缺氧诱导因子2α在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义

缺氧诱导因子2α在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义

卢艳红 王 岩 聂明豪 李秀荣 倪林颖

目的研究分析宫颈鳞癌组织的缺氧诱导因子2α（HIF-2α）表达和意义。方法根据我院2006年3月～2012年3月接收的208例患者进行分析研究，有102例宫颈鳞癌组织、66例CIN组织、40例正常宫颈组织，对这些组织的HIF-2α mRNA的表达情况进行比较研究。结果正常组织、宫颈鳞癌组织、CIN组织的HIF-2α mRNA的表达为0、68.6%、22.7%，差异有统计学意义（P＜0.05）。HIF-2αmRNA在伴淋巴结转移宫颈癌组织中的阳性表达率高于无淋巴结转移宫颈癌组织，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论宫颈鳞癌的发生和病变过程与HIF-2α mRNA在宫颈鳞癌组织中表达上调有关联性。

缺氧诱导因子2α；宫颈鳞癌；原位杂交

宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤疾病，对女性的健康和生命产生了威胁［1］。宫颈鳞癌是比较常见的类型，本文主要是通过原位杂交技术对宫颈鳞癌组织、正常组织和宫颈上皮内瘤病变（CIN）组织的缺氧诱导因子2α（Hypoxia-Inducible Factor 2α，HIF-2α）mRNA的表达情况进行分析研究，希望能够了解其在患者宫颈鳞癌病变过程中作用，现进行以下报道。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2006年3月～2012年3月我院对208例患者的宫颈组织蜡块进行了研究，患者年龄34～65岁，平均年龄（45.8±3.5）岁。共有102例宫颈鳞癌组织、66例CIN组织，40例正常组织。

1.2 主要试剂及试剂盒

DAB显色剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司，人原位杂交检测试剂盒（MK2210h）购自武汉博士德生物工程有限公司，5’端地高辛标记的HIF-2α寡核苷酸探针序列：5’-GAAGC TGACC AGCAG ATGGA CAACT TGTAC CTGAA-3’，由武汉博士德生物工程有限公司合成［2］。

1.3 ISH染色

石蜡切片经新鲜配置的二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水后，用新鲜配制的3% H2O2室温处理5～10 min，以灭活内源性过氧化物酶，切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶，37℃消化20 min，消化标本DNA结合蛋白，1%多聚甲醛/0.1 MPBS（pH 7.2～7.6），室温固定10 min，每张切片加20 μl不含探针的预杂交液，恒温箱40℃保存4 h，每张切片加20 μl含探针的杂交液，恒温箱40℃杂交过夜，杂交后洗涤，滴加封闭液，滴加生物素化鼠抗地高辛，滴加SABC，滴加生物素化过氧化物酶，PBS清洗，DAB显色，苏木素复染，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

1.4 ISH结果判定

HIF-2α阳性信号为棕黄色颗粒，定位于细胞质［3］，使用原位杂交的阳性计算方法。

1.5 统计学方法

采用SPSS 16.0统计学软件对数据进行处理，计数资料采用（%）表示，采用χ2检验，计量资料采用（均数±标准差）表示，采用t检验。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

正常组织、宫颈鳞癌组织、CIN组织的HIF-2αmRNA的表达分别为0、68.6%、22.7%，数据对比，差异具有统计学意义（P＜0.05）。HIF-2αmRNA在伴淋巴结转移宫颈癌组织中的阳性表达率为94.4%，无淋巴结转移宫颈癌组织中的阳性表达率为63.1%。HIF-2αmRNA在伴淋巴结转移宫颈癌组织中的阳性表达率高于无淋巴结转移宫颈癌组织，差异具有统计学意义（P＜0.05）；患者在Ⅰ、Ⅱ期阳性表达率为49.4%，患者在Ⅲ、Ⅳ期阳性表达率为88.0%，患者的分期越晚，该阳性表达率越高。患者浸润深度在浅肌层的阳性表达率59.5%，患者浸润深度在深肌层及以上的阳性表达率71.7%，HIF-2αmRNA阳性表达率和患者的年龄、浸润深度并没有联系（P＞0.05）。

3 讨论

HIF在人、哺乳动物体内广泛存在，它是转录因子［4］，研究显示［5］，缺氧诱导因子有3种：HIF-1、HIF-2、HIF-3，其中HIF-2是异源二聚体蛋白质复合物。多数恶性肿瘤患者的HIF-2α表达较高，可认为HIF-2α属于癌基因的一种［6-8］。本次研究结果显示，正常组织、宫颈鳞癌组织、CIN组织的HIF-2α mRNA的表达为0、68.6%、22.7%，差异有统计学意义（P＜0.05）。HIF-2αmRNA在伴淋巴结转移宫颈癌组织中的阳性表达率比较高；患者的分期越晚，该阳性表达率越高。HIF-2α mRNA阳性表达率和患者的年龄、浸润深度并没有联系（P＞0.05），表明HIF-2α的表达和患者的宫颈鳞癌发病有直接联系。MMP可以促肿瘤侵袭转移，和患者的年龄、分期、浸润等无关。该结果和李晓晶［8］的研究结论相符合，说明宫颈鳞癌在发病和发展的过程中受到了HIF-2α的影响。在侵袭和转移的时候有所参与，临床中可以将其作为新的分子治疗靶点。

总之，临床中的宫颈鳞癌发病和发展和HIF-2α高表达有很大的关联性，对HIF-2α的表达水平进行检测，能够为临床中的早期诊断以及治疗提供参考，在该疾病的治疗作用仍然需要更多的研究分析，通过对HIF-2α的研究，能够让我们以后治疗宫颈鳞癌过程中提供更多的指导价值。

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The Expression and Significance of Hypoxia Inducible Factor 2αin Cervical Squamous Cell Carcinoma

LU Yanhong WANG Yan NIE Minghao LI Xiurong NI Linying Department of Pathology，Heilongjiang Provincial Hospital，Harbin Heilongjiang 150036，China

ObjectiveTo study the expression and significance of hypoxia inducible factor 2α（HIF-2α）in cervical squamous cell carcinoma.MethodsTo analyze and Research on 208 cases in our hospital from March 2006 to March 2012 to receive patients，102 cases of cervical squamous cell carcinoma，for 66 cases of CIN tissues，40 cases of normal cervical tissue，the expression of HIF-2α mRNA for the organization of the comparative study.ResultsThe expression of HIF-2α in normal tissues，cervical squamous cell carcinoma tissues and mRNA tissues was 0，68.6%，22.7%，and the results were statistically significant（P＜ 0.05）. The positive expression rate of HIF-2αmRNA in cervical cancer with lymph node metastasis was higher than that without lymph node metastasis，and the difference was statistically significant（P＜ 0.05）.ConclusionThe incidence of cervical squamous cell carcinoma and the process of mRNA αHIF-2 expression in cervical squamous cell carcinoma tissue is associated with up regulation.

Hypoxia inducible factor 2α，Cervical squamous cell carcinoma，Hybridization in situ

R737.33

A

1674-9316（2016）24-0171-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2016.24.100

黑龙江省医院病理科，黑龙江 哈尔滨 150036