粘蛋白MUC1在膀胱移行细胞癌中的表达研究

李 娟，赵桂桂

（郑州华信学院， 河南 郑州 451150）

粘蛋白MUC1在膀胱移行细胞癌中的表达研究

李 娟，赵桂桂

（郑州华信学院， 河南 郑州 451150）

目的：检测粘蛋白MUC1在膀胱移行细胞癌和膀胱良性病变及正常膀胱组织中的表达,探讨其在膀胱移性细胞癌诊断、预后和治疗中的意义.方法：采用免疫组化S-P方法和彩色医学图文分析系统，对40例膀胱移行细胞癌组织，14例腺性膀胱炎组织（对照组）和17例正常膀胱组织（对照组）粘蛋白MUC1表达进行检测分析；所有数据均用SPSS13.0统计软件包进行统计学处理.结果：MUC1在膀胱移行细胞癌组织中表达高于正常膀胱组织，两者差异性有显著性意义(P＜0.05)；与病人年龄、性别、结石、感染、首发或复发等无明显相关(P＞0.05).结论：从正常膀胱粘膜组织到腺性膀胱炎再向膀胱癌的演进过程中MUC1的表达具有增多的趋势，MUC1 是反应膀胱粘膜上皮细胞代谢活跃的增生特征，而不是恶性变的标志.

膀胱肿瘤；MUC1；免疫组织化学

近年来，我国部分城市肿瘤发病率报告显示膀胱癌发病率有增高趋势[1].肿瘤的浸润和转移是更为复杂的分 子生物学变化过程.癌细胞的浸润和转移过程中会遇到一系列的组织屏障,肿瘤细胞穿过组织屏障后,在自分泌移动因子和旁分泌移动因子的作用下移动,到达其他器官和组织继续生长[2].MUC1是一种多形态的高糖基化、高相对分子质量的跨膜糖蛋白.MUC1在粘膜表面可产生润滑作用,对保护上皮免受外界理化因素侵袭起到很重要的屏障作用,随着对 MUC1研究的逐渐深入，专家们发现 MUC1是一种具有多种功能的分子，在调节细胞间的相互作用，参与信号转导以及肿瘤的侵袭转移发生、发展和调节机体免疫反应中起着重要的作用[3].为了进一步探讨膀胱移行细胞癌发生、发展及转移的根本原因，本研究针对MUC1在膀胱移行细胞癌中的表达进行了相关探讨.

材料与方法

1 材料

1.1 标本

40例膀胱移行细胞癌（BTCC）标本来自新乡医学院第一、三附属医院和河南省人民医院；所有患者均进行手术治疗；膀胱肿瘤患者中，男性 29例，女性 11例，年龄 24-82岁，平均 56.12岁；所有病例经医院病理诊断为膀胱移行细胞癌，设为 BTCC组.同时收集 14例腺性膀胱炎标本及 17例正常膀胱组织（包括膀胱炎）作为对照组.对照组中：男性13例，女性 18例，年龄 20-82岁，平均 54.5岁.所有材料均经过 10%缓冲甲醛固定，石蜡包埋，所有病例切片均经过复查，再次诊断分级、分期.

1.2 切片处理

研究用标本在光镜下再次确诊，进行组织学分级.所用蜡块放置冰箱 24h后均切成 2-3um切片(载玻片提前经多聚 -L-赖氨酸防脱片处理)，在 70℃烤箱烤 10h取出备用.

2 免疫组织化学方法

2.1 试剂：鼠抗人 MUC1单克隆抗体；通用型免疫组织化学超敏 S-P试剂盒；S-P试剂盒；PBS缓冲液.

2.2 阳性对照:MUC1用试剂说明书中推荐的乳腺癌组织切片作为阳性对照，结果阳性.

2.3 阴性对照：用 PBS缓冲液替代抗孵育切片，结果阴性. 2.4 结果判定标准 MUC1的组织表达以细胞浆内靠近包膜侧出现棕黄色颗粒为阳性细胞，取 10个高倍镜视野每个视野计数 100个细胞，每个视野下出现阳性细胞多于 5个为阳性表达，小于5个或没有出现视为阴性表达.

3 统计学处理

应用 SPSS 13.0 for Windows统计软件包进行统计学分析,MUC1的表达与临床病理分级、分期及部分生物学参数之间的关系采用四格表 χ2进行检验,其检验水准 a=0.05，P<0.05认为具有统计学意义.

结果

1 粘蛋白MUC1的表达

MUC1染色以细胞浆或细胞膜内出现棕黄色颗粒为阳性细胞.BTCC组40例中MUC1阳性表达率为82.5%(33/40)；腺性膀胱炎组阳性表达率为64.3%(9/14)；正常组织组阳性表达率为23.5%(4/17).在浅表组、浸润组中的阳性表达率分别为62.5%，92.7%.MUC1的阳性表达率在肿瘤组和腺性膀胱炎组间的差异性无显著性意义(P>0.05)；MUC1的阳性表达率在正常组和腺性膀胱炎组间的差异性有显著性意义(P<0.05)；在与膀胱移行细胞癌相关的几种临床生物学特征统计中，年龄组中大于 50岁与小于 50岁的阳性表达率分别是 88.9%，78.7%，二者差异性无显著性意义(P>0.05)，吸烟组与非吸烟组阳性表达率分别为 90.2%，66.7%，二者差异性有显著性意义(P<0.05)；合并感染或结石组与单纯肿瘤组异常表达率分别为 88.9%，90.2%，二者差异性无显著性意义(P>0.05).

MUC1在膀胱移行细胞癌（病理分级）及对照组中的表达

讨论

1 MUC1的作用及在肿瘤发病及侵袭中的作用

MUC1胞外段决定着 MUC1特异性的空间结构和免疫原性，是细胞表面最先与机体免疫系统接触的膜表面分子之一[4].MUC1在正常上皮组织中起着重要作用：MUC1可能参与和选择素的相互作用,促进细胞-细胞间的相互作用,有利于胚泡植入的发生[5].Uehara等报道 MUC1基因转录后可发生选择性剪切，形成多种剪切体，虽然对于 MUC1基因转录后发生选择性剪切的机制目前仍不清楚，但这种选择性剪切可能与细胞的癌变有一定的关系[6].另外，血管生成在肿瘤的发展和转移过程中发挥着重要作用，目前已发现在一些肿瘤中 MUC1与血管生成因子自发表达相关，从而影响肿瘤后续的一系列生物学行为.

2 MUC1在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

研究证明，在膀胱移行细胞癌中 MUC1发生质与量的改变，并伴随着一系列的结构和功能改变.MUC1在肿瘤组阳性表达率是 82.5%，在腺性膀胱炎组阳性表达率是64.3%，两组间差异性无显著性意义(p>0.05)；正常组阳性表达率是 23.5%，与腺性膀胱炎组和肿瘤组之间的差异性均无显著性意义(p<0.05)，实验结果提示 MUC1从正常膀胱粘膜组织到腺性膀胱炎再向膀胱癌的演进过程中其表达有增多的趋势，MUC1是反应膀胱粘膜上皮细胞代谢活跃的增生特征，而不是恶性变的标志.

3 MUC1在肿瘤治疗中的作用

在上皮细胞恶性转化过程中,MUC1发生质与量的改变,其基因转录产物亦发生异常选择性剪接而形成新的抗原表位.由于 MUC1在肿瘤细胞上异常表达,使之具有区别于正常 MUC1的肿瘤特异性抗原,而成为肿瘤生物学治疗的新靶点[7].此外 MUC1的多肽骨架中含有许多连续重复序列，可非MHC(主要组织相容性复合体)限制性活化细胞毒性 T淋巴细胞(CILs)、特异性杀伤肿瘤细胞，故可设计含有一定数量连续重复序列的肽作为瘤苗来诱发针对肿瘤细胞的特异性细胞免疫应答，从而消除了糖基化对肽链表位免疫原性的影响.Murray等将 188Rc标记 C595单抗，此种复合物具有较高的免疫活性和特异性，体内外实验证实能特异定位在膀胱癌组织，可用于膀胱癌特异性靶向治疗[8].

总之，随着 MUC1在泌尿系肿瘤诊断和治疗的研究不断增多，MUC1在肿瘤的生物学特性、诊断和治疗方面扮演着重要角色，充当着肿瘤标志物和免疫治疗靶标的双重身份.由于 MUC1的基因定位已明确，以 MUC1为靶点的基因治疗将是未来的发展方向.通过基因调节手段改变 MUC1在早期癌症的表达有可能影响到细胞的粘附和极性，从而降低癌转移的危险.与 MUC1相关的肿瘤疫苗具有良好的应用前景.

〔1〕张薇，项永兵，刘振伟，等.1973-1999 年上海市区老年人恶性肿瘤发 病趋势分析 [J]. 中华 老 年 医 学 杂 志,2005,24 (9):701-704.

〔2〕夏术阶.膀胱肿瘤实验研究的发展现状与展望[J].中华实验外科杂志,2004,219(3):263-264.

〔3〕Julian J,Carson DD.Formation of MUC1 metabolic Complex is conserved in tumor-derived and normal epithelialcells [J].Biochem Biophys Res Commun, 2002,17，293(4):1183-1190.

〔4〕Werdelin O,Meldal M,Jensen T,et al.Processing of glycans on glycoprotein and gly-colpeptide antigens in antigen-presenting cells[J].Proc Natl Acad Sci USA, 2002,99(15):9611-9613.

〔5〕Carson DD,Julian J,Lessey BA,et al.MUC1 is a scaffold for selectin ligands in the human uterus[J].Front Biosci, 2006,11(4):2903-2908.

〔6〕OConner JC,Julian J,Lim SD,et a1.MUC1 expression in human prostate cancer cell lines and primary tumors[J]. Prostate Cancer Prostatic Dis,2005,8(1):36-44.

〔7〕Simms MS,Murray A,Denton G,et al.Bishop MC Production and characterisation of a C595 antibody-99m Tc conjugate for immunoscintigraphy of bladder cancer[J].U rol Res,2001,29(1):13-19.

〔8〕Murray A,Simms MS,Scholfield DP,et al.Production and characterization of 188Re- C595 antibody for radioimmunotherapy of transitional cell bladder cancer[J]. Nucl Med,2001,42(5):726-732.

R737.14

A

1673-260X（2014）08-0063-02