近红外光纤光谱法在清热解毒口服液中黄芩苷含量快速检测中的应用价值分析

何红晖

（长春中医药大学附属医院，吉林 长春 130021）

近红外光纤光谱法在清热解毒口服液中黄芩苷含量快速检测中的应用价值分析

何红晖

（长春中医药大学附属医院，吉林 长春 130021）

目的 分析近红外光纤光谱法在清热解毒口服液黄芩苷含量快速检测中的应用价值。方法随机抽取80份清热解毒口服液，均采取近红外光纤光谱法检测，利用HPLC测量黄岑苷含量。结果 清热解毒口服液中黄岑苷含量的R20.915，RMSEE为0.040，RPD为3.44，RMSEP为0.039。通过对样品NIR预测值以及HPLC分析值的比值进行验证，分析预测回收率，平均回收率为100.3%。结论 使用近红外光纤光谱法快速检测清热解毒口服液中黄岑苷含量，可快速准确分析黄岑苷含量，应用价值确切，值得使用。

近红外光纤光谱法；清热解毒口服液；黄芩苷含量

清热解毒口服液是临床常用口服药，具有清热解毒的功效，由金银花、黄岑等药物加工而成，可治疗发热面赤、咽喉肿痛等症状，疗效确切，值得肯定。为了消除假劣产品，临床规定以HPLC定量分析黄岑苷含量［1］。传统测量方法操作复杂，检测速度慢，且无法实现在线监控生产质量，且无法快速筛查基层现场假劣产品。近红外光谱（NIRS）是借助化学计量学方法处理数据，提取所含的定性和定量，快速准确，富含化学信息，在中药检测应用中日益广泛。现本文以清热解毒口服液作为对象，分析NIRS对黄芩苷含量进行快速检测，总结如下。

1　材　料

1.1药品和试剂：选取80份清热解毒口服液（吉林市双士药业有限公司），黄岑苷对照品为中国药品生物制品检定所提供，色谱纯为甲醇，取双蒸水，剩下为分析纯。

1.2方法：取HPLC测定黄岑苷含量，使用色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 µm），流动相甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.3），流速为每分钟1.0 mL，检测波长在276 nm，柱温30 ℃。

NIRS采集。光谱仪分辨率为8 cm，扫描次数为32次，参比为水，使用液体光纤采集光谱，每个样品实施3次平行实验，取平均值，使用光谱仪专用软件，基线校正光谱信号，光谱范围在4000～12000 cm。

将清热解毒口服液样品黄岑苷含量值及近红外光谱数据进行处理，使用化学计量学中的偏最小二乘法建立定量校正模型，选取60个样品作为校正样品集，剩下20个样品作为验证集。使用相关系数（R2），估计误差均方根（RMSEE）对模型进行评价，模型结构越合理，表现为R2越接近1，RMSEE越小。使用相对分析误差（RPD）值详细评价模型，若PRD误差＞3，表明定标具有良好效果，建立模型可以在实际检测中使用，若2.5＜RPD＜3，表明NIRS定量分析该成分是可靠的；若RPD＜2.5，则表明建模型在实际中无法应用。采用RMSEP作为衡量指标，若RMSEP越小，说明模型具有较强的预测性能和推广能力。

2　结　果

2.1黄岑苷含量测定情况分析：80份样品，黄岑苷含量最低的是1.805 g/L，最高的是2.534 g/L；与梯度分布和建模要求相符。

2.2选择光谱预处理方法：选择微分处理扫描得到原始吸收光谱，以免影响基线校准，以此分辨重叠峰，使分辨率和灵敏度明显提高。但在放大了导数光谱法，使相邻波长点差异放大，也会放大噪声，降低了信噪比，因此，在选择光谱预处理方法时，应针对不同的检测样本优先选择针对性的光谱预处理方法，在本次研究中选择介导数光谱法具有最好的预测效果。

2.3选择光谱范围：近红外全波段光谱一般会存在冗余信息，选择光谱波段时，使包含待测组分的信息量最大，避免干扰到背景，以此改善模型性能，增强最佳预测效果。在光谱范围中，6100～7450 cm段内，有较为不明显的吸光度，噪音干扰大，会对模型的预测能力造成影响；11996～7498 cm和6100～5446 cn有较为丰富的信息量。为进一步选取建模谱段，根据不同波段对比，通过R2、RPD及RMSEE进行考察，说明表明11996～7498 cm和6100～5446 cn区间能够符合近红外定量分析模型方法的常规要求。

2.4选择的主成分数：偏最小二乘法建立校正模型，选择主成分数会在很大程度上影响模型的预测能力，有较多主成分数，使模型包含较多测量噪音，存在过多拟合现象；主成分数太少，会使建模信息不全，降低了预测能力。因此，需选择最佳的维数建模，对R2、RPD等值的影响。

2.5建立和验证校正模型：通过结一阶导数处理NIR光谱后，于11996～7498，6100～5446建立最优校正模型。此模型R2为0.915，RMSEE为0.040，RPD为3.44，RMSEP为0.039。通过对样品NIR预测值以及HPLC分析值的比值进行验证，分析预测回收率，平均回收率为100.3%。说明，建立的模型性能良好。

3　讨　论

清热解毒口服液是临床常用清热解毒的药剂口服液，由黄岑、连翘、金银花、玄参、板蓝根、栀子、知母等中药制成，诸药合奏清热解毒功效；尤其是对赤躁口渴、发热面赤、咽喉肿痛，具有显著疗效。但在目前药品中，若缺乏有效检测控制方法，极易出现伪冒假劣产品［2］，对患者的生命安全及身心健康造成严重影响。在2010年颁布的《中国药典》［3］中，对清热解毒口服液中指标性成分黄岑苷以HPLC进行定量分析。在测量黄岑苷时，采用传统分析方法进行处理分析，但需要前处理，具有较高成本，操作复杂，难以快速检测，且保证药品生产过程的在线质量检测，无法快速筛查基层现场的假劣产品，具有一定的局限性。近红外光谱（NIRS）指分子的振动频谱，通过吸收分子中的CH、OH及NH基团的倍频及合频［4］，具有较弱的吸收谱带强度，谱带复杂，重叠严重。在采用NIRS时，多利用化学计量学方法处理数据，在提取定性、定量信息时，与经典的定量方法相关分析，构建数学模型，有效判断待测组分的含量和相似度。NIRS具有快速、准确性［5］，能够实现在线检测要求。通过本次研究，清热解毒口服液中黄岑苷含量的R20.915，RMSEE为0.040，RPD为3.44，RMSEP为0.039。通过对样品NIR预测值以及HPLC分析值的比值进行验证，分析预测回收率，平均回收率为100.3%。由研究结果可以看出，模型结构具有较高合理性，具有较强的预测性能和推广能力。通过NIRS和化学计量学技术结合，并使用偏最小二乘法，具有快速、准确、无污染的特点，能够快速分析清热解毒口服液中黄岑苷的含量。但也需要进一步优化各种参数，以此在检测工作中得到更为广泛的应用。

［1］聂翠翠，彭家钢，杨瑞芬，等.高效液相色谱法测定清热解毒口服液中绿原酸和黄芩苷的含量［J］.湖北中医药大学学报，2011，13（6）:33-35.

［2］白雁，李珊，龚海燕.近红外光纤光谱法快速检测清热解毒口服液中黄芩苷的含量［J］.中国实验方剂学杂志，2012，18（21）:109-112.

［3］董丽华，杨东华，高文吴.HPLC法测定清热解毒口服液黄芩苷含量［J］.黑龙江医药，2005，18（4）:247-248.

［4］杨江丰，殷红妹.清热解毒口服液中黄芩苷和连翘苷及靛玉红的含量测定［J］.医药导报，2005，24（9）:819-820.

［5］王媛，范全民.HPLC测定清热解毒口服液中绿原酸与黄芩苷含量［J］.中国药品标准，2011，12（1）:35-37.

R286

B

1671-8194（2015）16-0057-02