2010年～2012年某区127株淋球菌抗生素敏感性的分析

黄海花 张焕梅 梁佩婵

（广东省江门市皮肤医院皮肤科，广东 江门 529000）

2010年～2012年某区127株淋球菌抗生素敏感性的分析

黄海花 张焕梅 梁佩婵

（广东省江门市皮肤医院皮肤科，广东 江门 529000）

目的了解江门地区2010年～2012年淋球菌对抗生素的敏感性及变化趋势。方法采用琼脂稀释法测定6种抗生素对127株淋球菌的最小抑菌浓度（MIC）及质粒介导的高度耐四环素淋球菌（TRNG），采用纸片酸度法检测菌株是否产β-内酰胺酶（PPNG）。结果淋球菌对大观霉素及头孢克肟的敏感率均为100%，头孢曲松为77.95%，环丙沙星敏感率最低，其耐药率高达92.13%；127株淋球菌中检出PPNG菌株48株（37.80%），TRNG菌株51株（40.16%）。结论淋球菌对青霉素、四环素和环丙沙星的耐药率较高，大观霉素及头孢克肟可作为治疗本地区淋病的首选药物。

淋球菌；抗生素；敏感性

淋病由淋病奈瑟菌（即淋球菌）感染引起，主要表现为泌尿生殖系统的化脓性感染，因其潜伏期短、传染性强及可导致多种并发症而受到日益关注，它既是较常见的一种性传播疾病，也是我国法定乙类传染病。目前，随着抗生素的大量使用及细菌的变异，淋球菌耐药菌株日益增多，且不同时间、不同地域淋球菌对药物的敏感性有所不同，因此连续监测淋球菌对抗生素的敏感性对本地区淋病的临床治疗具有重要意义，现将我院2010年～2012年江门地区127株淋球菌对6种抗生素敏感性检测结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

①菌株来源：127株淋球菌从我院性病门诊有症状淋病患者中分离，所有菌株经革兰染色、氧化酶和过氧化氢酶试验、糖发酵试验确证，-70 ℃冰箱冻存备用。②抗生素：青霉素（SmithKline公司）、四环素（Sigma公司）、环丙沙星（Bayer Leverkussen公司）、头孢曲松和头孢克肟（Roche公司）及大观霉素（普强公司）6种抗菌药物由中国疾病预防控制中心性病控制中心提供。

1.2 方法

①抗生素敏感性测定：采用琼脂稀释法测定6种抗生素对淋球菌的最小抑菌浓度（MIC），各抗生素用适当缓冲液溶解后配成溶液，倍比稀释，其在培养基平皿上的浓度范围分别为青霉素、四环素0.125～32 µg/mL，环丙沙星0.25～32 µg/mL，头孢曲松0.001～0.5 µg/mL，头孢克肟0.015～1 µg/mL，大观霉素0.5～32 µg/mL。试验菌株和标准菌株先在无选择性培养基上传代2次，用16～18 h的新鲜培养物制成107～108cfu/mL菌悬液，用多头点接种器蘸取菌液接种于各抗生素琼脂平皿上，35 ℃培养24 h后观察结果，记录MIC50和MIC90，每批试验均由已知MIC值的世界卫生组织（WHO）参照菌株作质控，按WHO西亚太地区淋球菌耐药监测项目推荐的标准判断敏感性[1]。②β-内酰胺酶测定：采用纸片酸度定量法，以标准菌株E株作为阳性对照，标准菌株A株作为阴性对照。③高度耐四环素菌株（TRNG）测定：采用琼脂稀释法，当四环素MIC≥16 µg/mL，可判为TRNG菌株。

1.3 统计学方法

采用SPSS13.0统计软件进行χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 敏感性测定

127株淋球菌对青霉素、四环素和环丙沙星的耐药率较高，而对大观霉素及头孢克肟全部敏感，见表1。

表1 江门地区127株淋球菌对6种抗生素耐药性监测

2.2 PPNG菌株测定

127株淋球菌中产青霉素酶淋球菌（PPNG）48株（37.80%），2010年～2012年PPNG菌株检出率分别为34.38%（11/32）、38.64%（17/44）、39.22%（20/51），差异无统计学意义（χ2=0.22，P=0.90）。

2.3 TRNG菌株测定

127株淋球菌中高水平耐四环素淋球菌（TRNG）51株（40.16%），2010年～2012年TRNG菌株检出率分别为37.50%（12/32）、40.91%（18/44）、41.18%（21/51），差异无统计学意义（χ2=0.13，P=0.94）。

3 讨 论

美国疾病控制中心认为当一种抗生素的耐药菌百分率超过5%时，该药就不作为临床治疗的一线药物，随着抗生素的广泛使用及细菌的变异，淋球菌的耐药菌株也日益增多。研究发现，淋球菌耐药性由质粒和染色体介导，随着质粒介导的高度耐青霉素菌株的出现及传播，我国早已不推荐青霉素作为治疗淋病的首选药物，本次监测的127株淋球菌中75.59%耐青霉素，低于曹文苓[2]等报道的90.90%（χ2=8.22，P=0.00），低于本地区2008年报道[3]的92.50%（χ2=9.56，P=0.00），对青霉素敏感的淋球菌株近年来出现增加趋势，原因目前尚不清楚，但2010年～2012年PPNG菌株分别为34.38%、38.64%、39.22%，仍维持在较高水平。TRNG是质粒介导的高水平耐四环素的菌株，监测发现88.97%淋球菌株耐四环素，其中TRNG51株（40.16%），其MIC502012年为16 μg/mL，虽然青霉素和四环素不再作为治疗淋病的首选药物，但是PPNG和TRNG流行率仍是淋球菌耐药性流行病学的重要监测指标。监测中未发现对环丙沙星敏感菌株，其耐药率高达92.13%，与牛玉峰[4]报道的95.80%相符（χ2=1.49，P=0.29），与本地2008年报道的62.50%相比明显增长（χ2=27.63，P=0.00），且其MIC90由2010年的8 μg/mL上升到2012年的16 μg/mL，说明近几年本地区淋球菌对环丙沙星的耐药快速增加，耐喹诺酮类淋球菌的流行维持在较高水平，研究发现[5]其耐药机制主要是由于DNA促旋酶A亚单位（gyrA）和拓扑异构酶IV（parC）基因内的氟喹诺酮耐药决定区突变所致，我们在临床治疗中应尽量避免使用此类药物。

大观霉素属于氨基糖苷类抗生素，其对PPNG、TRNG菌株及耐喹诺酮类药物的淋球菌株敏感性都较好，本地区2009年～2012年连续4年监测暂未发现耐大观霉素菌株，同吴爱明[6]的报道相近，且MIC90为32 μg/mL仍在敏感性范围，其仍可作为本地区治疗淋病的首选药物，耐大观霉素菌株世界范围内虽少见，但国内外已陆续报道发现耐大观霉素菌株，因此仍需密切观察。监测发现头孢曲松的抗菌活性仍较强，127株淋球菌中敏感株为77.95%，略高于刘小凤[7]报道的珠海地区的62.90%，且头孢曲松MIC90为0.06 μg/mL时仍在敏感范围，其可作为本地区治疗淋病的一线药物。目前本地虽未发现耐头孢曲松菌株，但香港[8]已有应用头孢曲松治疗淋病失败的报道，且在2011年日本[9]报道发现首例对头孢曲松高度耐药菌株，海南地区[10]也检出了耐头孢曲松的淋球菌株，本研究发现其MIC90也由2010年的0.03 μg/mL上升至2012年的0.06 μg/mL，所以临床还应密切监测耐头孢曲松淋球菌株的流行状态。监测中我们发现作为口服类用药的第三代头孢菌素药物头孢克肟

100%对淋球菌敏感，也可作为本地治疗淋病的首选药物，早在2010年美国疾病控制中心淋病治疗指南中就已明确指出单纯性子宫颈、尿道和直肠淋球菌感染可单次顿服头孢克肟400 mg治疗，国内陈洁华在2011

年也报道了其在治疗单纯性女性生殖系统淋球菌感染中疗效显著，但目前有关头孢克肟的监测报道较少，临床中应给予高度关注。

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The Analysis of Antimicrobial Susceptibility of 127 Neisseria Gonorrhoeae in A District from 2011~2012

HUANG Hai-hua, ZHANG Huan-mei, LIANG Pei-chan
(Department of Dermatology, Jiangmen Skin Hospital, Jiangmen 529000, China)

ObjectiveTo survey the susceptibility and trend of Neisseria gonorrhoeae to antibioticagets in Jiangmen from 2010 to 2012.Methods127 Neisseria gonorrhoeae strains were observed for their susceptibility to six antibiotics, agard lution method was used to detect minimal inhibitory concentration (MIC) of antimicrobial agents and high-level tetracycline-resistance of Neisseria gonorrhoeae(TRNG),the production of β-lactamase was dectermined by paper acidometric method.ResultsThe percentage of Neisseria gonorrhoeae strains sensitive to Spectinomycin,cefixime and ceftriaxone was 100%,100% and 77.95%,the percentage of Neisseria gonorrhoeae strains resistent to ciprofloxacin was 92.13%;48(37.80%) strains were penicillinase-producing Neisseria gonorrhoeae (PPNG),51(40.16%) strains were TRNG.ConclusionThe Neisseria gonorrhoeae isolates are highly resistant to penicillin,tetracycline and ciprof loxacin,spectinomycin and cefixime should be used the first-line drugs for the treatment of Neisseria gonorrhoeae in Jiangmen.

Neisseria gonorrhoeae; Antibiotics; Susceptibility

R378.16

B

1671-8194（2014）22-0012-02