探析黄芪多糖对脂多糖诱导大鼠心肌细胞肥大的影响

汪海宁

近些年来，我国心肌细胞肥大的人数正呈现急速上升的趋势，由于存在诸多未解问题，引来社会一片热议。目前，临床医学中，尚无黄芪多糖在体外培养心肌细胞肥大的药理方面的报道，王新平、张朝云等人从实验角度方面探讨这方面的问题。对此，本文借助自己的临床实践，探析黄芪多糖对脂多糖诱导大鼠心肌细胞肥大的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取新生的SD大鼠出生日为1～3 d，雌雄不限，将其作为研究对象，将其细胞按照规定培养2 d之后，同时设定对照组、模型组，按照黄芪多糖的浓度设定为低、中、高质量组。

1.2 方法 药品与试剂：黄芪多糖（天津赛诺制药有限公司，国药准字Z 20040086），质量分数为98%。脂多糖（LPS）为Sigm a公司生产；DMEM培养基选用Gibco公司的产品；胎牛血清选取杭州四季青生物工程材料有限公司的产品；Fluo-3/Am选取江苏碧云天生物工程公司的产品；大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）ELISA检测试剂盒为研域化学试剂有限公司的产品；RT-PCR试剂盒，选用的为大连宝生物工程有限公司的产品[1]。对体外乳鼠心肌细胞原代培养，在对细胞进行常规性地培养2 d之后，对其分为对照组、黄芪多糖低、中、高质量浓度组。选用的对照组不实施任何处理措施，

黄芪多糖低、中、高质量浓度组则分别选用黄芪多糖1、10、100mg/L的孵育乳鼠心肌细胞，而后依据规定的步骤加进LPS 1mg/L。

应用计算机的图像分析系统测量这些细胞的体积，采用RT-PCR法认真地检测大白鼠心房利钠多肽(ANP)m RNA表达[2]，应用ELISA法检测这些细胞中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量，应用Fluo-3/Am荧光染色剂来承载这些细胞，进而在激光共聚焦的显微镜下检测细胞内的钙离子浓度([Ca2+]i)的短时间的变化[3]。

1.3 统计学方法 本文采用的数据均应用SPSS 17.0软件来详细分析统计的，同时为加强可信度，本文的计量的资料用均数±标准差(±s)来表示，文中的实验中数据均为使用的平均值。P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

经过以上实验检测，与对照组相比，LPS 1mg/L能够让机体的心肌细胞的体积明显地变大，心房利钠多肽(ANP)mRNA的表达能力明显地提高，细胞分泌的TNF-α蛋白的含量也呈现一个直线上升的趋势，并且机体的心肌细胞内[Ca2+]i的短时间的峰值有显著地增大(P<0.05)。在与模型组的比较中，黄芪多糖的低、中、高质量组在预先服药之后，能够有效地抑制机体心肌细胞体积得增大，让机体细胞所产生的TNF-α得到明显地降低，心房利钠多肽(ANP)mRNA的表达能力明显地下降(P<0.05)。实验中还可以发现，黄芪多糖的中、高质量组的以上两个指标都能够达到对照组所要求的水平(P>0.05)。黄芪多糖的高质量组能够有效地拮抗LPS，将对这一正常的心肌细胞内的[Ca2+]i在短时间内产生巨大地增幅作用(P<0.05)。

3 讨论

黄芪多糖中的黄芪为最主要的活性成分，可以起到调节机体的免疫力、抵抗肿瘤、抗菌、修复受损的神经、延迟细胞衰老等功效。脂多糖（LPS）为诱导机体的心肌细胞释放相应的炎症细胞因子的非常有作用的刺激性的因素，一般LPS结合蛋白（LBP）连接在一起，再传递到单核细胞、巨噬细胞的表面，与他们的特异性受体的CD 14发展成LPS/LBP/CD 14的复合物，这一复合物就能够与Toll样的受体4（TLR 4）产生相互协作的功效，开启机体细胞内的多种的信号通路，让他们发生多种的炎症因子表达，这样就能够增加心肌细胞的肥厚，降低心肌的收缩功能，以及让心肌细胞大量的死亡[4]。临床多项研究发现，黄芪多糖对脂多糖诱导大白鼠的腹腔巨噬细胞中所发出的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）等有着不一样的抑制功效，这就说明能够透过抑制机体的炎症因子的分泌，就可以减轻对组织细胞的伤害，起到较好的保护功效[5]。黄芪多糖还可以极大地改善糖尿病模型的大白鼠机体内的物质代谢的功能，进一步降低心肌钙的含量，这就将对心肌超微结构起到非常好的保护功效。

综上所述，黄芪多糖对脂多糖诱导大鼠心肌细胞肥大可以起到非常好的保护效果，改善机体的生活质量，其机理与降低[Ca2+]i、抑制TNF-α的产生等有着密切地联系，对于一些机理仍需进一步探索。

[1] Liu CJ,Cheng YC,Lee KW,et al.Lipopolysaccharide induces cellular hypertrophy through calcineurin/NFAT-3 signaling pathway in H9 c 2 myocardiac cells[J].Molecular and Cellular Biochemistry,2008,12(4):113-114.

[2] 李晓冬,王宝,王建芳,等.银杏叶提取物对U251胶质瘤细胞的促凋亡作用[J].当代医学,2013,19(14):183-184.

[3] 张桂菊,陈海霞.康艾扶正片对恶性肿瘤治疗作用的疗效观察[J].当代医学,2011,17(15):193-194.

[4] 苏旭春,梁傍顺,邬晓东,等.黄芪多糖对化疗后气虚证患者青紫舌的改善作用[J].中草药,2010,12(1):213-214.

[5] 王秋宁,王洪新,杨育红,等.黄芪甲苷对异丙肾上腺素诱导的乳大鼠心肌细胞肥大的保护作用[J].中国药理学与毒理学杂志,2011,13(1):263-264.