组织学炎症在前列腺癌上皮间质转化中的作用

陈先国，梁朝朝，郝宗耀，周　骏，樊　松，张开平，张阳阳，骆广跃，张礼刚

组织学炎症在前列腺癌上皮间质转化中的作用

陈先国，梁朝朝，郝宗耀，周骏，樊松，张开平，张阳阳，骆广跃，张礼刚

摘要目的探讨组织学慢性前列腺炎在前列腺癌上皮间质转化（EMT）中的作用。方法回顾性分析17例前列腺癌及25例组织学慢性前列腺炎合并前列腺癌患者临床资料，比较两组患者前列腺特异抗原（PSA）、Gleason评分和转移情况，免疫组化法分析上皮型钙黏附蛋白（E-cadherin）、神经型钙粘附蛋白（N-cadherin）、β-链蛋白（β-catenin）、波形蛋白（Vimentin）在两组患者中的表达情况。结果前列腺癌患者的前列腺特异抗原（PSA）、Gleason评分和转移率均明显低于前列腺癌合并组织学炎症患者（P＜0．01）；免疫组化法结果显示前列腺癌组患者E-cadherin和β-catenin的表达显著高于前列腺癌合并组织炎症组患者（P＜0．01）；前列腺癌组患者N-cadherin和Vimentin的表达显著低于前列腺癌合并组织炎症组患者（P＜0．01）。结论组织学慢性前列腺炎对前列腺癌的PSA、Gleason评分和转移率均有显著的影响，促进前列腺癌EMT的发展。

关键词前列腺癌；上皮间质转化；慢性前列腺炎

2015-05-25接收

梁朝朝，男，教授，博士生导师，责任作者，E-mail：liang＿chaozhao＠163．com

前列腺癌是西方男性常见的恶性肿瘤，据2010年美国癌症学会统计，前列腺癌目前在美国发病率居男性恶性肿瘤之首。在我国，随着人们生活习惯的改变、人口的老龄化和前列腺筛查的开展，前列腺癌的发病率也在逐年上升。由于西方国家开展前列腺特异抗原（prostate specific antigen，PSA）筛查，发现前列腺癌主要是在早期，而我们国家由于还没有普及前列腺癌筛查，在临床上主要是晚期前列腺癌。晚期前列腺癌主要是以侵袭转移为特征，因此如何阻止前列腺癌发生发展是临床上面临的主要问题。该研究主要探讨组织学炎症在前列腺癌上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）中的作用，为前列腺癌的治疗提供一定的理论依据。

1　材料与方法

1．1标本及主要试剂选取安徽医科大学第一附属医院病理科2008年～2012年42例前列腺癌组织蜡块，均诊断为前列腺癌。分为前列腺癌合并组织学慢性前列腺炎组（25例）和前列腺癌组（17例）。上皮型钙黏附蛋白（E-cadherin），神经型钙黏附蛋白（N-cadherin）、β-链蛋白（β-catenin）、波形蛋白（Vimentin）兔抗人抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1．2方法采用SP免疫组化法，染色步骤按说明书进行：组织切片脱蜡、梯度酒精脱水；微波炉抗原修复；H2O2去除内源性过氧化物酶活性；滴加兔抗人E-cadherin、N-cadherin、β-catenin和Vimentin抗体（1∶400），37℃恒温孵育1 h；PBS冲洗3次，每次5 min；滴加生物素标记二抗，DAB显色，苏木精复染，中性树胶封固、镜检。

1．3结果判断在高倍镜下，对每张切片随机选择10个视野，凡细胞膜及细胞质出现棕黄色颗粒的细胞计为阳性细胞。将阳性细胞所占百分比进行评分：0分：0%；1分：＜10%；2分：10%～50%；3分：＞50%。将细胞染色强弱进行评分：0分：细胞质／细胞膜上无棕黄色颗粒；1分：细胞质／细胞膜上有淡棕黄色颗粒；2分：细胞质／细胞膜上有染色较清晰的棕黄色颗粒，染色介于强弱之间；3分：细胞质／细胞膜上有大量深棕黄色颗粒。

1．4统计学处理采用SPSS 11．0进行统计学分析，计数资料采用t检验，率的检验采用X2检验。

2　结果

2.1两组患者PSA、Gleason评分和转移情况前列腺癌组患者PSA（23．6±8．7）ng／ml，与前列腺癌合并组织炎症组PSA（41．2±13．5）ng／ml相比较，差异有统计学意义（P＜0．01）；前列腺癌组患者Gleason评分（6．76±0．045）分，与前列腺癌合并组织炎症组Gleason评分（7．12±0．038）相比较，差异有统计学意义（P＜0．01）；前列腺癌组患者发生淋巴结或骨转移有3例，而前列腺癌合并组织炎症组患者发生淋巴结或骨转移有14例，两组患者发生转移率差异有统计学意义（P＜0．01）。见表1。

表1　两组患者　PSA、G leason评分和转移情况

2.2两组患者E-cadherin、β-catenin、N-cadherin、Vimentin的表达免疫组化结果显示前列腺癌组患者E-cadherin和β-catenin的表达显著高于前列腺癌合并组织炎症组患者（P＜0．01）；前列腺癌组患者N-cadherin和Vimentin的表达显著低于前列腺癌合并组织炎症组患者（P＜0．01）。见图1、图2。

3　讨论

大量研究［1-2］认为慢性炎症与肿瘤关系密切，如肝炎与肝癌、结肠炎与结肠癌、慢性胃炎与胃癌等。此外，在流行病学、病理学、病原学等方面也证明慢性前列腺炎促进前列腺癌的发生发展。Daniels etal［3］对患有前列腺炎和前列腺癌的病史患者进行分析，发现慢性前列腺炎症对前列腺癌的发生发展呈明显的正相关性，并且慢性前列腺炎病史是前列腺癌的危险因素，炎症刺激时间越长，患癌症的风险可能越高［4］。观察到伴有腺上皮细胞或基质的萎缩，即为增生性炎性萎缩。研究［5］显示，在慢性前列腺组织中有大量炎性细胞，产生有毒性的活性氧导致组织损伤，长期受到损伤前列腺上皮细胞发生增生性萎缩，主要发生在外周带，这与前列腺癌好发于外周带是一致的，增生性萎缩可能会发展成上皮细胞瘤变，最后转变成前列腺癌。本研究显示前列腺癌合并组织炎症组PSA、Gleason评分及转移率明显高于前列腺癌组，说明炎症促进了前列腺癌的发展。

EMT是上皮细胞在一定诱因下转化为间质细胞的过程中获得其相应的功能，通常伴随着上皮属性E-cadherin和β-catenin的下降，而间质属性如Vimentin和N-cadherin表达升高，以及细胞间紧密连接的丧失，细胞骨架形成，细胞迁移能力增强［6］。随后越来越多的研究［7-8］证实E-cadherin和β-catenin在高危、转移淋巴结及有远处转移的前列腺癌中表达降低，同时伴有间质特性的Vimentin和N-cadherin表达增高［9］，进一步证实了EMT过程的确存在于前列腺癌侵袭转移过程中。

在前列腺慢性炎症刺激下，很多炎症因子如白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-1 （IL-1）表达升高，激活肿瘤坏死因子-β（TNF-β），核转录因子kappa B（NF-κB）和信号转导与转录活化因子（STATs）STAT3等信号通路，进而调节EMT相关转录因子，下调上皮标志物 E-cadherin和β-catenin的表达，上调间质标志物Vimentin和N-cadherin表达。IL-6激活AKT调控细胞的生长、存活和细胞周期，促进肿瘤的发生，维持肿瘤持续的生长状态［10］。主要途 径 包 括 IL-6-JAK-STAT3和IL-6-PI3K-AKT信号通路，STAT3与雄激素受体的表达和作用密切相关，STAT3可以促进STAT3和AR相互作用形成AR-STAT3复合物，增加表皮生长因子诱导的AR转录激活，从而促进前列腺癌EMT［11］。此外，IL-6通过激活AKT调控细胞的生长、存活和细胞周期的进级，促进肿瘤EMT。TNF-α促进肿瘤生长，刺激血管生成，引起DNA损伤。本研究显示前列腺癌组患者E-cadherin和β-catenin的表达显著高于前列腺癌合并组织炎症组患者，前列腺癌组患者N-cadherin和Vimentin的表达显著低于前列腺癌合并组织炎症组患者。这说明了炎症促进了前列腺癌EMT，其原因可能是炎症导致了IL-6、TNF-α 和IL-1表达升高，而这些因子通过不同的信号途径导致了EMT。

参考文献

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The role of histological inflammation in EMT of prostate cancer

Chen Xianguo，Liang Chaozhao，Hao Zongyao，et al
（Dept of Urinary Surgery，The First Affiliated Hospital of AnhuiMedical University，Hefei230022）

AbstractObjectiveTo investigate the role of histologic chronic prostatitis in EMT of prostate cancer．MethodsClinical data of 17 cases of patientswith prostate cancer and 25 cases of histologic chronic prostatitis and prostate cancer patients were retrospectively analyzed，and compared with PSA，Gleason score and metastasis in two groups，the expressions of E-cadherin，N-cadherin，β-cateninandVimentin in the two groups were analyzed by the immunohistochemistry．ResultsPSA，Gleason score andmetastasis in patientswith prostate cancerwere significantly lower than patientswith histologic chronic prostatitiswith prostate cancer（P＜0．01）；immunohistochemistry showed that the expressions of E-cadherin and N-cadherin in patients with prostate cancer were significantly higher than histologic chronic prostatitiswith prostate cancer patients（P＜0．01）；the expression ofβ-cateninand Vimentin in prostate cancer group was significantly lower than the histologicchronic prostatitis with prostate cancer patients（P＜0．01）．ConclusionHistologic chronic prostatitis has a significant impacton the PSA，Gleason score andmetastasis rates of prostate cancer，and promotes the development of prostate cancerEMT．

Key wordsprostate cancer；EMT；chronic prostatitis

中图分类号R 697

文献标志码A

文章编号1000-1492（2015）11-1677-04

基金项目：国家自然科学基金（编号：81470986、81170698、81370856）；教育部博士点基金（编号：20113420110003）；安徽省自然科学基金（编号：1208085MH138）

作者单位：安徽医科大学第一附属医院泌尿外科，合肥230022

作者简介：陈先国，男，博士，主治医师；