·min-1；检测波长:271 nm；柱温:25℃；进样量:20 μL。

2.2 溶液的制备

2.2.1 供试品溶液 精密吸取丙泊酚注射液0.1 mL,加入甲醇溶液0.9 mL,涡旋混合1 min, 14 000 r·min-1离心10 min,精密吸取上清液0.1 mL,加甲醇稀释至1 mL作为供试品溶液。

2.2.2 对照品溶液 精密吸取丙泊酚对照品26 μL (密度0.962 g·mL-1,25℃),置100 mL量瓶,用甲醇稀释并定容,制备成浓度为250 μg·mL-1的丙泊酚对照品贮备液。

2.2.3 阴性对照溶液 以中/长链脂肪乳注射液(C8～24)替代丙泊酚注射液的背景溶液,按“2.2.1”项下方法操作,制备阴性对照溶液。

2.3 专属性实验 取阴性对照溶液、对照品溶液、供试品溶液各20 μL,按“2.1”项下色谱条件,进样,记录HPLC色谱图。在该色谱条件下,丙泊酚峰形良好,保留时间约为7.5 min,阴性对照溶液无干扰。见图1。

2.4 线性关系考察 依次精密吸取250 μg·mL-1的丙泊酚对照品贮备液适量,用甲醇稀释成25,50,100, 150,200,250 μg·mL-1的标准系列溶液,按“2.1”项下色谱条件进行测定,以浓度(C)为横坐标,以色谱峰面积(A)为纵坐标,经回归处理,得到回归方程为A= 0.141 7C+0.106 6,r=0.999 8,结果表明,丙泊酚在25～250 μg·mL-1范围内线性关系良好。

2.5 精密度实验 取浓度为100 μg·mL-1的丙泊酚对照品溶液,连续进样6次,测定峰面积。计算峰面积的RSD为0.71%,表明仪器精密度良好。

A.阴性对照溶液;B.对照品溶液;C.供试品溶液;1.丙泊酚图1 3种溶液的HPLC色谱图A.negativesample；B.referencesubstance；C.thetest solution；1.propofolFig.1 HPLC chromatograms of three kinds of solution

2.6 重复性实验 取同一批丙泊酚注射液6份,分别按“2.2.1”项方法操作,制备6份供试品溶液,进样测定峰面积。结果RSD为1.2%,表明方法的重复性良好。

2.7 加样回收率实验 取已知含量的丙泊酚供试品溶液,分别精密加入丙泊酚低、中、高3个浓度的对照品溶液,每个浓度制备3份样品,进样测定,计算丙泊酚的加样回收率,结果平均回收率为97.26%(RSD= 1.38%)。见表1。

2.8 稳定性实验 按“2.2.1”项方法,制备1份供试品溶液,室温(25±1)℃下放置8 h,分别考察0,1,2,4, 6,8 h丙泊酚的含量变化,结果RSD为1.5%,表明供试品溶液8 h内稳定。

表1 丙泊酚加样回收率测定结果Tab.1 Results of recovery experiment of propofol

2.9 样品含量测定 取3批(批号:JN240,JN276, JN277)丙泊酚注射液,按“2.2.1”项方法制备供试品溶液,分别进样测定丙泊酚含量。结果3批样品中丙泊酚的含量分别为标示量(标示量为10 mg·mL-1)的99.6%,99.3%,100.2%。

3 讨论

丙泊酚对照品在常温下为油状液体,制备对照品溶液时,在室温(25±1)℃条件下,精密吸取一定体积的对照品溶液,用甲醇稀释并定容,已知丙泊酚在25℃时,相对密度为0.962 g·mL-1,计算丙泊酚的质量,可得出对照品溶液的准确浓度。

目前临床上使用的丙泊酚注射液为脂肪乳剂,在供试品溶液的制备时,加入甲醇可达到破乳的效果,涡旋、离心后取上清液用甲醇稀释后可进样分析。

本实验在色谱条件建立时,选择了甲醇-水(80∶20)作为流动相,丙泊酚的保留时间约为7.5 min,药物的峰形良好。该方法操作简单,重复性好,适用于丙泊酚注射液的含量测定。

[1] 胡惠静,陈涛,王汝涛,等.丙泊酚注射疼痛及其预防措施研究进展[J].医药导报,2012,31(1):63-66.

[2] 杨蕾,张建华,周益芬,等.HPLC法测定丙泊酚注射液的含量及有关物质[J].内蒙古中医药,2012,31(19):87-89.

[3] 赵丽丽,麻军法,潘云霞.丙泊酚注射液有关物质检查方法的研究[J].中国中医药咨讯,2010,2(11):78.

[4] 李桂玲,苏德森.HPLC测定丙泊酚静注乳剂的含量[J].中国药学杂志,1999,34(4):272.

DOI 10.3870/yydb.2014.04.025

Content Determination of Propofol in Propofol Injection by HPLC

MA Ai-ling1,ZHANG Hai-feng1,DONG Ling-fang1,WANG Yi-meng1,LIU Sheng-qun2
(1.Department of Pharmacy;2.Endoscopy Center,Henan Provincial People's Hospital,Zhengzhou 450003,China)

Objective To establish an high performance liquid chromatography(HPLC)method for content determination of propofol in propofol injection.MethodsThe analysis was performed on an Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)column.The mobile phase consisted of methanol-water(80∶20),with a flow rate of 1.0 mL·min-1,and detection wavelength at 271 nm.ResultsThere was a good linear relationship for propofol in the range of 25-250 μg·mL-1.The average recovery rate was 97.26%and the RSD was 1.38%.ConclusionThis method is simple,sensitive and accurate,and it can be used for determination of propofol injection.

Propofol injection;Chromatography,high performance liquid;Content determination

R971.2;R927.2

A

1004-0781(2014)04-0496-02

2013-07-22

2013-09-03

*2013年度常州四药临床药学科研基金资助项目(CZSYJJ13030)

马爱玲(1981-),女,河南安阳人,主管药师,硕士,从事临床药学工作。电话:(0)15093346337,E-mail：ma_ailing@126.com。

刘胜群(1970-),女,四川资中人,副主任医师,硕士,从事临床麻醉工作。电话:(0)13526882118,E-mail：13526882118@163.com。