5－氟尿嘧啶对老年鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA水平的影响及临床疗效

5-氟尿嘧啶对老年鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA水平的影响及临床疗效

蒋成义李多杰1汪洪涛2江涛许亚佳

(蚌埠医学院第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科，安徽蚌埠233004)

摘要〔〕目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)对老年鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA水平影响及对老年鼻咽癌患者的临床疗效。方法收集90例Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌患者，随机分为实验组和对照组各45例。两组均给予放射治疗，实验组辅助给予5-FU治疗，荧光定量PCR反应监测患者治疗前后EB病毒DNA的变化，临床检查和MRI判断患者治疗后的临床疗效，进行对比分析。结果实验组较对照组临床有效率高(P=0.011)。对颈淋巴结转移患者，实验组较对照组有效率高(P=0.000)。实验组和对照组治疗后EBV DNA均较治疗前显著降低，实验组较对照组降低更明显(P<0.05)。结论5-FU能明显降低老年鼻咽癌患者血浆EBV DNA水平，提高患者的临床疗效。

关键词〔〕鼻咽癌；5-氟尿嘧啶；EB病毒DNA

中图分类号〔〕R73〔文献标识码〕A〔

1蚌埠医学院第一附属医院肿瘤放疗科

2蚌埠医学院免疫学教研室

第一作者：蒋成义(1975-)，男，硕士，副教授，副主任医师，主要从事头颈部肿瘤基础及临床研究。

EB病毒(EBV)与鼻咽癌关系非常密切〔1〕，其中血浆EBV DNA定量测定是近年发展起来的EBV血清学标志物检测技术。研究证实不同时期的血浆EBV DNA拷贝数在鼻咽癌早期诊断临床分期、疗效监测、预后判断等方面有重要的临床意义〔2〕。目前治疗鼻咽癌的主要手段仍是放射治疗，但治疗效果很差。鼻咽癌对化疗相对敏感，局部中、晚期的治疗应以综合治疗为主，治疗可以显著提高疗效〔3〕。5-氟脲嘧啶(5-FU)是鼻咽癌化疗中最常用的方案。本文旨在进一步观察老年鼻咽癌患者在使用化疗药物5-FU期间，血浆EBV DNA水平的动态变化及其临床疗效。

1资料与方法

1.1临床资料选取2011年4月至2013年5月我院耳鼻喉科通过病理检测确诊为鼻咽低分化鳞癌及未分化癌患者90例。年龄60～77〔平均(65.3±10.3)〕岁，其中男62例，女28例，按92分期〔3〕，Ⅲ期47例，Ⅳ期43例。随机分为实验组和对照组各45例。实验组和对照组均有40例患者有颈部淋巴结转移。

1.2治疗方法所有的患者均接受同期放疗，放射治疗按照临床检查和CT或磁共振成像(MRI)示肿瘤范围设野，鼻咽部剂量为70～74 Gy，颈部治疗剂量60～64 Gy，预防剂量50 Gy。其中实验组患者同时接受化疗药物5-FU治疗，500 mg/ml，静脉滴注，2次/w，连续6 w。患者化疗前常规预防应用5-羟色胺(5-HT3)受体拮抗剂。出现外周血白细胞和血小板减少者，给予粒细胞集落刺激因子和白细胞介素11治疗。

1.3血浆标本采集分别抽取治疗前(初诊)、治疗后(2～6 w)清晨空腹肘静脉血5 ml，放入乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管中，16 000 r/min离心5 min，吸取管中上层血浆并转移至另一抗凝管，-20℃保存，以便进行下一步的处理。

1.4血浆DNA提取与荧光定量PCR反应冻存的血浆置于4℃解冻，每例标本取50 μl血浆，用QIAamp血液DNA提取试剂盒(德国Qiagen公司)抽提DNA。按试剂盒说明书进行血液DNA的提取。血浆EBV DNA水平通过荧光定量PCR反应进行测定。用成都东方锐进科技有限公司ABI-7300实时荧光定量PCR仪进行检测，检测过程按厂家说明的检测步骤、结果判断以及质量控制方法进行。

1.5疗效评价标准患者于第6周化疗后第7天体检和行MRI检查。按实体瘤治疗后评价标准(RECIST)对两组患者的疗效进行评价，分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)和疾病进展(PD)，有效率为CR+PR。

1.6统计学方法应用SPSS13.0软件进行t检验和χ2检验。

2结果

2.1两组鼻咽癌患者临床疗效比较两组患者完成6 w治疗后，实验组有效率(84.4%)显著高于对照组(60.0%)(P<0.05)，其中CR 5 vs 3例，PR 33 vs 24例，SD 7 vs 13例，PD 0 vs 5例。

2.2两组颈淋巴结转移灶有效率比较实验组颈淋巴结转移灶有效率(95.0%)显著高于对照组(62.5%)(P<0.05)，其中CR 14 vs 5例，PR 24 vs 20例，SD 2 vs 15例。

2.3两组血浆EBV DNA水平比较两组患者均完成6 w治疗，实验组和对照组治疗后EBV DNA含量〔(31.23±17.34)×103拷贝/ml，(100.24±34.67)×103拷贝/ml〕均较治疗前〔(162.47±50.23)×103拷贝/ml，(167.88±52.34)×103拷贝/ml〕下降(P<0.05)。实验组较对照组下降更明显(P<0.05)。

3讨论

鼻咽癌是头颈部肿瘤中一种较特殊的肿瘤，有其很显著的流行病学、病理学及治疗方面的特点，是一种对放、化疗均较敏感的肿瘤。目前鼻咽癌的传统治疗方案仍是以放射治疗为主。虽然近年来由于技术和设备有很大的提高和改进，但是晚期鼻咽癌单纯放射治疗5年生存率仅40%左右。因此一种新的治疗方案被很多专家提出并逐渐用于临床，即同期放疗辅助化疗的方式治疗晚期鼻咽癌。5-FU是嘧啶类抗代谢药物，临床作为肿瘤的化疗药物已有30多年的历史，目前是大多数肿瘤治疗的常用药物之一，并为头颈部肿瘤治疗的首选药〔4〕。

鼻咽癌的发生与EBV密切相关。在鼻咽癌的发展过程中，EBV感染通过表观遗传变化和多种体细胞遗传共同地破坏鼻黏部细胞功能，引起鼻咽癌的发生以及进一步恶化〔5〕。肿瘤标志物是指肿瘤细胞代谢过程中分泌到血浆或其他体液存在的一些生物化学物质。近年来，很多研究者通过提取肿瘤(如鼻咽癌、肝癌)患者和正常健康对照者血浆、血清DNA，发现肿瘤患者血浆中存在一种不同于正常对照者DNA，称为肿瘤性DNA，这可能是肿瘤细胞死亡时分泌到血浆中的生物化学物质〔6〕。Lo等〔7〕认为EBV DNA平均拷贝数可能与鼻咽癌患者病情有一定相关性。Wang等〔8〕通过研究34例转移及复发的晚期鼻咽癌患者化疗后第1个月的血浆EBV DNA清除率及含量，发现均能较好地预测疗效。朱超纲等〔2〕研究发现鼻咽癌TNM分期越晚，患者血浆中EBV DNA拷贝数越高，基本反映了临床分期。

本研究表明对于临床分期3期和4期鼻咽癌患者，在放疗的基础上，辅助化疗药物5-FU能明显降低患者血浆EBV含量。从而改善患者的临床症状，提高患者5年的生存率。另外，在放疗的基础上加用化疗药物5-FU可以明显改善患者的临床症状，使部分患者病情达到部分缓减、完全缓减、甚至病情消失。由于鼻咽癌的组织学类型具有区别于其他恶性肿瘤的独特生物学特性：局部侵蚀力强，浸润性扩展，极易侵犯邻近组织器官，区域淋巴结转移率高，造成肿瘤靶体积大而不规则；虽然对射线有较高的敏感性，但控制肿瘤要求的剂量高，且易复发和远处转移。辅助化疗药物既可以降低患者血浆中EBV含量，并且改善患者临床疗效，可以弥补单纯放疗治疗的不足。

4参考文献

1Yip TT，Ngan RK，Fong AH，etal.Application of circulating plasma/serum EBV DNA in the clinical management of nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Oral Oncol，2014；50(6)：527-38.

2朱超纲，赵淑芬，陈新林，等.EB病毒DNA定量测定与鼻咽癌“中国2008TNM分期”的关系〔J〕.中国肿瘤，2011；20(10)：772-4.

3潘建基.鼻咽癌'92分期修订工作报告〔J〕.中华放射肿瘤学杂志，2009；18(1)：2-6.

4廖清平，钟陆行.鼻咽癌治疗的研究进展〔J〕.江西医学院学报，2009；49(3)：129-31.

5武要洪，李晓江，费继敏，等.紫杉醇联合顺铂、5-氟尿嘧啶(TPF方案)治疗中、晚期鼻咽癌疗效观察〔J〕.内蒙古中医药，2011；30(3)：28-9.

6冯海燕，莫颖禧，周晓莹，等.鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA 水平与肿瘤的分期关系〔J〕.临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2008；22(6)：277-8.

7Lo YM，Chan LY，Lo KW，etal.Quantitative analysis of cell-free Epstein-Barr virus DNA in plasma of patients with nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Cancer Res，1999；59(6)：1188-91.

8Wang WY，Twu CW，Lin WY，etal.Plasma Epstein-Barr virus DNA screening followed by 18F-fluoro-2-deoxy-D-glucose positron emission tomography in detecting post treatment failures of nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Cancer，2011；177(19)：4452-9.

〔2014-10-06修回〕

(编辑袁左鸣/滕欣航)