颈动脉血管重构患者核因子κB的变化及意义

颈动脉血管重构患者核因子κB的变化及意义

郑舒展李郁1罗兴林

(泸州医学院附属医院心内科，四川泸州646000)

摘要〔〕目的探讨颈动脉血管重构患者核因子(NF)-κB的变化及意义。方法对老年体检人员血管行超声检测，选择38例具有颈动脉硬化血管重构者为研究对象(颈动脉重构组)，以同龄颈动脉正常的老年人36例为对照组。常规检测心电图、胸片、血液生化等指标，同时用免疫组化方法检测外周血单核细胞NF-κB活化表达率。用直线回归分析法探讨颈动脉血管重构与NF-κB活化率的相关性。结果①颈动脉重构组与对照组比较，颈动脉内径较对照组增宽，内膜-中层厚度(IMT)及斑块积分显著增加。②颈动脉重构组外周血单核细胞NF-κB活化率显著高于对照组(P<0.05)。③颈动脉重构组NF-κB水平与颈动脉IMT、颈动脉斑块积分呈显著正相关。结论颈动脉重构与NF-κB活化率密切相关，NF-κB可能参与了颈动脉重构及粥样斑块形成的过程。

关键词〔〕血管重构；核因子-κB

中图分类号〔〕R543.5〔文献标识码〕A〔

基金项目：四川省应用基础研究项目(04JYOL9-019-2)

通讯作者：罗兴林(1950-)，男，教授，硕士生导师，主要从事老年心血管疾病研究。

1绵阳市中心医院心内科

第一作者：郑舒展(1982-)，女，硕士，主治医师，主要从事老年心血管疾病研究。

Change and clinical significance of nuclear factor-κB in elderly hypertensive patients with carotid aterial remodeling

ZHENG Shu-Zhan,LI Yu,LUO Xing-Lin.

Department of Cardiology,Affiliated Hospital of Luzhou Medical College,Luzhou 646000,Sichuan,China

Abstract【】ObjectiveTo investigate the correlation of nuclear factor-κB(NF-κB) with carotid artery remodeling in elderly patients.Methods38 elderly patients with carotid artery remodeling (aged 66.32±6.10 years old) were chose into experimental group and 36 healthy persons into control group (aged 64.36±6.23 years old).Circumference blood serum of all persons were gathered in early moring and serum peripheral blood mononuclear cells were extracted,then NF-κB activation expression rate was detected by immunohistochemical method.The common carotid artery (CCA) intima-media thickness (IMT),carotid diameter,carotid artery blood flow velocity and carotid artery plaque formation were detected by vascular ultrasound.Carotid plaque score was obtained according to the crouse method.ResultsCompared to the control group,the diameter of CCA in experiment group was increased,the systolic and diastolic peak velocity were decreased,the IMT was thicker,and the plaque score was higher (P<0.05).The NF-κB level of experiment group was significantly higher than that of control group (P<0.05).There was a positive correlation among NF-κB activation expression rate and vascular remodeling indicators,which including carotid artery diameter,IMT and vascular wall/cavity ratio,carotid artery plaque score,carotid artery resistance index and pulsatility index.ConclusionsNF-κB might involved in the process of carotid atery remodeling in elderly patient.

【Key words】Carotid artery remodeling; Nuclear factor-κB

研究证实炎症参与了动脉硬化血管重构的发生发展。核因子(NF)-κB是一种广泛存在于真核细胞内的非常重要的炎症、免疫调控因子，是调节血管平滑肌细胞存活和增殖的转录因子，参与血管炎症反应〔1〕，但对血管重构影响的报告较少，本研究通过检测颈动脉重构病人外周血单核细胞NF-κB的表达，探讨NF-κB与颈动脉血管重构的相关性。

1资料与方法

1.1 研究对象颈动脉重构组：近年我院对部分老年体检人员进行了颈部血管超声检测，选取2011年9月至2012年9月具有颈动脉重构的患者38例〔平均年龄(66.32±6.10)岁〕为研究对象，其中高血压16例，排除急性冠脉综合征、高脂血症、糖尿病、脑卒中、恶性肿瘤、肝肾功能不全、心力衰竭及肺部感染的患者。对照组：选取同期在我院行体检的36例老年人，经常规体格检查、有关实验室和超声心动图检查未发现心、肺、肝、肾等疾患，血管超声检测，无明显动脉硬化征象者作为对照组，年龄60～72岁〔平均(64.36±6.23)岁〕，其中高血压14例。

1.2实验方法

1.2.1一般情况记录两组对象年龄、性别、身高、体重及吸烟史，测量入选病人的血压、身高、体重，计算体重指数(BMI)，BMI≥25 kg/m2者为肥胖。

1.2.2NF-κB p65蛋白表达检测于清晨采集两组空腹外周血2 ml,采用FicoⅡ密度梯度离心法提取单核细胞，制作单核细胞涂片放入-40℃冰箱待用。兔抗人NF-κB-p65(V248)抗体购自ABZOOM公司，操作按免疫细胞化学染色试剂盒说明书进行。结果判定：显微镜下细胞质和细胞核均出现棕黄色颗粒为NF-κB p65亚单位阳性表达。相差显微镜下计数同一张盖玻片，计算500个细胞中黄染阳性细胞数所占百分比。

1.2.3颈动脉超声检测采用Philips iE33、L11-3 超声诊断仪，探头频率2.5~5.0 MHz。检查前嘱患者休息5～10 min，取平卧位，充分暴露颈部。在检查时，首先自颈动脉起始处作纵向扫查显示颈动脉，然后沿血管走行做横切扫查，观察动脉内膜有无增厚、斑块部位、大小和回声特点，所有指标均测量左右两侧，取平均值。①测量颈总动脉内膜-中层厚度(IMT)：选取颈总动脉远端距分叉处1 cm处的图像，连续测量10 mm,取平均值得到颈动脉IMT，测量时注意避开粥样斑块。正常的颈动脉管壁呈典型的“双线征”，即两条平行的强回声带被一低回声或无回声带所分离，两线间的距离即为IMT。②测量颈动脉粥样斑块：采用Crouse积分法，将同侧颈动脉各个孤立性动脉粥样硬化斑块的最大厚度相加，得到该侧颈动脉斑块积分(CPS)，将双侧颈动脉斑块积分相加为其斑块总积分。③测量动脉管径：血管内径即测量从内膜内表面至对侧内膜内表面的距离，以心脏收缩期的血管径为准。颈总动脉(CCA)内径于CCA分叉前2 cm处测量。 ④ 血流参数测量：流速曲线显示后，连续观察20~30个周期，调整最佳取样门大小，显示最清晰连续流速曲线后，冻结图像并测量颈总动脉阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、颈内动脉与颈总动脉收缩期峰值流速之比(Vica/Vcca)。

1.3统计学方法采用SPSS13.0软件进行χ2检验、t检验及方差分析。相关性分析作直线回归分析。

2结果

2.1颈动脉重构组与对照组一般资料比较 两组年龄、性别、BMI、血压、空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白(Apo)A水平无显著差异(P>0.05)，见表1。

表1　两组人群基本特征分布 ± s)

2.2颈动脉重构组与对照组颈动脉超声检测结果颈动脉重构组与对照组比较，颈总动脉内径(Dd)较对照组增宽，血流收缩、期峰值流速(SPV)、舒张期峰值流速(EDV)减慢，血管RI增大。颈动脉IMT及斑块积分显著增加(P<0.05)。见表2。

2.3不同组别血单核细胞NF-κB活化率比较颈动脉重构组外周血单核细胞NF-κB活化率(23.51±5.16)%显著高于对照组(15.21±4.68)%(P<0.05)，见图1。

2.4颈动脉重构组血清单核细胞NF-κB活化率与颈动脉参数的相关性颈动脉重构组患者Dd(r=0.580)、IMT(r=0.601)、血管壁/腔比值(r=0.615)、CPS(r=0.695)与血清单核细胞与对照组比较：1)P<0.05NF-κB活化率均呈显著正相关(均P<0.01)。

表2　两组患者颈总动脉结构与功能指标比较 ± s)

对照组

颈动脉重构组

3讨论

血管重构是指血管为适应体内外环境的变化而发生的形态结构和功能的动态反应过程，主要表现为大中动脉IMT的增厚和粥样硬化斑块的形成。颈动脉是粥样硬化的早期好发部位，其位置表浅，易于探查，对早期诊断动脉粥样硬化，防治心血管事件具有重要的临床意义。本研究显示颈动脉重构组患者符合动脉硬化血管重构的病理改变〔1〕。

研究证明，动脉硬化病变常存在炎症反应，而这种炎症反应会促进血管重构〔2〕。NF-κB是一种非常重要的调节细胞存活和增殖的转录因子，大多数由p50和p65组成同源或异源性二聚体，存在于血管平滑肌细胞、单核细胞以及内皮细胞中〔3〕。一般情况下，NF-κB的p65亚基与κB抑制蛋白(IKB)单体结合形成的三聚体复合物以失活状态存在，不具有调节基因转录的能力〔4〕。当细胞受到上游刺激因子(肿瘤坏死因子、白细胞介素-1、干扰素等)的作用时， IKB分子磷酸化，NF-κB与IκB三聚体解离释放NF-κB激活NF-κB信号途径。NF-κB移位至细胞核内，与核内靶基因结合，启动相关基因的转录。NF-κB活化后可通过多种途径影响机体免疫应答、炎症反应、细胞生长和凋亡等。目前许多实验已证实NF-κB的活化参与了动脉粥样硬化过程〔5〕。首先，在动脉粥样硬化组织内的巨噬细胞、内皮细胞和平滑肌细胞存在明显的NF-κB激活,且可见许多由NF-κB调控的基因表达活性增强。活化的NF-κB可通过调控例如血管细胞黏附分子-1、单核细胞趋化蛋白-1以及肿瘤坏死因子等基因的表达，促使炎症因子向血管内皮的聚集，刺激血管平滑肌细胞增殖和迁移〔6〕；其次，通过抑制内皮细胞NF-κB p65基因的活化或者过表达κB抑制蛋白，可以抑制黏附分子的产生,减少巨噬细胞的聚集〔7〕，此外，调节细胞外基质降解的金属基质蛋白酶(MMPs)基因启动子近端调控区有特异性的NF-κB结合位点，去除NF-κB结合位点后可抑制各种刺激诱发MMP升高〔8〕；抑制NF-κB活性后MMPs表达明显减少。因此，NF-κB参与了动脉粥样硬化的发生和发展〔9〕。

通过排除炎症状态以及高血脂高血糖等致炎症因素对NF-κB的影响，本研究显示，NF-κB活化可能参与颈血管重构的过程，NF-κB在动脉粥样硬化斑块形成方面有着其不可忽视的作用，它可能是促进血管重构的高危因子。

4参考文献

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〔2013-09-15修回〕

(编辑赵慧玲/曹梦园)