淫羊藿次苷抗疲劳及抗氧化作用

李晓萍 薛海娇 郭丽娜 刘忠英

(白城师范学院，吉林 白城 137000)

淫羊藿为小檗科淫羊藿属植物〔1〕。有益精气、坚筋骨、补腰膝、强心力之功效。现代药理实验研究表明，淫羊藿中主要活性物质为黄酮类化合物，具有抗骨质疏松活性、促进造血功能、增加心脑血管血流量、免疫功能、抗衰老、抗肿瘤等多种功效〔2〕。目前，相关研究结果表明，人类的许多疾病与氧化应激有关〔3〕。由自由基介导的氧化损伤在许多疾病的发生和发展过程中起到极其重要的作用。由活性氧(ROS)、活性氮 (RNS)引起的蛋白质氧化损伤与衰老、阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)等老年性疾病的发生有密切关系〔4〕。关于淫羊藿次苷抗疲劳、抗氧化活性的研究未见报道。本实验采用运动性实验与生化指标检测相结合的方法，研究淫羊藿次苷抗氧化、抗疲劳作用。

1 材料与方法

1.1实验动物 健康SD大鼠40只，体重(200±20)g，购自吉林大学实验动物中心。

1.2试剂和仪器 淫羊藿次苷，淡黄绿色粉末，纯度为75%，由实验室制备。香菇多糖：北京康蒂尼药业有限公司。血乳酸试剂盒、尿素氮(BUN)试剂盒、肝糖原测定试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒、过氧化物歧化酶(SOD)试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。Spectra FLOUR plus酶标仪(瑞士TECAN公司)，恒温游泳池，水浴锅。

1.3实验方法 大鼠购进后，饲养1 w，适应环境。随机分为空白对照组、阳性对照组、低、中、高剂量组，每组8只。其中低、中、高剂量组经大鼠灌胃给予淫羊藿次苷(含量为75%)7.5 mg/kg、15 mg/kg及22.5 mg/kg，空白对照组给予蒸馏水的剂量为20 ml/kg，阳性对照组给香菇多糖(北京康蒂尼药业有限公司)420 mg/kg。每组均连续给药28 d后，于末次给药1 h后进行实验，在大鼠尾部负重5%的铅皮，投入恒温游泳箱中，温度(27±0.5)℃，水深40 cm。以头部沉入水中不能游出水面为体力耗竭，记录体力耗竭的游泳时间。大鼠游泳后取出，断头取血，以转速4 000 r/min，温度4℃ 离心10 min，取血清分装，并取肝脏，放好冻存。测定指标：负重游泳时间、血乳酸(LD)、BUN、肝糖原、肝脏MDA、SOD。

1.4统计学分析 计量资料组间比较采用t检验。

2 结 果

2.1淫羊藿次苷抗大鼠运动性疲劳作用 与空白组相比较，淫羊藿次苷中、高剂量组能显著延长大鼠的负重游泳时间，其中高剂量组作用强于阳性药组，低剂量组作用不显著；与空白组相比较，淫羊藿次苷的高剂量组能显著降低大鼠血清中BUN；中剂量组和高剂量组均能显著降低LD量，低剂量组作用不显著；淫羊藿次苷的高、中、低剂量组能显著提高大鼠肝脏中肝糖原含量，其中高剂量组比阳性药组作用更强。见表1。

2.2淫羊藿次苷抗氧化作用 与空白组相比较，淫羊藿次苷的中剂量组和高剂量组能极显著提高大鼠血清中SOD的活力(P<0.01)，低剂量组作用不显著；淫羊藿次苷三个剂量组能显著降低血清中MDA的含量，且抗氧化作用随着淫羊藿次苷的剂量增加而增强。见表2。

表1 淫羊藿次苷对大鼠运动性指标及生化指标的影响±s,n=8)

表2 淫羊藿次苷对大鼠抗氧化作用的影响±s,n=8)

3 讨 论

疲劳是机体失去其完成原来所从事的正常活动或者工作能力，身体功能暂时降低的现象。运动性疲劳会导致机体抗过氧化能力下降、中枢神经系统的疲劳、免疫功能下降、神经内分泌功能抑制、造血系统功能抑制等〔5〕。抑制氧化损伤是防治疾病一个重要的途径。中药抗氧化作用的机制主要包括清除活性氧自由基，增强抗氧化酶的活性，抗脂质过氧化，减少DNA损伤及对氧化酶系活力的影响〔6〕。

从朝鲜淫羊藿根部提取出的淫羊藿次苷可使转录信号转导子与激活子相关信号失活，从而使急性髓细胞白血病细胞株U937发生凋亡〔7〕，还可以通过激活雌激素信号通路来促进大鼠体外培养骨髓间充质干细胞成骨性分化过程〔8〕。SOD是生物体内清除自由基的一种重要酶，能使机体有效抵御自由基的毒性〔9〕；MDA是脂质过氧化最重要的产物之一，其含量高低可反映出抗氧化能力强弱〔10〕。淫羊藿次苷能提高大鼠血清中SOD活力，加快MDA的清除速率，具有显著的抗氧化活性。

大鼠负重游泳时间的长短可有效反映出抗疲劳能力〔11〕。BUN为蛋白质的代谢产物，强运动时，蛋白质的代谢加快，BUN的清除速率可反映出机体抗疲劳的能力；糖原是运动过程中的主要能源物质，肝糖原含量越高，抗疲劳活性越强；在强运动过程中，机体主要通过无氧氧化供能，其代谢产物LD是引起疲劳的原因之一，LD的清除有利于疲劳的恢复〔12〕。本实验结果表明，淫羊藿次苷可延长大鼠负重游泳时间，降低BUN含量，提高肝糖原含量，减少LD堆积，表现出显著的抗疲劳活性。

综上所述，淫羊藿次苷具有显著的抗运动性疲劳及抗氧化活性。其抗氧化、抗疲劳活性与给药剂量成正比。本实验研究结果可为抗氧化保健品的研制奠定基础。

4 参考文献

1Li HF，Guan XY，Ye M，etal. Qualitative and quantitative analyses of Epimedium wushanense by high-performance liquid chromatography coupled with diode array detection and electrospray ionization tandem mass spectrometry 〔J〕. J Sep Sci，2011；34(12):1437-46.

2曾庆岳，王云山.淫羊藿药理作用研究进展〔J〕.医药导报，2012；31(4):462-5.

3邓 薏.近五年国内中药抗氧化作用的研究进展〔J〕.中国药理与临床，2012；28(6):155-62.

4郝春燕，苏海翔.蛋白质氧化性损伤与疾病研究进展〔J〕.国外医学·临床生物化学与检验学分册，2004；25(5):468-70.

5郑 伟，杨洪波.中药抗运动性疲劳研究进展述评〔J〕.体育学刊，2010；17(6):107-11.

6李秋红，李廷利，黄莉莉，等.中药抗氧化的作用机理及评价方法研究进展〔J〕.时珍国医国药，2008；19(5):1257-8.

7Kang SH，Jeong SJ，Kim SH，etal.Icariside Ⅱinduces apoptosis in U937 acute myeloid leukemia cells:role of inactivation of STAT3-related signaling〔J〕. Plosone，2012；7(4):1-9.

8翟远坤，陈克明，葛宝丰，等.淫羊藿次苷Ⅱ通过激活雌激素信号通路促进骨髓间充质干细胞的成骨性分化〔J〕.中国药理学通报，2011；27(10):1451-7.

9夏铁骑.自由基、活性氧、SOD及植物衰老机理研究的现状与进展〔J〕.濮阳职业技术学院学报，2005；18(2):23-4.

10孙 蓉，李素君，黄 伟，等.氧化损伤相关指标在中药肝毒性损伤机制中作用与研究进展〔J〕.中药药理与临床，2009；25(1):80-1.

11瞿 燕，陈虹静，熊 涛.虫草五加片抗疲劳作用的实验研究〔J〕.中国中医急症，2010；19(7):1178-9.

12马挺军，徐艺青.西伯利亚白刺籽油的抗疲劳活性〔J〕.中国实验动物学报，2012；20(5):77-9.