玉米紫色植株花色苷色素对去卵巢大鼠血清和肝脏胆固醇水平的影响

玉米紫色植株花色苷色素对去卵巢大鼠血清和肝脏胆固醇水平的影响

王晓红周波吴勃张卓郭连莹徐超

(沈阳医学院，辽宁沈阳110034)

摘要〔〕目的观察玉米紫色植株花色苷色素(MPPP)对去卵巢大鼠胆固醇水平的影响。方法将Wistar雌性大鼠分为假手术(SHAM)组、去卵巢 (OVX)组、OVX+低、中、高剂量MPPP组,14 w后测定血清和肝脏中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)。结果去卵巢各组TC均高于SHAM组(P<0.05)。低、中剂量MPPP组血清TC明显低于OVX组(P<0.05)。低剂量MPPP组肝脏TC明显低于OVX组(P<0.05)。去卵巢各组血清和肝脏MDA均高于SHAM组(P<0.05)，低剂量MPPP组肝脏MDA明显低于OVX组(P<0.05)，所有剂量MPPP组血清MDA均显著低于OVX组(P<0.05)。低剂量MPPP组血清SOD显著高于OVX组(P<0.01)，各组间肝脏SOD差异无统计学意义。结论MPPP能够降低去卵巢大鼠血清和肝脏的胆固醇。

关键词〔〕去卵巢；胆固醇；抗氧化；花色苷

中图分类号〔〕R153.3 〔文献标识码〕A〔

基金项目：辽宁省教育厅科研

通讯作者：周波(1963-)，女，教授，博士，硕士生导师，主要从事营养与慢性病预防研究。

第一作者：王晓红(1963-)，女，主任技师，硕士，主要从事营养与慢性病预防研究。

绝经后妇女因雌激素水平显著降低，致使胆固醇代谢紊乱，心脑血管疾病明显增加。研究表明〔1〕花色苷是较强的天然抗氧化剂，具有清除自由基、降低胆固醇，抗炎等减少氧化应激损伤的作用。但花色苷对雌激素缺乏引起胆固醇代谢紊乱的作用尚未见报道。玉米紫色植株花色苷色素(MPPP)是从新品种玉米的紫色植株中提取的天然色素，其中矢车菊素-3-葡萄糖苷含量为45.96%，具有无毒、无异味、安全、色彩鲜艳、性质稳定的特点和抗脂质过氧化等生理活性〔2~4〕。本文用去卵巢大鼠模型探讨玉米紫色植株色素对血清和肝脏中胆固醇及抗氧化能力的影响。

1材料和方法

1.1 材料Wistar大鼠，体重(220±20) g，雌性，3月龄，40只，北京维通利华实验动物科技有限公司提供，合格证书号为:SCXX(京)2009-0001。MPPP 沈阳医学院制备。超氧化物歧化酶(SOD)、 丙二醛(MDA)和考马斯亮蓝测定试剂盒购于南京建成生物工程研究所；总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和甘油三酯(TG)试剂盒购于北京中生北控生物科技股份有限公司。

1.2 MPPP制备60%的乙醇溶液(pH3，50℃～60℃)将玉米紫色苞叶浸泡4 h,经分离、浓缩、精制、喷雾干燥制成粉状物。

1.3 动物造模实验动物适应性喂养1 w后按体重随机分为假手术组(SHAM ，8只)和手术组(32只)。腹腔注射2%戊巴比妥钠(0.15 ml/100 g)溶液，麻醉后手术组切除双侧卵巢，假手术组仅切除卵巢周围相同质量脂肪。术后腹腔注射6万U的青霉素，1次/d，连续3 d。处死动物时发现H-MPPP 组中1只大鼠1侧卵巢未完全切除，1只大鼠腹主动脉采血失败，最终纳入结果分析的数量为38只。

1.4 分组与给药卵巢切除1 w后将手术组随机分为4组，每组8只，即模型对照组(OVX)、MPPP高剂量组(1 000 mg/kg，H-MPPP)、中剂量组(500 mg/kg,M-MPPP)和(250 mg/kg,L-MPPP)低剂量组。用蒸馏水将MPPP配制相应高中低浓度溶液，按10 ml/kg给大鼠灌胃,SHAM 和OVX组灌等量蒸馏水，每天一次，连续14 w。饲养条件：每笼2只大鼠，自由进食蒸馏水和标准饲料。实验室自然光照，相对湿度(50±20)%，温度(24±2)℃。

1.5 测定指标体重：实验期间每周称体重1次，连续14 w。脏器系数：大鼠处死后，取子宫和肝脏观察后称重并按照如下公式计算脏器系数。脏器系数=脏器质量/体质量×100%。生化指标：各组大鼠腹主动脉采血分离血清。 处死大鼠后取肝脏，在相同部位切下肝脏0.1 g，放入1.5 ml离心管中，加入1 ml异丙醇，在冰水中制备肝脏匀浆,4℃下4 000 r/min离心10 min,取上清液为肝组织液。用7170A型自动生化分析仪(日本)测量血清和肝脏组织液中的TC、LDL-C、HDL-C和TG。批内、批间变异系数均<10%。按试剂盒说明书操作测定血清和肝脏中MDA、SOD和蛋白，批内、批间变异系数均<5%。

1.6 统计学方法用SPSS16.0 软件进行t检验和方差分析。

2结果

2.1 体重及脏器系数去卵巢后的各组大鼠体重显著高于SHAM组(P<0.01)，MPPP各剂量组与OVX组间体重差异无统计学意义。去卵巢后各组大鼠子宫脏器系数和肝脏脏器系数显著低于SHAM组 (P<0.01)，MPPP各剂量组与OVX组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

2.2 血清和肝脏胆固醇血清胆固醇：OVX组TC和HDL-C均显著高于SHAM组(P<0.05),M-MPPP和L-MPPP组 TC和HDL-C 均显著低于OVX组(P<0.05)。各组TG 和LDL-C差异均无统计学意义(P>0.05)，见表2。肝脏胆固醇：OVX组TC和TG均显著高于SHAM组(P<0.05),L-MPPP组 TC和TG均显著低于OVX组(P<0.05)。各组HDL-C和LDL-C差异均无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表1　 各组大鼠的体重及脏器系数变化 ± s)

与SHAM组比较：1)P<0.05

表2　MPPP对去卵巢大鼠血清胆固醇的影响

与SHAM组比较：1)P<0.05；与OVX组比较：2)P<0.05；下表同

表3　MPPP对大鼠肝脏胆固醇的影响

2.4 MPPP对大鼠血清和肝脏SOD和MDA的影响与SHAM组比较，OVX组血清和肝脏MDA均显著升高(P<0.05)；OVX组血清和肝脏SOD降低，但差异没有统计学意义(P>0.05)。MPPP各剂量组血清MDA均显著低于OVX组(P<0.05)，与SHAM组间差异没有统计学意义(P>0.05)。MPPP各剂量组血清SOD均高于OVX组，但仅L-MPPP组具有统计学意义(P<0.05)。L-MPPP组肝脏MDA显著低于OVX组(P<0.05)。肝脏SOD各组间差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4　MPPP对去卵巢大鼠血清和肝脏

3讨论

本实验结果显示OVX组大鼠雌激素水平显著下降，造模成功。补充MPPP后子宫脏器系数无显著差异，说明该MPPP没有雌激素样作用。本实验中OVX各组与SHAM组比较，体重明显增加，与相关研究的结果相同〔5，6〕。可见体内雌激素水平下降将导致体重增加，而补充MPPP不能改善体重增加的趋势。大鼠去卵巢后由于体内雌激素降低导致血脂代谢紊乱，但血脂各指标变化不完全一致。朱家恩〔7〕的研究结果显示去卵巢后大鼠的血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平与SHAM组比均显著升高。而Villabanca等〔8〕报道去卵巢大鼠仅TC和TG增加。本实验去卵巢大鼠血清和肝脏TC增加，血清中HDL-C增加，肝脏中TG增加，说明切除卵巢后动物血脂代谢紊乱。代谢综合征的人群和高脂血症或高胆固醇动物模型实验研究均表明花色苷具有改善血脂，降低胆固醇的作用〔9~14〕。本实验结果显示补充低和中剂量的MPPP可降低去卵巢大鼠血清和肝脏的TC水平，说明该花色苷色素能够降低由雌激素缺乏导致的胆固醇升高。

本实验结果显示MPPP没有雌激素样作用，其降低胆固醇的作用可能主要是与其成分中矢车菊素-3-葡萄糖苷有关。张名位等〔15〕报道矢车菊素结构中其B环上的4’，5′位有两个相邻的酚羟基，因为邻位酚羟基形成分子内氢键，有利于苯氧自由基的稳定，且邻二酚羟基的自由基可形成邻苯醒型结构的共振作用而稳定，从而大大提高其抗氧化性。McCune等〔16〕综合分析草莓花色苷的研究文章表明其降胆固醇的作用主要是其抗氧化功能。周波等〔3〕报道MPPP具有抗氧化和抗脂过氧化的作用。本实验结果显示去卵巢大鼠血清和肝脏MDA显著增加，补充低中剂量MPPP能够减低其MDA，可见MPPP的抗氧化作用是其降低胆固醇作用的机制之一。

本实验结果提示，MPPP可以作为预防更年期妇女脂代谢紊乱的保健食品基料进一步开发利用。

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〔2013-12-20修回〕

(编辑赵慧玲/曹梦园)