藏药松生等的质量控制研究

巴桑卓嘎　阿萍

【摘 要】 目的：建立藏药材松生等的质量标准。方法：采用显微鉴别、薄层鉴别，并参照2010年版《中国药典》附录对松生等药材的水分、灰分、酸不溶性灰分及醇溶性浸出物进行测定。结果：不同产地的藏药材松生等显微特征一致，薄层色谱重现性好、专属性强，水份为505%～755%，总灰分为105%～777%，酸不溶性灰分为008%～061%，醇溶性浸出物的结果为541%～1721%。结论：该方法可作为控制传统藏药材松生等的质量标准。

【关键词】 松生等；藏药；山柰素；显微鉴别；薄层鉴别

【中图分类号】R291408 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2015）22-0001-03

Study on the Quality Standard of Tibetan Medicine Lignum rhamnellae

BASangzhuoga A Ping

Tibet Institute for Food and Drug Control， Lhasa 850000， China

Abstract：Objective In order to establish the quality standards of Tibetan medicine Lignum rhamnellae.Methods Microscope was used to observe the plant organization structure and microscopic characteristics of powder； TLC was applied to identify the effective components qualitatively； The tests of water content，ash and ethanol- soluble extractives of Lignum rhamnellae were carried out according to the methods recordedin appendix of Chinese Pharmacopeia （2010 edition，volume 1）.Results The microscopic and TLC identification methods were specific and well repeatable. The moistures in Lignum rhamnellae was 505%～755%， with the total ash within 105%～777%， the ethanol extract was 541%～1721% by hot soak. Conclusion The methods could be used for the quality control of Tibetan medicine Lignum rhamnellae.

Keywords：Lignum rhamnellae； Tibetan Medicine； Kaempferide； The Microscopic Identification； TLC

松生等为鼠李科植物西藏猫乳Rhamnella gilgitica Mansf. et Melch. 或小叶鼠李Rhamnus parvifolia Bunge的干燥木材，为藏医药习用药材，其标准收载于1995版部颁《药品标准·藏药》第一册[1]。传统藏医药理论认为松生等具有凉血消肿的功效，临床用于类风湿性关节炎，黄水病，高山多血病[2-6]。目前，松生等药材的现行标准简单，只有性状和显微鉴别，研究采用显微鉴别、薄层色谱鉴别，并进行水分、总灰分和酸不溶性灰分的检查、醇溶性浸出物的测定，对10批不同产地的松生等药材样品进行了检测，为松生等药材及其成方制剂的质量控制提供了依据。

1 仪器与材料

11 仪器 OLYMPUS BX51型光学显微镜；KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AB204-S电子天平（梅特勒-托利多（上海）仪器公司）；HH系列恒温水浴锅（江苏金坛中大仪器厂）；ZF-2型三用紫外仪（上海市安亭电子仪器厂）；DHG-9240A型电热鼓风干燥箱（上海一恒科技仪器有限公司）；SX5-12型箱式电阻炉（黄骅市卸甲综合电器厂）。

12 材料 山柰素对照品（批号：110861-200808，中国药品生物检定研究院）提供。10批松生等药材均来自西藏林芝、昌都及云南迪庆州，并经西藏自治区藏医学院专家鉴定均为藏医习用松生等药材（见表1）。薄层硅胶G板（青岛海洋化工厂分厂）。水为超纯水，试剂均为分析纯。

2 方法和结果

2.1 性状鉴别[1-5]

2.1.1 西藏猫乳 本品呈圆柱形或不规则的条块状，长60～70cm，宽2～5cm。表面棕黄色，间有黑褐色，有顺直纹理及刀削痕迹。质坚硬，横切面可见年轮，有时可见深棕色髓部。气微，味淡。如图1所示。

2.1.2 小叶鼠李 本品呈圆柱形或分叉状，长10～15cm，宽1.5～3cm，表面黄褐色至褐色，具纵皱纹，其间分布较多黄棕色横长皮孔和类圆形实起的枝痕个，并着生有黑棕色枝刺。质坚硬，不易折断，横断面年轮明显，皮部薄，淡黄棕色至红棕色，木部黄白色至黄棕色，纵切面纤维性极强，气微，味淡。如图2所示。

图1 西藏猫乳药材图 图2 小叶鼠李药材图

2.2 显微鉴别

2.2.1 西藏猫乳粉末 粉末红棕色。纤维众多成束，主为纤维管胞，胞腔内含草酸钙方晶。含晶细胞位于纤维旁，数个纵向相接，形成晶纤维。草酸钙方晶较多，直径9～18μm。多面形、扁类方形等。偏光镜下明亮可见。石细胞少见，单个散在，呈类方形、类圆形，直径18～62μm，长径37～83μm ，孔沟明显，层纹影见，内含棕色物质。具缘纹孔导管多见，直径25～63μm。树脂团块黄棕色，呈不规则状。如图3所示。

2.2.2 小叶鼠李粉末 粉末灰黄色。纤维众多，且碎断，主为纤维管胞，大多成束，有时与导管、射线细胞毗邻。纤维胞腔大，完整者呈长棱形，直径12～19μm，壁呈念珠状增厚。薄壁细胞表面观呈类方形、多角形，直径10～32μm，长25～29μm，壁呈念珠状增厚，多呈皱缩状，细胞内含淡黄色至淡棕色颗粒物。具缘纹孔导管多见，直径25～63μm。射线细胞类方形或长方形，壁厚4～7μm，木化，内腔类圆形。树脂团块黄棕色，呈不规则状。如图4所示。

2.2.3 西藏猫乳横切面显微特 本品射线由2～3列径向延长的细胞组成，细胞内含棕红色树脂状物质。导管类圆形，单个散在，偶有2～3个联合，直径10～50μm。木纤维与纤维管胞无明显区别。木薄壁细胞单个散在或者数个联结，有的含草酸钙方晶。如图5所示。

2.2.4 小叶鼠李横切面显微特 本品射线由1～2列径向延长的细胞组成，细胞内无树脂状物质。导管类圆形，单个散在，偶有2～3个联合，直径10～40μm。木纤维与纤维管胞无明显区别。木薄壁细胞单个散在或者数个联结，有的含草酸钙方晶。如图6所示。

2.3 薄层鉴别[7-8]

2.3.1 山柰素薄层鉴别 取本品粉末1g，置于锥形瓶中，加入甲醇10ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，加2ml甲醇溶解，作为供试品溶液。取山柰素对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。按2010年版《中国药典》一部附录Ⅵ B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-甲酸（10∶11∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以3%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。如图7所示。

2.3.2 松生等薄层鉴别 取本品粉末1g，置于锥形瓶中，加入甲醇10ml，超声处理30min，滤过，蒸干，加2ml甲醇溶解，作为供试品溶液。取松生等对照药材1g，同供试品溶液的方法制成对照药材溶液。按2010年版《中国药典》一部附录Ⅵ B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-甲酸（10∶11∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。如图8所示。

2.4 检查

2.4.1 水分的测定 取各产地松生等细粉约3g（过2号筛），精密称定，按2010 年版《中国药典》一部附录Ⅸ H 水分测定法第一法进行测定。每批平行测定2 份，结果见表2。

2.4.2 总灰分、酸不溶性灰分的测定 取各产地松生等细粉约3g（过2 号筛），精密称定，按2010 年版《中国药典》一部附录Ⅸ K 总灰分测定法测定。每批平行测定2份，结果见表2。

2.4.3 浸出物的测定 取各产地松生等细粉约2g（过2号筛），精密称定，以稀乙醇为溶剂，按2010 年版《中国药典》一部附录X A 醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定。每批平行测定2 份，结果见表2。

3 讨论

3.1 显微鉴别 通过对10批不同产地的松生等药材部分横切面的显微特征对比，发现其显微特征基本一致。

3.2 薄层色谱鉴别 实验考察了不同展开剂，石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-甲酸（10∶11∶0.5）和环己烷-醋酸-甲酸（8∶4∶0.4）展开剂，结果石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-甲酸（10∶11∶0.5）为展开剂时主斑点清晰，分离度较好。耐用性试验考察了点样方式（点状点样和带状点样），展开温度（4～25℃），展开湿度（10%～50%），及不同厂家生产的薄层板，结果点状点样斑点清晰，分离度较好，展开温度、湿度及不同厂家薄层板对结果影响不大，表明本薄层实验的耐用性较好。其次，通过上述的两个薄层鉴别方法可知，西藏猫乳和小叶鼠李两个种在化学成分上差异不大，在薄层色谱上呈现的斑点基本一致，而斑点的大小差异大，可能是与药材的产地、生长环境以及采收的季节和时间段等有关。

3. 3 浸出物的测定 实验考察了浸出物的测定方法（冷浸法和热浸法），结果冷浸法和热浸法浸出物的含量差别不明显，考虑到省时及节省溶剂的原则，故选用热浸法。由于松生等中所含的有效成分主要为黄酮和皂苷类，因此选用95%、75%乙醇和稀乙醇作为提取溶剂考察浸出物的含量，结果以稀乙醇作为提取溶剂时，醇溶性浸出物的含量最高，故选稀乙醇作为提取溶剂。另外，松生等在藏药中常以浸膏入药，是通过加水煨泡煎煮的方法提取。因此该方法适于松生等的质量控制。

3.4 限量标准制定建议 本实验收集了不同产地的松生等共10批，样品有一定的代表性，根据不同收集地松生等的测定结果，建议规定松生等的含水量不得多于8.0%，总灰分不得多于8.0%，酸不溶性灰分不得多于1.0%，以干燥品计算醇溶性浸出物不得少于5.0%。

参考文献

[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准（藏药第一册）[S].北京：1995：55.

[2] 罗达尚.中华藏本草[M].北京：民族出版社，1997：154.

[3] 中国科学院西北高原生物研究所.藏药志[M].西宁：青海人民出版社，1993：405-407.

[4] 杨竟生，初称江错.迪庆藏药[M].昆明：云南民族出版社，1987：224-226.

[5] 青海省藏医药研究所，青海省药品检验所.中国藏药（第1卷）[M].1996：293.

[6] 罗达尚.新修晶珠本草[M].成都：四川科学技术出版社，2004：447-449.

[7] 潘勤，杨培全，陈桂红，等.藏药“生等”的化学成分研究（I）.中草药[J]，1998，29：（2）：76.

[8] 杨培全，潘勤，陈桂红，等.藏药“生等”的化学成分研究[J].华西药学杂志，1997，12（2）：153-155.

（收稿日期：2015.08.01）