吡诺克辛钠滴眼液的质量分析与标准改进

李海霞，刘维彬，李智慧，田海燕，刘洪海

(德州市食品药品检验检测中心，山东 德州 253000)

吡诺克辛钠滴眼液，曾用名白内停滴眼液、卡他灵滴眼液、卡它林滴眼液(Catalin)。吡诺克辛钠滴眼液主要成分是吡诺克辛钠，化学名1－羟－5－氧－5H－吡啶并－［3，2－α］－吩恶嗪－3－羧酸钠。主要治疗初期老年性白内障、轻度糖尿病性白内障或并发性白内障等。白内障形成的原因之一是由于若香氨基酸的代谢过程反常，生成醌类物质，致使晶状体的可溶性蛋白质变成不溶性蛋白质，晶状体变浑浊，视力持续减退。醌类物质对晶状体可溶蛋白质的作用可被吡诺克辛竞争性抑制［1］。全世界因白内障致盲的占46%［2］，该药物对白内障的发展具有一定的抑制功效［3］。吡诺克辛钠滴眼液由药片和专用溶液组成，每粒药片含吡诺克辛钠0.8mg;每瓶内装溶剂15mL。国内现行标准有2个，卫生部药品标准二部第四册及国家食品药品监督管理总局标准YBH16882006，检验项目包括性状、鉴别(化学反应、紫外鉴别)、检查(含量均匀度、专用溶剂的装量、pH值、微生物限度或无菌、可见异物)、含量测定，但是缺少有关物质的检查(卫生部药品标准二部第四册)、渗透压摩尔浓度等安全性检查项目。

1 依据现行质量标准检验结果与分析

1.1 总检验结果 本次试验共检验51批次吡诺克辛钠滴眼液，涉及生产企业4家，使用现行质量标准检验，合格率为100%。

1.2 分项检验结果与分析

1.2.1 性状 51批次样品均符合规定，药片为橙色片，专用溶剂为无色液体。

1.2.2 鉴别 51批次样品均符合规定，化学鉴别均显正反应;紫外光谱在230 nm与433 nm处均有最大吸收，且实测吸光度比值均在1.82～1.97之间。

1.2.3 根据各个厂家药品GMP认证的进度，分别检查了无菌或微生物限度，所有批次的样品均符合规定。

1.2.4 含量均匀度 51批样品S值在1.48～4.14;A+1.8S值在2.23～9.76，均符合规定，合格率100%。其中2个厂家的49批样品S值走势图分别见图 1、2。

图2 20批同厂家吡诺克辛钠滴眼液含量均匀度S值走势图

1.2.5 专用溶剂的装量 标准规定每瓶的装量均应在14.3～15.7mL，经检验均符合规定，且90%样品的平均装量在15mL以上。

1.2.6 pH值 标准规定应在5.7～6.7之间，检验结果均在6.1～6.3之间;同厂家不同批次pH值差别不明显，不同厂家之间pH值变化相对较小。其中2个厂家49批样品pH走势图见图3、4。

图3 29批同厂家吡诺克辛钠滴眼液pH值走势图

图4 20批同厂家吡诺克辛钠滴眼液pH值走势图

1.2.7 有关物质 仅1家企业的产品按照国家食品药品监督管理总局标准YBH16882006检验有关物质项，其杂质总和为0.2%，其限度为1.0%。

1.2.8 含量测定 51批次样品的平均含量在95.4% ～101.6%之间。结果表明，两个厂家的吡诺克辛钠含量测定值波动不大，质量稳定。其中2个厂家49批次平均含量见图5、6。

2 有关物质检查及其检验结果分析

图5 29批同厂家吡诺克辛钠滴眼液含量测定值走势图

图6 20批同厂家吡诺克辛钠滴眼液含量测定值走势图

现行标准对有关物质未加以控制，为了更好的控制产品质量，参考有关文献［4～6］，采用 HPLC 法测定有关物质含量，用于控制产品质量。

2.1 仪器与试药 Agilent 1260高效液相色谱仪，包括:真空脱气机，G13llA四元泵，G1313A自动进样，G1315A紫外检测器和 Chem station工作站;XD105DU分析天平;水为纯化水，乙腈与四氢呋喃为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2.2 方法与结果

2.2.1 色谱条件与系统适用性 色谱柱:Agilent色谱柱 C18(4.6mm ×250mm，5μm);流动相:磷酸盐溶液(取4.5 g磷酸氢二钠溶于1000mL水，用磷酸调节 pH至6.0)－乙腈－四氢呋喃(81∶18∶1);检测波长433 nm;流速:0.8mL·min－1;柱温:30℃;进样量:20μL;在该色谱条件下吡诺克辛钠与相邻杂质峰的分离度大于1.5，理论塔板数按吡诺克辛钠计在3000以上。

2.2.2 溶液的配制 取吡诺克辛钠药片1片置15mL专用溶剂中溶解，作为有关物质测定供试液;精密量取1mL至100mL量瓶中，用专用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为有关物质测定对照溶液。

2.2.3 专属性考察 取吡诺克辛钠原料10mg至10mL量瓶中用专用溶剂稀释至刻度，作为储备液;取储备液1.0mL至20mL量瓶中，加入30%过氧化氢2mL放置30min后，加入0.1 mol·L－1硫代硫酸钠2mL中和，用其专用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为氧化破坏溶液;取吡诺克辛钠原料于4500 Lx照度下放置7天后取出，用专用溶剂稀释至50 μg·mL－1的浓度，摇匀，作为光照破坏溶液;取吡诺克辛钠原料于105℃下放置24 h，放冷后，用专用溶剂稀释稀释至50 μg·mL－1的浓度，摇匀，作为高温破坏溶液。分别取上述溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，在该色谱条件下能有效检查出破坏条件下产生的杂质，主峰与杂质峰完全分离，主峰纯度大于990，表明本方法专属性良好。

2.2.4 线性关系考察 精密量取“2.2.2”项下有关物质测定供试液各 1mL，分别至 10、25、50、100、200、250mL容量瓶中，分别用专用溶剂逐级稀释成浓度成线性的溶液，分别精密量取6个线性浓度的溶液各20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。以待测物浓度C为横坐标，峰面积A为纵坐标，进行线性回归，线性方程为 A=87.705C－7.0368，r=0.9999。结果表明，在0.21 ～10.66 μg·mL－1浓度范围内线性关系良好。

2.2.5 检测线与定量限 精密量取“2.2.2”项下有关物质对照液1mL至25mL量瓶中，用专用溶剂稀释至刻度并进样测定，信噪比S/N为3.2，最低检测浓度为0.02 μg·mL－1;最低定量限为0.1 μg·mL－1。

2.2.6 精密度试验 取“2.2.2”项下有关物质对照液，在“2.2.1”项下条件重复进样分析6次，以峰面积计算RSD为0.50%(n=6)，表明本方法精密度良好。

2.2.7 重复性试验 取同一批有关物质测定供试液按“2.2.1”项下条件重复进样分析6次，分别计算杂质含量，计算结果RSD为0.04%(n=6)，表明本方法重复性良好。

2.2.8 有关物质测定结果 取4个厂家共8批次吡诺克辛钠滴眼液样品，照“2.2.2”项方法分别制备有关物质供试品溶液与对照溶液，取对照溶液20μL注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高约为满量程的20% 再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μL，分别注入色谱仪，记录色谱图，以自身对照法计算有关物质含量，各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积(1.0%)，结果见表1。

表1 吡诺克辛钠滴眼液有关物质检查结果

3 结果及讨论

3.1 法定方法的质量分析 对51批样品依据现行质量标准检验，结果均为符合规定，说明该品种质量稳定，能过基本满足临床使用要求。

在含量项下的结果分析图表中，发现生产企业各批次含量趋势偏低，提示应对主料投放进行必要复查，查找含量偏低的原因。

3.2 现行标准存在的问题

3.2.1 文献报道［7］，吡诺克辛钠滴眼液在临床使用过程中出现了说明书以外的不良反应，很有可能是由于样品自身或是杂质所致。现行标准中无有关物质检查项，不能很好的控制产品质量，有其必要性建立其有关物质测定方法。

3.2.2 试验表明，吡诺克辛钠在光照、氧化及高温条件下均有杂质峰产生，但因各厂家的生产工艺与配方有所不同，并未形成统一的质量标准，故有必要建立统一的有关物质检查方法。

3.2.3 色谱条件的选择 试验中8批次样品来自4个生产厂家，均参照国家食品药品监督管理总局标准YBH16882006检验，对照溶液不出峰或出峰很小，改用各自的专用溶剂为稀释溶剂，准确度高，4个厂家不同批次的药品均得到理想的有关物质检验结果。

4 结论及建议

药品质量评价分析的目的是确保上市药品质量可靠，人民群众用药安全有效，另一方面也利于企业的健康发展。本文考察了吡诺克辛钠滴眼液的质量现状，并对现行质量进行了评价，对法定标准检验方法进行分析，发现还有待于进一步完善提高。通过本文的探索性研究，建议在吡诺克辛钠滴眼液标准中，增加有关物质检查和渗透压摩尔浓度检查［8］。

［1］陈新谦，金有豫，汤光.新编药物学［M］.第15版.北京:人民卫生出版社，2005:76.

［2］张静.白内障的手术方式和药物治疗进展［J］.中国医药导报，2011，8(30):13 －14.

［3］Ciuffi M，Neri S，Francheli S，et al.Protective effect of pirenoxine and U74389 on induced lipid peroxidation in mammalian lenses.An in vitro，ex vivo study［J］.Exp Eye Res，1999，68(3):347 －359.

［4］李金林，姚佳颖，房桂珍，等.HPLC法测定吡诺克辛钠的含量和有关物质［J］.中国现代药物应用，2008，2(l):36－37.

［5］李金林，周小娟，安利霞，等.HPLC法测定吡诺克辛钠滴眼液中主药及有关物质的含量［J］.中国药房，2008，19(34):2696 －2698.

［6］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(二部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:附录9－10，175 －176.

［7］丁利华.吡诺克辛钠滴眼液致眼异常1例［J］.中国执业药师，2009，6(11):12.

［8］李智慧，田海燕，刘洪海，等.吡诺克辛钠滴眼液渗透压测定［J］.中国药师，2015，18(3):513 －515.