CD4+T细胞凋亡率对高血压疾病患者眼底病变的影响

徐 昕，魏建丽，袁爱娟

(1.宁波市第二医院眼科，浙江 宁波 315010；2.宁波市眼科医院眼底内科，浙江 宁波 315040；3.宁波市鄞州人民医院产科，浙江 宁波 315040)

CD4+T细胞凋亡率对高血压疾病患者眼底病变的影响

徐 昕1，魏建丽2，袁爱娟3

(1.宁波市第二医院眼科，浙江 宁波 315010；2.宁波市眼科医院眼底内科，浙江 宁波 315040；3.宁波市鄞州人民医院产科，浙江 宁波 315040)

目的 探索妊娠期高血压疾病患者(PIH)的外周血CD4+T细胞凋亡率及其对眼底病变的影响。方法 选取2012年1月至2014年1月鄞州人民医院产科接收的68例妊娠期高血压疾病患者作为PIH组(眼底病变组)，而同期接收的38例正常分娩产妇作为对照组(无眼底病变组)，检测并分析产前和产后外周静脉血CD4+T细胞凋亡率，并分析对眼底病变的影响。结果 产前各组CD4+T细胞凋亡率比较有显著性差异(F=7.335，P<0.05)。产前PIH组CD4+T细胞凋亡率较对照组显著增加(t=5.192，P<0.05)。产前PIH 轻度组CD4+T细胞凋亡率较PIH中度、重度组显著增加(t值分别为8.554、7.783，均P<0.05)。产后各组CD4+T细胞凋亡率比较差异无显著性差异(F=2.934，P>0.05)。不同眼底病变程度患者产前和产后CD4+T细胞凋亡率比较均无显著性差异(F值分别为1.433、2.041，均P>0.05)，产前和产后眼底病变分级与PIH程度均呈显著正相关(r值分别为0.577、0.639，均P<0.05)。结论 妊娠期高血压疾病患者的眼底病变随患者临床病情的加重而呈加重的趋势，且产后较产前普遍好转，外周血CD4+T细胞凋亡对PIH的发生及病情发展具有一定的预警作用，但外周血CD4+T细胞凋亡在PIH患者视网膜病变的发生、发展中的作用有待进一步研究。

妊娠期高血压；外周血；CD4+T细胞凋亡率；眼底病变

近年来的相关研究发现[1]，妊娠期高血压疾病的发生、发展与细胞的异常凋亡导致母体对胎儿产生免疫耐受紊乱具有一定的相关性，而目前对于外周血CD4+T细胞凋亡在妊娠期高血压疾病及视网膜病变的发生、发展中的影响报道较少，本研究旨在探讨妊娠期高血压疾病患者外周血CD4+T细胞凋亡率对眼底病变的影响，以为妊娠期高血压及视网膜病变的防治提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年1月至2014年1月鄞州人民医院产科住院部收治的68例妊娠期高血压疾病(pregnancy induced hypertension，PIH)患者作为PIH组(眼底病变组)，均符合《妇产科学(第7版)》中诊断标准[2]，眼底检查由同一专业医师进行，于散瞳后应用直接检眼镜检查眼底，所有患者均存在不同程度眼底病变，依据《眼科学》中相关标准对眼底病变进行分期[3]，其中Ⅰ级19例，Ⅱ级34例，Ⅲ级15例。68例患者年龄在22～40岁，平均(29.66±3.76)岁，包括初产妇40例和经产妇28例，孕周均在30～42周，平均为(36.78±2.87)周。另选取同期接收的38例正常分娩产妇作为对照组(无眼底病变组)，年龄23～41岁，平均(30.59±4.29)岁，包括初产妇23例和经产妇15例，孕周均在31～42周，平均为(36.93±2.03)周。两组均排除原发性高血压疾病者；伴有其他妊娠并发症者；两组研究对象年龄、孕周及孕产情况比较均无显著性差异(均P>0.05)，有可比较性。

1.2 研究方法

两组产妇均于产前和产后3～4d抽取其清晨空腹肘静脉血液2mL置抗凝管中，于2h内进行检测。采用流式细胞仪(美国BD公司)测定外周血CD4+T细胞凋亡率，ANNEXINⅤ/PI凋亡试剂盒购自Biolegend公司，染色过程参考试剂盒专用说明书。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 各组间CD4+T细胞凋亡率

产前各组CD4+T细胞凋亡率比较有显著性差异(P<0.05)。产前PIH组CD4+T细胞凋亡率较对照组显著增加(见附图，凋亡细胞比例为Q2+Q3)，且两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。产前PIH 轻度组CD4+T细胞凋亡率较PIH中度、重度组显著增加，且差异均具有统计学意义(均P<0.05)。产后各组CD4+T细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

Q1)死细胞；Q2)中晚期凋亡细胞；Q3)早期凋亡细胞；Q4)活细胞。

附图 ANNEXIN Ⅴ/PI染色后的细胞凋亡流式图

Fig. Flow chart of cell apoptosis after ANNEXIN Ⅴ/PI staining

2.2 眼底病变与CD4+T细胞凋亡率分析

不同眼底病变程度患者产前和产后CD4+T细胞凋亡率比较均无显著性差异(均P>0.05)，见表2。

Table 1 Comparison of CD4+T cell apoptosis rate among different groups

注：◆为PIH组与对照组比较，▲为PIH轻度组与中度组比较，★为PIH轻度组与重度组比较。

组别 产前 产后 例数(n)凋亡率例数(n)凋亡率对照组(0级)3858.03±6.404565.49±4.93PIH组6861.80±7.626160.11±5.77 Ⅰ级1960.64±7.212858.30±5.30 Ⅱ级3461.63±6.932562.94±6.36 Ⅲ级1563.10±7.22853.84±5.49F1.4332.041P0.8840.484

2.3 妊娠高血压严重程度与眼底病变分级的相关性分析

产前和产后眼底病变分级与PIH程度均呈显著正相关(r值分别为0.577、0.639，均P<0.05)，说明高血压越严重，眼底病变越严重，PIH患者眼底改变随临床病情加重而加重。

3 讨论

3.1 妊娠期高血压疾病的发病机制及患者眼底病变的原因

妊娠期高血压疾病(PIH)是妊娠期特有而常见的并发症之一，常出现于妊娠中晚期，同时也是导致早产等不良出生结局和孕产妇死亡的主要原因，其发病率高达7%～10%，严重威胁母婴安全，但对于其发病机制目前尚不十分清楚[4-5]。近些年，随着肥胖孕妇逐渐增多，PIH的发生率逐渐增加，而其最基本的病理变化为全身小动脉痉挛及周围循环障碍而导致血压升高，视网膜血管又是全身最容易窥见的部位，持续的小动脉痉挛可使视网膜及视神经出现功能障碍，因此，眼底检查对评估PIH患者病情及进行相关治疗具有重要意义[6]。

3.2 妊娠期高血压疾病患者外周血CD4+T细胞凋亡率对眼底病变的影响

研究发现，胎盘的免疫耐受机制在妊娠过程中发挥重要作用，一旦此机制受到破坏则会导致病理妊娠，成为PIH发生和发展的最主要原因，且该机制的破坏由异常细胞凋亡引起[7]。凋亡是机体清除体内感染、变异或衰老细胞并维持其自身的正常生理状态的主要调节方式，相关研究已证实，人体细胞凋亡与多种生理过程密切相关。PIH的发生与机体的细胞免疫功能失调有关，而CD4+T在其中扮演重要角色，CD4+T细胞具有免疫抑制效应，可抑制T细胞对自身抗体、外源及胎儿的免疫反应。

本研究结果发现，产前PIH组CD4+T细胞凋亡率较对照组显著增加(P<0.05)，而PIH 轻度组CD4+T细胞凋亡率较PIH中度、重度组显著增加且差异均具有统计学意义(P<0.05)，提示PIH患者的发病早期，患者外周血中CD4+T细胞会出现过度凋亡而导致其凋亡率显著增加，但随患者病情的进展，机体自身会进行相应的调节而使外周血中CD4+T细胞凋亡逐渐恢复正常。产后各组CD4+T细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)，说明产后PIH患者高血压严重程度较产前得到明显改善。此外，本研究还发现，不同眼底病变程度患者产前和产后CD4+T细胞凋亡率比较均无显著性差异(均P>0.05)，提示CD4+T细胞在PIH视网膜病变发生发展过程中的作用尚不明确。但相关分析结果提示，产前和产后眼底病变分级与PIH程度均呈显著正相关(均P<0.05)，说明高血压越严重，眼底病变越严重，PIH患者眼底改变随临床病情加重而加重。视网膜血管是全身唯一可用肉眼看见的小血管，其病变可作为该病严重程度的重要参数，临床医师可通过观察眼底视网膜血管的变化了解全身的小血管的病变程度。因此，眼底检查在判断PIH患者的病情进展及严重程度方面具有重要的临床应用价值[8]。

综上所述，PIH患者的眼底病变随患者临床病情的加重而呈加重的趋势，且产后较产前均有普遍好转。外周血CD4+T细胞凋亡对PIH的发生及病情发展具有一定的预警作用，但外周血CD4+T细胞凋亡在PIH患者视网膜病变的发生、发展中的作用有待进一步研究。

[1]Fogle J E,Mexas A M,Tompkins W A,etal.CD4+CD25+Tregulatory cells inhibit CD8+IFN-gamma production during acute and chronic FIV infection utilizing a membrance TGF-beta-dependent mechanism[J].AIDS Res Hum Retroviruses,2010,26(2):201.

[2]乐杰,谢幸,林仲秋,等.妇产科学[M]. 7版,北京:人民卫生出版社,2008:94-200.

[3]管怀进,颜华,雷宁玉,等.眼科学[M].2版,北京:科学出版社,2006:285.

[4]Mbachu I I,Udigwe G O,Okafor C I,etal.The pattern and obstetric outcome of hypertensive disorders of pregnancy in Nnewi,Nigeria[J].Niger J Med,2013,22(2):117-122.

[5]Sachan R,Patel M L,Sachan P,etal.Outcome in hypertensive disorders of pregnancy in the North Indian population[J].Int J Womens Health,2013,5:101-108.

[6]Gordin D,Forsblom C,Groop P H,etal.Risk factors of?hypertensive?Pregnancies in women with diabetes and the influence on their future life.[J].Ann Med,2014,46(7):498-502.

[7]曹卫平,钱秋菊,温坚,等.妊娠期高血压患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化及意义[J].中国病理生理杂志,2010,26(7):1425-1427.

[8]Rasdi A R,Nik-Ahmad-Zuky N L,Bakiah S,etal.Hypertensive retinopathy and visual outcome in hypertensive disorders in pregnancy.[J].Med J Malaysia,2011,66(1):42-47.

[专业责任编辑：张欣文]

Effect of apoptosis rate of CD4+T cell on retinopathy in patients with pregnancy induced hypertension

XU Xin1, WEI Jian-li2, YUAN Ai-juan3

(1.OphthalmologyDepartmentofNingBoNo.2Hospital,Zhejiang,Ningbo315010,China; 2.InternalMedicineDepartmentofNingboOphthalmologicHospital,Zhejiang,Ningbo315040,China;3.GynecologyDepartmentofNingboYinzhouPeople’sHospital,Zhejiang,Ningbo315040,China)

Objective To explore the apoptosis rate of CD4+T cell in peripheral blood and its effect on retinopathy in patients with pregnancy induced hypertension (PIH). Methods From January 2012 to January 2014 68 inpatiants with PIH in obstetric department of Yinzhou People’s Hospital were collected as PIH group (retinopathy group), and 38 pregnant women with normal delivery at the same period were recruited in control group (non-retinopathy group). The prenatal and postnatal apoptosis rates of CD4+T cell in peripheral blood were detected, and the influences on retinopathy were analyzed. Results Prenatal apoptosis rate of CD4+T cell was significantly different among different groups (F=7.335,P<0.05), and it was higher in PIH groups than in the control group (t=5.192,P<0.05). Prenatal CD4+T cell apoptosis rate of mild PIH group was significantly increased than that of moderate PIH group and severe PIH group (tvalue was 8.554 and 7.783, respectively, bothP<0.05). Postnatal CD4+T cell apoptosis rate of all groups was not significantly different (F=2.934,P>0.05). Prenatal and postnatal CD4+T cell apoptosis rate showed no obvious difference between patients with different degree of retinopathy (Fvalue was 1.433 and 2.041, respectively, bothP>0.05), and prenatal and postnatal retinopathy grade were positively correlated with the extent of PIH degree (rvalue was 0.577 and 0.639, respectively, bothP<0.05). Conclusion The degree of retinopathy in PIH patients shows the same tendency with the degree of clinical symptoms, and the disease is improved after delivery. Peripheral blood CD4+T cell apoptosis has a certain role in early warning for occurrence and progression of PIH. However, further studies are needed to explore the role of CD4+T cell apoptosis in peripheral blood in the genesis and development of retinopathy in PIH patients.

pregnancy induced hypertension (PIH); peripheral blood; CD4+T cell apoptosis rate; retinopathy

2014-12-16

徐 昕(1974-)，女，副主任医师，主要从事眼科临床、眼底病的诊治工作。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.03.084

R714.2

A

1673-5293(2015)-0633-03