不同出生孕周新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查中17-羟孕酮切值初探

叶立新 陈锦国 钟玉杭 谢彩连

不同出生孕周新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查中17-羟孕酮切值初探

叶立新 陈锦国 钟玉杭 谢彩连

目的 探讨建立适合本中心的关于足月儿(孕周≥37周)及早产儿(孕周＜37周)先天性肾上腺皮质增生症(CAH)筛查中17-羟孕酮(17-OHP)的切值。方法 采用荧光酶免疫分析方法检测新生儿滤纸干血斑中17-OHP的浓度, 去除确诊病例的17-OHP浓度数据, 采用百分位数法确定切值。结果 4700例早产儿中, 17-OHP浓度分布水平为(15.96±10.34)ng/ml；65496例足月儿中, 17-OHP浓度分布水平为(10.21±4.96)ng/ml。早产儿17-OHP浓度的95%百分位数和99%百分位数分别为35.65、51.92 ng/ml, 足月儿17-OHP浓度的95%百分位数和99%百分位数分别为19.23、26.87 ng/ml, 两组新生儿17-OHP浓度差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 结合本中心的实际情况, 采用统一17-OHP切值进行新生儿CAH筛查不合理, 建议早产儿17-OHP 切值采用50.0 ng/ml, 足月儿17-OHP 切值采用25.0 ng/ml, 以减少假阳性率和需召回率。

先天性肾上腺皮质增生症；新生儿筛查；出生孕周；17-羟孕酮；切值

先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia, CAH)是一组由于肾上腺皮质激素合成过程中所需酶的先天性缺陷引起的常染色体隐性遗传病, 21-羟化酶缺乏(21-OHD)是最常见的CAH类型, 约占所有CAH的90%～95%［1］。检测新生儿足跟血干血斑中17-OHP浓度是对新生儿进行CAH筛查行之有效的方法。本文结合新生儿出生孕周资料对本中心2014年1～10月的新生儿CAH筛查数据进行回顾性分析, 探讨建立适合本中心的关于足月儿及早产儿CAH筛查中17-OHP切值。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 东莞市新生儿疾病筛查中心2014年1～10月进行的新生儿CAH筛查标本70196例, 男38625例, 女31571例；所有标本基本资料中有出生孕周记录, 其中早产儿4700例, 足月儿65496例。

1.2 标本采集与送检 新生儿出生48～72 h后从足跟内或外侧采血4滴, 滴于&903专用采血滤纸上制作成干血斑, 每个血斑要求直径≥8 mm, 正反面渗透性好, 共采集干血斑4个。血斑在自然通风处晾干, 放置塑料袋内密封, 并放入4℃冰箱保存。标本由专职人员(2次/周)上门收集送东莞市新生儿疾病筛查中心进行统一检测。

1.3 检测方法 采用荧光酶免疫的方法进行17-OHP浓度检测。所使用的仪器试剂包括芬兰雷勃公司生产的Neonatal17-OHP试剂盒, Thermo Labsystems Fluoroskan Ascent 荧光读数仪。

1.4 结果判断 采用试剂盒厂家提供的17-OHP切值, 若同一标本2次检测17-OHP≥20 ng/ml(30 nmol/L)判断为该新生儿CAH初筛阳性, 需将其召回重新采血复查确诊。

1.5 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 两组间17-OHP浓度差异比较采用U检验, 采用百分位数法确定切值。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同出生孕周的新生儿CAH筛查结果 去除3例确诊CAH的病例数据后, 分析新生儿17-OHP浓度标本70196例, 其中男38625例, 女31571例；早产儿4700例, 足月儿65496例。4700例早产儿中, 17-OHP浓度分布水平为(15.96±10.34)ng/ml , 65496例足月儿中, 17-OHP浓度分布水平为(10.21±4.96)ng/ml ；早产儿17-OHP浓度的95%百分位数和99%百分位数分别为35.65、51.92 ng/ml, 足月儿17-OHP浓度的95%百分位数和99%百分位数分别为19.23、26.87 ng/ml,两组新生儿17-OHP浓度差异有统计学意义(P＜0.01)。见表1。

2.2 两组新生儿17-OHP浓度分布情况 4700例早产儿中, 17-OHP浓度最低为0.01 ng/ml, 最高为104.56 ng/ml；65496例足月儿中, 17-OHP浓度最低为0.01 ng/ml, 最高为71.9 ng/ml。早产儿中, 17-OHP＜20 ng/ml占75.94%；足月儿中, 17-OHP＜20 ng/ml占97.44%。见表2。

表1 不同出生孕周新生儿17-OHP浓度比较( x-±s, ng/ml)

表2 不同出生孕周新生儿17-OHP浓度分布(n, %)

2.3 初筛阳性召回复查结果 按照厂家提供的17-OHP切值进行判断, 对上述70196例新生儿CAH筛查中初筛阳性者进行召回复查确诊, 无确诊病例。另外, 去除的3例确诊病例中17-OHP初筛浓度分别为：59.07、83.84、284.60 ng/ml。

2.4 不同出生孕周新生儿CAH筛查中17-OHP切值的建立 根据表1、表2及初筛阳性召回复查确诊的数据分析,如按照厂家提供的17-OHP切值, 则早产儿初筛的召回率为24.06%、足月儿初筛的召回率为2.56%。为了防止CAH病例的漏诊及尽可能减少初筛假阳性率, 结合以上统计数据同时根据本中心的实际情况, 将本中心早产儿CAH筛查的17-OHP切值定为50.0 ng/ml、足月儿CAH筛查的17-OHP切值定为25.0 ng/ml。

3 讨论

21-OHD是最常见的CAH类型, 占90%～95%。CAH如得不到早期诊治, 严重的会引起肾上腺皮质危象以及由此导致的脑损伤或死亡、女性患儿由于外生殖器男性化造成性别判断错误、过多雄激素均可对男、女患儿生长发育造成一系列的严重影响。17-OHP是目前最常用的筛查21-OHD的敏感指标, 通过筛查, 能使70% 21-OHD(主要是失盐型和大部分单纯男性化型)的CAH患儿在未出现临床症状前得到早期诊断。

合理的阳性切值的确立在筛查实验中至关重要, 直接影响筛查阳性的判断。阳性切值太高容易出现漏筛的风险, 太低导致的高召回率带来不必要的浪费和新生儿家长的心理负担。由于各筛查实验室实验条件的不同, 不同地区人群分布也不同, 因此, 进行行之有效的新生儿CAH筛查, 不能单纯使用试剂厂家提供的切值作为筛查阳性判断标准, 应建立本实验室合理的17-OHP切值。

国内研究表明［2-4］, 新生儿17-OHP的浓度水平与新生儿出生孕周与出生体重有关, 建议足月儿与早产儿、出生低体重儿与出生正常体重儿进行CAH筛查采用不同的17-OHP切值。国外的研究也提示, 新生儿出生后如合并心肺疾病时17-OHP也会升高［5,6］。Olgemller等［7］研究资料同样表明,根据新生儿出生体重和胎龄为依据建立相应的17-OHP切值, 可以提高确诊率, 同时在不影响筛查敏感性的前提下减少35%的召回率。万志丹等［8］研究发现, 新生儿不同出生孕周、不同出生体重各组别间17-OHP的浓度存在显著性差异, 其中, 出生孕周与17-OHP浓度的相关性最好, 建议新生儿CAH筛查分早产儿和足月儿两个17-OHP切值即可。

本研究显示, 4700例早产儿中, 17-OHP浓度分布水平为(15.96±10.34)ng/ml, 65496例足月儿中, 17-OHP浓度分布水平为(10.21±4.96 )ng/ml；早产儿17-OHP浓度的95%百分位数和99%百分位数分别为35.65、51.92 ng/ml, 足月儿17-OHP浓度的95%百分位数和99%百分位数分别为19.23、26.87 ng/ml, 两组新生儿17-OHP浓度差异有统计学意义(P＜0.01)。同时, 确诊的3例CAH病例17-OHP初筛浓度均＞50 ng/ml。如果使用试剂厂家提供的17-OHP的切值,早产新生儿组CAH的初筛阳性召回率为24.06%, 足月新生儿组CAH的初筛阳性召回率为2.56%, 过高的召回率会引起科室人力、物力的浪费和新生儿家长的心理负担。为了防止CAH病例的漏诊及尽可能减少初筛假阳性率, 结合以上统计数据同时根据本实验室的实际情况, 将本中心早产儿CAH筛查的17-OHP切值定为50.0 ng/ml、足月儿CAH筛查的17-OHP 切值定为25.0 ng/ml；同时, 应加强对初筛17-OHP浓度为25.0～50.0 ng/ml的早产儿的随访, 避免CAH的漏诊。

［1］ 顾学范.新生儿疾病筛查.上海：上海科学技术文献出版社, 2003:185-186.

［2］ 毛玉维, 郭辉, 闵娟, 等.早产新生儿体重对CAH筛查中17-羟孕酮结果的影响分析.国际医药卫生导报, 2008, 14(7):11-14.

［3］ 谢莉, 郑敏, 蔡稔, 等.柳州地区早产儿先天性肾上腺皮质增生症筛查实验cut-off值初探.检验医学与临床, 2012, 9(16): 1969-1970.

［4］ 陈宇宏, 王三南, 王旭莉, 等.不同胎龄新生儿17-羟孕酮的结果分析.吉林医学, 2012, 33(34):7472-7473.

［5］ Hayashi G, Faure C, Brondi MF, et al.Weight-adjusted neonatal 17OH-progesterone cutoff levels improve the efficiency of newborn screening for congenital adrenal hyperplasia.Arq Bras Endocrinol Metabol, 2011, 55(8):632-637.

［6］ Vander Kamp HJ, Oudshoorn CG, Elvers BH , et al.Cutoff levels of 17-alpha-hydroxyprogesterone in neonatal screening for congenital adrenal hyperplasia should be based on gestational age rather than on birth weight.J Clin Endocrinol Metab, 2005, 90(7):3904-3907.

［7］ Olgemller B, Roscher AA, Liebl B, et al.Screening for congenital adrenal hyperplasia：adjustment of 17-hydroxyprogesterone cut-off values to both age and birth weight markedly improves the predictive value.J Clin Endocfinol Metab, 2003, 88(12):5790-5794.

［8］ 万志丹, 黄湘, 张翠梅, 等.新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查中17羟孕酮cut-off的建立.国际医药卫生导报, 2012, 18(4):448-452.

Brief investigation of 17-hydroxyprogesterone cut-off values in congenital adrenal hyperplasia screening for newborn with different birth gestational weeks

YE Li-xin, CHEN Jin-guo, ZHONG Yuhang, et al.
Dongguan City Maternal and Child Health Care Hospital/Dongguan City newborn disease Screening Center, Dongguan 523002, China

Objective To investigate and establish appropriate 17-hydroxyprogesterone (17-OHP) cutoff value in congenital adrenal hyperplasia (CAH) screening for term infant (gestational weeks≥37 weeks) and premature infant (gestational weeks＜37 weeks).Methods Fluorescence enzyme immunoassay was applied to detect 17-OHP concentration in newborn dried blood spots on filter paper.17-OHP concentrations in diagnosed cases were eliminated for cut-off value determination by percentile method.Results 17-OHP concentration distribution level was (15.96±10.34) ng/ml in 4700 premature infants, and (10.21±4.96) ng/ml in 65496 term infants.Percentiles of 95% and 99% 17-OHP concentration in premature infants were 35.65 and 51.92 ng/ml, and those in term infants were 19.23 and 26.87 ng/ml.The difference of 17-OHP concentration between the two groups had statistical significance (P＜0.01).Conclusion Implement of unified 17-OHP concentration cut-off value for newborn CAH screening is irrational.Suggestions are made for implement of 50.0 ng/ml as 17-OHP concentration cut-off value in premature infant, and 25.0 ng/ml in term infant, in order to reduce false positive rate and needed recall rate.

Congenital adrenal hyperplasia; Newborn screening; Birth gestational weeks; 17-hydroxyprogesterone; Cut-off value

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.14.004

2015-04-02］

523002 东莞市妇幼保健院东莞市新生儿疾病筛查中心