商品肉鸡新城疫免疫技术研究

易兴友李中伟刘晓燕吕 瑶赵 明张 芳周 强蒋光辉曹 池贺 勇

（1.开县动物疫病预防控制中心，重庆 405499；2.开县动物卫生监督所，重庆 405499）

商品肉鸡新城疫免疫技术研究

易兴友1李中伟1刘晓燕1吕 瑶1赵 明1张 芳1周 强1蒋光辉2曹 池1贺 勇2

（1.开县动物疫病预防控制中心，重庆 405499；2.开县动物卫生监督所，重庆 405499）

通过对比不同新城疫（ND）疫苗免疫肉鸡后HI抗体的消长规律，确定了鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗（ND-传支二联活疫苗）+鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒二联灭活疫苗（ND-传支二联灭活疫苗）联用是商品肉鸡首选疫苗组合，并制定了ND的最佳免疫程序。以75日龄左右出栏的肉鸡为研究对象得出：7～9日龄首免（ND-传支二联活疫苗+ND-传支二联灭活疫苗），45日龄二免（ND-传支二联活疫苗）。经田间试验和小区应用试验证实，将该ND免疫程序加入常规免疫程序中，其免疫效果基本不受其它疫苗免疫等因素干扰；在不同养鸡场实施该免疫程序，其免疫效果差异不显著，因此建议大面积推广使用。

肉鸡；新城疫；疫苗；免疫程序

鸡新城疫（Neweastle disease，ND）是由新城疫病毒（Neweastle disease virus，NDV）引起鸡的一种急性、烈性、高度接触性传染病，该病在世界各国均有发生，对养鸡业危害极大，因此被世界动物卫生组织（OIE）定为A类传染病，我国也将其列为一类传染病。目前，国内外对ND的防控主要采取免疫预防和发病后的扑杀销毁，其中预防接种疫苗是防控ND的重要措施。我县现用于ND防控疫苗种类较多，如常用的有弱毒苗、灭活苗、单苗和联苗等，而各厂家推荐的ND免疫程序也不相同，其免疫效果参差不齐，无法确定统一的免疫程序，导致ND发生风险极大，将直接影响养鸡业的经济效益。因此，加强鸡ND免疫技术研究，制定科学有效的免疫程序，对确保养鸡业的健康发展具有十分重要的意义。

本研究首先通过测定肉雏鸡ND的母源抗体，确定最佳首免时间；通过不同ND疫苗免疫效果试验，确定适合我县的最佳疫苗种类；通过ND疫苗免疫后的抗体消长规律，制定一套科学的最佳免疫程序；再通过田间试验、小区试验，为大面积推广提供科学依据。

1 母源抗体测定及不同种类新城疫疫苗免疫抗体消长规律研究

1.1 试验材料

选择开县铁桥镇海海生态养殖场1日龄肉雏鸡；鸡新城疫灭活疫苗，鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒二联灭活疫苗，均由普莱柯生物工程股份有限公司生产；鸡新城疫活疫苗，鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗，禽流感、新城疫重组二联活疫苗，鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗，均由哈尔滨维科生物技术开发公司生产；鸡传染性支气管炎活疫苗，乾元洁生物股份有限公司生产；鸡传染性法氏囊病活疫苗，齐鲁动物保健品有限公司生产；重组禽流感病毒灭活疫苗，辽宁益康生物股份有限公司生产；鸡痘活疫苗，杨凌绿方生物工程有限公司生产；新城疫血凝与血凝抑制抗原，青岛易邦生物科技有限公司生产；新城疫阳性血清，哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司生产。

1.2 试验方法

从开县铁桥镇海海生态养殖场新购入的1日龄肉雏鸡中，随机挑选1200只健康状况良好的雏鸡，随机分成A、B、C、D、E、F六个组，A组为ND灭活疫苗+ ND弱毒疫苗（La Sota株）免疫组，B组为ND弱毒疫苗（La Sota）免疫组，C组为ND-传支二联活疫苗（La Sota株+H120株）组，D组为ND-传支二联活疫苗（La Sota株+H120株）+ ND-传支二联灭活疫苗组，E组为禽流感、新城疫重组二联活疫苗（Rlh5-6株）组，F组为ND免疫空白对照组。

该六个组肉雏鸡在同一条件下饲养，分别于3日龄、5日龄、7日龄时随机抽取20只雏鸡血清检测ND母源抗体，首免后每间隔7d采血检测ND抗体水平。根据国家标准《新城疫诊断技术》（GB/ Tl6550-2008）进行判定，当HI抗体水平≤5log2时，判定为免疫效果差；当HI抗体水平＞5log2时，判定为免疫效果良好。当HI抗体水平≤5log2时进行加强免疫。

HI抗体平均效价（log2）=Σxn／Σn（x表示HI抗体效价，n表示该效价的血清份数）。

1.3 结果与分析

通过对A、B、C、D、E、F六个组试验鸡新城疫HI抗体水平的检测，其结果如下：

A组：9日龄首免ND灭活疫苗0.3ml（皮下注射），并用ND弱毒疫苗1.5羽份点眼，免疫后28d（37日龄）抗体滴度为7.2log2，达到峰值；免疫后35d（44日龄）抗体滴度下降至5.4log2，免疫保护维持三周，从整体看抗体滴度整齐，离散度不大。45日龄二免ND活疫苗（两羽份饮水），58日龄时免疫抗体滴度达到8.8log2，抗体较整齐，离散度不大。

B组：9日龄首免ND弱毒疫苗（1.5羽份点眼），免疫后14d（23日龄）抗体滴度为5.8 log2，达到峰值；免疫后35d（44日龄）抗体滴度下降至0.8log2，免疫保护维持不足一周，从整体看抗体滴度不整齐，离散度较大。45日龄二免ND弱毒疫苗（两羽份饮水），58日龄免疫抗体滴度达到7.1log2，抗体不整齐，离散度偏大。

C组：9日龄首免ND-传支二联活疫苗（1.5羽份点眼），免疫后14d（23日龄）抗体滴度为4.2 log2、免疫后28d（37日龄）抗体滴度为4.8log2，皆不具有保护力；免疫后35d（44日龄）抗体滴度下降至2.1log2，从整体看抗体滴度不整齐，离散度大。45日龄二免ND-传支二联活疫苗（两羽份饮水），58日龄抗体滴度达到7.1log2，抗体滴度不整齐，离散度大。

D组：9日龄首免ND-传支二联活疫苗（1.5羽份点眼），并肌注ND-传支二联灭活疫苗0.3ml，免疫后21d（30日龄）抗体滴度为7.4log2，达到峰值；免疫后35d（44日龄）抗体滴度下降至5.6log2，从整体看抗体滴度整齐，离散度不大。45日龄二免ND-传支二联活疫苗（两羽份饮水），58日龄免疫抗体滴度达到8.0log2，抗体较整齐，离散度不大。

E组：9日龄首免禽流感、新城疫重组二联活疫苗（1.5羽份点眼），免疫后14d（23日龄）抗体滴度为5.2 log2，具有免疫保护力；免疫后28d（37日龄）抗体滴度为5.3log2，达到峰值；免疫后35天（44日龄）抗体滴度下降至2.0log2，从整体看抗体滴度不整齐，离散度大。45日龄二免该疫苗（两羽份饮水），58日龄抗体滴度为5.6log2，抗体不整齐，离散度较大。

F组：16日龄监测时，母源抗体滴度为0.8log2，到30日龄时仅为0.4log2，以后不再监测。

从图1可以看出：（1）母源抗体水平较高，到7日龄时还维持有6.0 log2左右，到9日龄时才用不同种ND疫苗对A、B、C、D、E组进行首免。（2）A、D组免疫14天后就产生ND保护抗体，且A、D组分别于免疫后28天、21天达到峰值，该两组产生的抗体水平最高，有效保护维持时间达到三周以上。B、E组免疫后14天产生保护抗体，但抗体滴度下降速度较快，有效保护维持时间仅一周。C组未达到有效保护抗体，且抗体滴度下降速度较快。到45日龄时，A、B、C、D、E组各采用相应组的弱毒苗（或活疫苗）两羽份量饮水补免，A、D组产生ND免疫抗体优于B、C、E组，整体看A、D组抗体滴度整齐度比B、C、E组好，离散度较B、C、E组小。

1.4 结论

从试验结果可以看出，A、D组能诱导机体产生较好的免疫应答，免疫后ND抗体滴度显著提高，上升速度快，维持时间长（三周以上），鸡群整体抗体水平的整齐度也有较大改善。因此，确定A、D组为最佳使用疫苗组合，且D组更优于A组，因后者免疫ND同时兼顾到传染性支气管炎病毒免疫，且对ND免疫效果无明显影响。根据本试验母源抗体和免疫抗体消长规律综合分析，确定了ND最佳免疫程序（7-9日龄首免ND-传支二联活疫苗+ ND-传支二联灭活疫苗→45日龄二免ND-传支二联活疫苗）。

2 ND免疫程序田间试验

根据确定的最佳ND免疫程序，在开县铁桥镇海海生态养殖场进行田间试验。其中免疫试验组只接种ND-传支二联苗；田间试验组除接种ND-传支二联苗外，还进行其他常规疫苗免疫。田间试验的免疫程序为：1日龄，颈部皮下注射马立克1羽份；3日龄，鸡传染性支气管炎活疫苗1羽份滴鼻或点眼；7日龄，1.5羽份新支H120点眼，皮下注射新支二联灭活苗0.3ml；12日龄，皮下注射禽流感病毒H5N1灭活苗0.3ml；14日龄，法氏囊活疫苗两羽份滴口；24日龄，两羽份法氏囊活疫苗饮水；36日龄，胸部肌肉注射禽流感病毒H5N1灭活苗0.5ml，刺种鸡痘1羽份；45日龄，新支H52两羽份饮水。首先于6日龄测定母源抗体，于7日龄首免后每隔7d，每组随机挑选20只试验鸡采血检测HI抗体水平。

2.1 结果

从两组试验鸡新城疫HI抗体检测结果可以看出，于7日龄、45日龄免疫后均能快速产生高水平的有效保护抗体，整体看抗体较整齐，离散度不大；45日龄二免后免疫抗体到56日龄达到峰值。63日龄之前按该免疫程序，免疫试验组与田间试验组ND抗体消长规律相似（P＜0.05）。说明免疫试验组与田间试验组具有相近的免疫效果。

2.2 结论

该免疫程序加入常规免疫程序中，其免疫效果不受其他疫苗影响，免疫保护力强，为大面积推广奠定了基础。

3 ND免疫程序小区应用试验

3.1 试验方法

分别在开县特驱家禽养殖有限公司、开县铁桥镇海海生态养殖场、临江镇深水河李某养鸡场、再刚养殖场、赵桑养殖场等5个养鸡场进行最佳ND免疫程序的小区域应用试验。每个场各选取2000只健康肉鸡苗，均在各自的饲养管理条件下饲养，并都按田间试验的免疫程序进行免疫。首免后14d，每个场随机抽取20只试验鸡血清，检测HI抗体水平，以后每隔7d采血1次，共采血7次。

3.2 试验结果

从5个养鸡场试验鸡新城疫HI抗体的检测结果可以看出，在试验期内免疫试验鸡的抗体水平均达5log2以上，均可获得较好的免疫力，该5个鸡场都按田间试验的免疫程序进行免疫，新城疫HI抗体消长规律基本一致（P＜0.05）。

3.3 结论

本研究通过对比ND疫苗免疫肉鸡后HI抗体的消长规律，确立了ND-传支二联活疫苗+ND-传支二联灭活苗联用是商品肉鸡首选的疫苗组合，并制定了ND最佳免疫程序。对75日龄左右出栏的肉鸡：7～9日龄首免[建议选用鸡新城疫（La Sota株）、传染性支气管炎病毒（M41株）二联灭活疫苗（颈部皮下注射0.3ml）+鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗（La Sota株+H120株）（1.5羽份量点眼）]，45日龄二免[建议选用鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗（La Sota株+H52株）（两羽份量饮水）]。经田间试验和小区应用试验证实，该ND免疫程序加入常规免疫程序中，其免疫效果基本不受其他疫苗免疫等因素干扰；在不同肉鸡养殖场使用该免疫程序，其免疫效果差异不显著。因此，建议在我县大面积推广应用。

[1] 甄志刚，张汉成，丁壮.商品蛋鸡新城疫免疫技术研究[J].广西农业科学，2010，41（11）：1229-1232.

[2] 熊东艳，秦玉成，葛忠源，等.平谷区蛋鸡禽流感、新城疫免疫效果监测及其免疫程序探索[J].家禽科学，2013，（12）：38-42.

易兴友（1965—），男，高级兽医师，重庆市开县动物疫病预防控制中心工作，主要研究方向为家禽健康养殖技术研究及应用。