水产品中泰乐菌素残留量的液质联用检测方法

秦振发

摘 要 通过水产品中泰乐菌素残留量检测方法入手，探索水产品中泰乐菌素残留量的药物残留液相色谱串联质谱的检测技术。

关键词 水产品；泰乐菌素；残留量；液相色谱串联质谱

中图分类号：TS254.7 文献标志码：A 文章编号：

水产品药物残留对人们健康的危害已经成为当今食品安全的重要因素之一。由此，主要论述水产品中泰乐菌素残留量的检测方法，泰乐菌素属于16元大环内酯类抗生素，近年来，泰乐菌素被广泛应用于水产养殖业，但是，泰乐菌素等大环内酯类抗生素对人体有着潜在危害性。

1 试验设计及材料

1.1 泰乐菌素的作用

泰乐菌素是一种促进生物生长的化学药品，呈白色或暗黄色粉末状，易溶于水，常被用于治疗药物使用。另外，它有很好的吸收和排泄作用，能快速促进各类微生物的生长。现在，有很多水产品养殖户用泰乐菌素来防治鱼病、促进鱼体生长。

泰乐菌素用于水产品中，的确有很好的防病害及促生长作用，但如果在水产品中大量使用泰乐菌素，会有大量的药物残留在水产品中，对人体有一定的危害。近年来，食品安全问题突出，对水产品中泰乐菌素残留量检测方法的研究也在不断加强。

1.2 使用的主要仪器设备

色谱柱：Hypersil GOLD 100mm*2.1mm粒径3um；液相色谱仪：Themo scientific 1250高压液相色谱。质谱仪：Themo scientific TSQ Quantum Access MAX

2 水产品中泰乐菌素的预处理

预处理的具体方式是：称取5 g水产品样品放在50 mL的塑料离心管里，向离心管中加入20 mL的酸化乙腈；震荡混匀，再用超声波超声提取5 min；4 000转/min离心5 min，取上清液转移至另一个离心管中，把样品残渣再加入15 mL的酸化乙腈重复提取1次，合并上清液。

将上述提取液过预先用5 mL乙腈活化的中性氧化铝柱，收集过柱后的提取液，提取液过柱后再用5 mL乙腈淋洗柱体，合并于梨形瓶中，加入20 mL异丙醇。在40℃水浴中旋转蒸发至干，加入1 mL流动相，再加入2 mL的乙腈饱和正己烷，震荡洗脱，再把洗脱液转移到10 mL的离心管中，漩涡震荡30 s，4 000 r/min离心5 min，取下层液过0.22 μm滤膜，供上机测定用。

3 液相色谱质谱联用检测泰乐菌素残留量

3.1 提取剂及提取方式

为提高水产品中泰乐菌素的药物残留提出效果，这里采用酸化乙腈、乙腈与甲醇进行实验研究，实验具体方法是，把泰乐菌素添加到不含泰乐菌素的样品中，在实验过程中，通过外标回收率大小来评价提取剂的提取效率。经过试验发现酸化乙腈回收率均大于80%，所以，最终确定酸化乙腈为次检测方法的最佳提取剂。

3.2 内标物的确定

液相色谱质谱联用检测法利用内标物对泰乐菌素做相关的定量判断，以便达到更加准确的检测效果。因为罗红霉素具有与泰乐菌素相近的性质，所以，在此次检测实验中主要采用罗红霉素为内标物，这样会使泰乐菌素在水产品中的残留量测量更加准确。

3.3 色谱分离条件的研究

經过对色谱柱和流动相优化设计的试验研究，选用合适的色柱分离罗红霉素与泰乐菌素样品，最佳的色谱分析条件为：色谱柱选用Hypersil GOLD 100 mm*2.1 mm粒径

3 um；流动相选用乙腈与乙酸铵（5 mmol/L加0.1%甲酸）梯度洗脱，流速为0.20 mL/min，柱温在35℃。

3.4 质谱条件的优化

在质谱中对质谱条件进行优化，确定质谱条件为：鞘气30 psi，辅助气压力为5 psi、正离子喷雾电压为3 500 V、碰撞气压为1.5 mTorr等。然后采用多反应检测模式，然后选择好定性与定向离子。

3.5 标准曲线和线性范围

用50%乙腈、水配制成质量浓度分别为1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、25.0 ng/mL、50.0ng/mL、100.0 ng/mL、250.0 ng/mL、 500.0ng/mL泰乐菌素标准系列，此标准系列中内标浓度为50 ng/mL。以峰面积为纵坐标，以泰乐菌素的质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。结果表明泰乐菌素在1.0～500 ng/mL范围内呈良好的线性关系，相关系数大于0.997，回归方程为Y=0.574 214x+0.0 158 579。

3.6 检出限和限量值

此方法检出限为0.5 μg/kg。加标水平下回收率均大于70%，相对标准偏差小于15%，此定量限的精密度和准确度均满足药残检测的要求。

3.7 不同浓度的回收率

在鲫、对虾和草鱼3种样品中的加标试验中，回收率在78.40%～110.20%的范围，相对标准偏差为1.56%～8.78%的范围，准确度能满足有关检测标准

要求。

液相色谱条件的开发需要按照专属性高、准确度高和低成本为目标，尽量在最短的时间内得到最佳的峰型、与合适的分离度，是检测效果达到最佳水平。目前，该研究方法的检出限、准确性及精密度都满足各国对水产品中药物残留检测的技术要求。

4 结语

总之，用液相色谱质谱联用检测水产品中泰乐菌素残留量的检测方法，是目前较为常见的检测方式之一。它操作简单、灵敏度高、应用性好，是水产品中大环内酯类抗生素残留量检测比较好的方法。

（责任编辑：刘昀）