TNFAIP8和TNFAIP2在乳腺肿瘤中的表达及临床意义

黄海琴，张广辉，张晓丽

(1.河北北方学院附属第二医院，河北 张家口 宣化 075000；2.天津市公安局河西分局物证鉴定所，天津 300060；3.河北北方学院生命科学研究中心，河北 张家口 075000)

TNFAIP8和TNFAIP2在乳腺肿瘤中的表达及临床意义

黄海琴1，张广辉2，张晓丽3

(1.河北北方学院附属第二医院，河北 张家口 宣化 075000；2.天津市公安局河西分局物证鉴定所，天津 300060；3.河北北方学院生命科学研究中心，河北 张家口 075000)

目的 探讨乳腺肿瘤组织中肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(TNFAIP-8)和肿瘤坏死因子α诱导蛋白2(TNFAIP-2)的表达及临床意义。方法 应用免疫组织化学染色SP法检测46例乳腺癌及36例乳腺腺瘤组织中TNFAIP8、TNFAIP2表达，分析其与临床病理特征的关系。结果 乳腺腺瘤组织中TNFAIP8、TNFAIP2的表达与乳腺癌中的表达比较差异有显著性(P<0.05)；TNFAIP8、TNFAIP2表达水平与年龄、患病部位无相关性(P>0.05)；与淋巴结转移相关，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNFAIP8家族在乳腺癌发生、发展、转移中可能发挥重要作用，TNFAIP8、TNFAIP2有可能成为乳腺癌治疗的新靶点。

乳腺肿瘤；肿瘤坏死因子α诱导蛋白8；肿瘤坏死因子α诱导蛋白2；免疫组织化学；转移

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(tumor necrosis factor-α-induced protein-8，TNFAIP-8)在细胞凋亡、信号转导、肿瘤细胞增生、侵袭及转移等过程中具有重要的调节作用。TNFAIP8家族成员肿瘤坏死因子α诱导蛋白2(tumor necrosis factor-α-induced protein-2，TNFAIP-2)是一个新发现的蛋白分子，通过对T细胞受体和Toll样受体信号途径进行负向调控，进而调节机体固有免疫应答和适应性免疫应答过程。TNFAIP-8的多效应性及TNFAIP2在维持机体免疫动态平衡中的调控作用预示着TNFAIP8家族在免疫学及临床医学研究中极具应用价值，国内外学者研究TNFAIP-8、TNFAIP-2大多局限于自身免疫性疾病，如：系统性红斑狼疮、乙型肝炎及动脉粥样硬化等[1-2]。我们采用免疫组织化学技术研究TNFAIP-8、TNFAIP-2在乳腺癌及乳腺腺瘤中的表达及其与临床病理特征的相关性，探讨TNFAIP-2、TNFAIP-8在乳腺疾病发生、发展过程中的作用，以期为免疫治疗及靶向治疗寻求新的思路。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集河北北方学院附属第一医院2013-06—2014-08月手术切除女性乳腺肿瘤标本82例，病理诊断明确，术前均未做放化疗。年龄18～75岁，中位年龄46岁；病理分型：乳腺腺瘤36例，乳腺癌46例。乳腺癌46例中浸润性导管癌30例，浸润性小叶癌10例，非浸润性癌6例；淋巴结转移31例，无淋巴结转移15例。

1.2 标本处理

取大小10 mm×10 mm×4 mm的组织，固定于10%中性甲醛内(24 h)，常规石蜡包埋，切片厚度5 μm，裱片后37 ℃保存，待染。

1.3 免疫组化染色

应用免疫组化SP法(SP试剂盒购自北京博奥森生物技术有限公司)进行染色，染色程序严格按照试剂盒要求进行，阴性对照用PBS代替Ⅰ抗。切片脱蜡至水，高温热修复，3%过氧化氢室温10 min，PBS冲洗3次，山羊血清孵育10 min，加入Ⅰ抗4 ℃过夜，滴加Ⅱ抗37 ℃水浴孵育30 min，PBS漂洗3次，滴加Ⅲ抗37 ℃水浴孵育30 min，PBS漂洗3次，最后DAB染色，封片。

1.4 免疫组化结果判定

TNFAIP-2和TNFAIP-8阳性物质呈棕黄色主要集中在细胞质中，经光镜高倍视野(×400)观察，凡阳性细胞数≥10%者为阳性病例，阳性细胞<10%者为阴性病例。

1.5 统计学方法

采用SPSS 19.0统计软件处理数据，χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 乳腺肿瘤组织中TNFAIP-8、TNFAIP-2的表达

TNFAIP-8、TNFAIP-2在乳腺癌组织中阳性表达率均高于乳腺腺瘤组织中阳性表达率，差异有统计学意义(P<0.05)(表1)。

表1 乳腺肿瘤组织中TNFAIP-8、TNFAIP-2表达比较 n(%)

2.2 TNFAIP8、TNFAIP2表达与乳腺癌生物学特征的关系

TNFAIP8、TNFAIP2在浸润性乳腺癌内阳性表达率均明显高于非浸润性乳腺癌(P<0.05)；在有淋巴结转移组的表达均高于无淋巴结转移组(P<0.05)；但与患者年龄、癌变部位无明显相关性(P>0.05)(表2)。

表2 TNFAIP-8、TNFAIP-2阳性表达与乳腺癌生物学特性的关系 n(%)

注：与浸润性癌比较*P<0.05(χ2=6.25,χ2=12.96)；与无淋巴结转移组比较#P<0.05(χ2=4.36,χ2=10.59)

3 讨 论

TNFAIP-2是肿瘤坏死因子诱导蛋白(tumor necrosis factor-α-induced protein，TNFAIP)家族成员之一，主要参与血管生成、细胞分化等[3]。近几年研究发现TNFAIP-2在多种肿瘤组织中均有表达，有学者[4]利用免疫组织化学方法研究TNFAIP-2在鼻咽癌及癌旁正常组织中的表达，发现TNFAIP-2在肿瘤细胞中高表达，采用多变量分析进一步表明，TNFAIP-2是鼻咽癌预后的独立因素。也有学者[5]研究表明MIR-184可以调节胶质瘤中TNFAIP-2的表达，能抑制胶质瘤进展，所以MIR-184可作为胶质瘤治疗的新靶点。本研究中发现TNFAIP-2在乳腺癌中呈高表达，其阳性表达率高于乳腺腺瘤，尤其在浸润性乳腺癌中的阳性表达率高于非浸润性癌，在有淋巴结转移组中的表达高于无淋巴结转移组，说明TNFAIP-2过度表达的肿瘤细胞分化差，有更强的分裂增殖能力，易于发生转移，这与TNFAIP-2在其他肿瘤发生发展过程中的作用类似。

TNFAIP-8具有重要的生物学作用，对细胞凋亡具有负性调节作用，主要通过TNF-α信号通路发挥作用[6]。研究表明TNFAIP-8与肿瘤细胞关系密切，闻强等[7]通过免疫组织化学技术研究发现TNFAIP-8在正常胃黏膜组织无表达，在胃癌组织阳性表达率为26%，表明TNFAIP-8在胃癌发生、发展、分化中均起重要作用，TNFAIP-8可能参与胃癌发生、侵袭、发展及转移。Yang M等[8]运用免疫组织化学和蛋白印迹方法分析了TNFAIP-8在胃腺癌中的表达情况，TNFAIP8过度表达，与浸润深度、淋巴结转移和Lauren分型显著相关，TNFAIP8的表达是肠型胃腺癌独立预后的指标。本研究发现良恶性肿瘤中TNFAIP-8表达情况与以上研究结论较一致,在乳腺癌组织中的表达远高于乳腺腺瘤，表明TNFAIP-8在乳腺肿瘤发生、发展过程中发挥了一定的作用。TNFAIP-8的表达在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组，提示TNFAIP-8与乳腺癌预后有关。

综上，TNFAIP-8、TNFAIP-2在乳腺癌组织中异常表达，在乳腺癌发生和演化中起着重要作用，并与乳腺癌组织学类型及淋巴结转移相关，提示TNFAIP-8、TNFAIP-2可成为评估乳腺癌预后的一个重要指标及肿瘤治疗的新靶点，具体分子机制有待进一步研究阐明。

[1]Xi W,Hu Y,Liu Y,et al.Roles of TNFAIP-2 in hepatitis B virus-induced hepatic inflammation in humans and mice[J].Mol Immunol,2011,48(9-10):1203-1208.

[2]Gus-Brautbar Y,Johnson D,Zhang L,et al.The anti-inflammatory TNFAIP-2 is an inhibitor of the oncogenic Ras[J].Mol Cell，2012,45(5):610-618.

[3]李涛，李敏，姬新颖，等.肿瘤坏死因子α诱导蛋白家族与疾病的关系[J].细胞与分子免疫学杂志，2014，30(4)：433-436.

[4]Chen L C，Chen C C，Liang Y，et al．A novel role for TNFAIP-2:Its correlation with invasion and metastasis in nasopharyngeal carcinoma[J]．Mod Pathol，2011，24(2):175-184.

[5]Cheng Z,Wang H Z,Li X.MicroRNA-184 inhibits cell proliferation and invasion,and specifically targets TNFAIP-2 in glioma[J].J Exp Clin Cancer Res，2015,26;34:27.

[6]蒋丽娜，姚咏明.肿瘤坏死因子α诱导蛋白8家族的研究进展[J].中华损伤与修复杂志：电子版，2011，6(2)：268-278.

[7]闻强，廖洪锋，袁思波，等.TNFAIP-8在胃癌组织中表达的研究和临床意义[J].免疫学杂志，2012，28(2)：181-184.

[8]Yang M,Zhao Q,Wang X,et al.TNFAIP-8 overexpression is associated with lymph node metastasis and poor prognosis in intestinal-type gastric adenocarcinoma[J].Histopathology，2014,65(4):517-526.

[责任编辑：李蓟龙]

河北省科技厅项目(No.13277750D)

黄海琴(1982-)，女，河北蔚县人，主管护师。

张晓丽(1972-)，女，医学硕士，副教授，主要从事肿瘤细胞生物学方面研究。

R 735.2

B

10.3969/j.issn.1673-1492.2015.04.017

来稿日期：2015-06-12