肺癌患者放疗前后外周血淋巴细胞亚群变化研究

李海洋，赵振山

(开滦总医院，河北 唐山　063000)



肺癌患者放疗前后外周血淋巴细胞亚群变化研究

李海洋，赵振山

(开滦总医院，河北 唐山063000)

摘要：目的 探讨肺癌患者放化疗前后外周血淋巴细胞亚群的变化.方法 应用流式细胞仪对30例健康正常人群(对照组)和68例肺癌患者(肺癌组)放化疗前后的外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞及NK细胞等进行检测，并比较分析健康人群和肺癌患者的变化情况.结果 肺癌组放疗前外周血中CD3+，CD4+，CD4+/CD8+，CD19+与对照组相比均有所下降，差异均具有统计学意义(P<0.05)；CD8+比例较对照组升高，且差异具有统计学意义(P<0.05)；而CD56+比例较对照组升高，但结果无统计学意义(P>0.05).肺癌患者放化疗后淋巴细胞亚群CD3+降低，CD56+有所升高，差异无统计学意义(P>0.05)；CD4+，CD4+/CD8+较治疗前降低，CD8+，CD19+较治疗前升高，差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 肺癌患者在疾病发生、发展过程中存在淋巴细胞免疫异常和免疫功能紊乱的现象，外周血T，B淋巴细胞及NK细胞的检测对判断患者的免疫功能有一定参考作用.

关键词：肺癌；淋巴细胞亚群；流式细胞术

【引用格式】李海洋，赵振山.肺癌患者放疗前后外周血淋巴细胞亚群变化研究[J].北华大学学报(自然科学版)，2016，17(2)：213-216.

肺癌是我国常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率已高居首位，成为严重危害人类健康和生命的恶性肿瘤.肿瘤免疫学研究表明：人体的免疫调节与肿瘤的发生、发展有着密切关系[1]；T淋巴细胞是最重要的抗肿瘤免疫细胞之一，T淋巴细胞介导肿瘤细胞杀伤作用在机体抗肿瘤免疫中起主导作用，能够识别和清除肿瘤细胞.淋巴细胞亚群是反映细胞免疫功能的重要指标，在肿瘤免疫监测中起着重要的作用[2-3].因此，监测外周血淋巴细胞亚群的变化来评价肺癌患者的免疫功能改变，其结果对临床具有一定指导意义.本研究通过检测肺癌患者放疗前后外周血淋巴细胞亚群水平，提示肺癌患者机体免疫功能的变化，指导临床治疗.

1资料与方法

1.1研究对象

选择2014年1月—2015年6月唐山开滦总医院收治的具有完整临床资料的肺癌患者68例，入选患者均经组织病理学或细胞学等相关检查确诊，所有病例均无糖尿病、严重感染及其他与自身免疫相关疾病，且不合并其他恶性肿瘤，3个月以内未接受过化、放疗及免疫治疗；所有肺癌患者入院后接受国际标准化放化疗治疗方案.验血前3个月无任何使用免疫抑制剂史，无影响免疫功能的内科并发症.68例肺癌患者一般情况见表1.

表1　肺癌患者一般特征

1.2主要仪器、试剂以及淋巴细胞亚群检测方法

BCL-MCL(4C)流式细胞仪(美国Beckman-coulter公司)；配套的淋巴细胞亚群检测试剂盒(CD4/CD8/CD3荧光单克隆抗体)(美国Beckman-coulter公司)；SimulSET(BD公司 )；自动分析软件进行T淋巴细胞亚群测定和分析，计数成熟的T淋巴细胞亚群所占的百分率，总T淋巴细胞(CD3+)、T辅助诱导细胞亚群(CD3+CD4+)、T抑制毒性细胞亚群(CD3+CD8+)、T辅助细胞T抑制细胞的比值(CD3+CD4+/CD3+CD8+)以及总B细胞(CD3-CD19+)和NK细胞(CD3-CD56+).所有血液标本与患者治疗前和治疗结束后28 d采集.

1.3统计学处理

2结果

2.1肺癌组与对照组外周血淋巴细胞亚群比例比较

肺癌患者外周血淋巴细胞亚群CD3+，CD4+，CD4+/CD8+，CD19+比例与正常组比较差异具有统计学意义，其中CD3+，CD4+，CD4+/CD8+，CD19+与对照组显著降低(P<0.05)；CD8+比例较对照组升高，且差异具有统计学意义；CD56+比例较对照组升高，但结果无统计学意义.外周血淋巴细胞亚群比例的改变提示肺癌患者存在免疫功能紊乱现象.见表2，图1.

±s，η/%)

2.2放疗前后肺癌患者T淋巴细胞亚群水平比较

肺癌患者放化疗后淋巴细胞亚群CD3+(t=1.432，P=0.147)降低，CD56+(t=-0.374，P=0.810)升高，差异无统计学意义(P>0.05)；CD4+，CD4+/CD8+(t=4.263，P=0.002；t=5.432，P=0.000)较治疗前降低，CD8+，CD19+(t=-2.832，P=0.004；t=-2.583，P=0.001)较治疗前升高，差异均具有统计学意义(P<0.05)(见表3、图2).

±s，η/%)

3讨论

肺癌是一种原发于肺、气管及支气管的恶性肿瘤，大多数肺癌起源于支气管黏膜上皮，因此也称支气管肺癌.研究数据显示：肺癌是全世界死亡率最高的癌症，占新发肿瘤病例的17%左右，约占肿瘤死亡病例的23%[4-5].大多数临床就诊的肺癌患者已为晚期，治疗以化疗或放疗为主，目前临床化疗方案以铂类药物为主，其对患者免疫功能往往影响较大，故监测肺癌患者免疫功能变化，寻求放化疗疗效个体化差异的原因，可为肺癌寻求新的治疗途径提供一定的理论依据[6].研究证实：在肿瘤免疫中T细胞亚群是最关键的细胞亚群，其在肿瘤的发生、发展过程中发挥了重要的作用[7]；肿瘤的发生、发展及转移与机体的免疫功能低下有关，而机体的抗肿瘤免疫反应主要是细胞免疫反应，其中T淋巴细胞是最重要的抗肿瘤免疫细胞[8-9].目前研究将外周淋巴细胞分为CD3+，CD4+，CD8+，CD19，CD56+等主要亚群.CD3+为全T细胞标志，代表了总T细胞水平，反映机体总的细胞免疫状态，一般为CD4+和CD8+细胞数之和.CD4+又称T辅助或诱导细胞，其主要功能是通过分泌淋巴因子增加和扩大免疫应答过程，辅助诱导其他免疫细胞共同发挥抗肿瘤作用，CD4+淋巴细胞数量减少可导致免疫功能低下；CD8+具有负调节效应，并能抑制B细胞产生抗体.CD8+又分为T抑制细胞或细胞毒T细胞，其通过自身及抑制因子在免疫反应中起负向作用，抑制CD4+细胞和B细胞功能，从而抑制抗体形成及细胞免疫反应，CD8+细胞增多有利于肿瘤持续增长，同而促进肿瘤增殖[10-11]；其中T细胞各亚群中CD4+与CD8+的动态平衡以及相互制约是维持机体免疫功能处于正常状态的关键因素，通过这种动态平衡以维持机体免疫内环境及肿瘤微环境的稳定[12-13].

本此研究中，肺癌患者进行放化疗治疗前，外周血淋巴细胞亚群CD3+，CD4+，CD8+，CD4+/CD8+，CD19+比例与正常人相比有很大差异，有免疫紊乱现象，其中CD3+，CD4+降低明显，反映机体总的细胞免疫状态不佳，呈降低趋势.NK细胞(CD56+)虽有所升高，对肿瘤细胞有一杀伤作用，但其升高不明显，与对照组相比无统计学意义.68例肺癌患者在接受正规的放化疗治疗后，T淋巴细胞亚群CD3+均值变化差异无统计学意义；放化疗后CD8+，CD19+均值明显高于放疗前，且P>0.05，而CD4+，CD4+/CD8+较治疗前有所降低，CD4+/CD8+比例倒置，提示放化疗治疗以及其相关副作用可能均会对机体的免疫力产生影响.患者治疗后B细胞(CD19+)、NK细胞(CD56+)均有所增高，与相关文献报道相似，放化疗治疗一定程度上会增强NK细胞的杀伤效应[14-17].

通过对肺癌患者外周血淋巴细胞亚群表达水平的检测并结合临床病例资料，观察肺癌患者治疗过程免疫功能变化规律，可初步证实肺癌患者疾病发生、发展过程中存在淋巴细胞免疫异常和免疫功能紊乱的现象；通过流式细胞学技术的应用，可实时检测掌握患者的免疫功能变化情况，适时调节T，B细胞的分化，尽可能最大限度增强机体的免疫功能，发挥对肿瘤细胞的抑制和杀伤作用，期望为肺癌的诊断治疗、疗效判断、开辟新的治疗方法等提供依据.

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【责任编辑：陈丽华】

On the Changes of Peripheral Blood Lymphocyte Subsets in Patients with Lung Cancer before and after Radiotherapy

Li Haiyang，Zhao Zhenshan

(KailuanGeneralHospital，Tangshan063000，China)

Abstract：Objective To explore the changes of peripheral blood lymphocyte subsets in patients with lung cancer before and after chemoradiotherapy.Methods Flow cytometry was used to detect blood T lymphocyte subsets，B lymphocytes and NK cells of 30 healthy people(control group)and 68 cases of patients with nasopharyngeal carcinoma(observation group)before and after chemoradiotherapy.Comparisons were made in the testing results between the patients with nasopharyngeal carcinoma and the healthy people before and after chemoradiotherapy.Results Compared with the control group，CD3+，CD4+，CD4+/CD8+ ,CD19+ significantly decreased(P<0.05).The proportion of CD8+ was significantly higher than that of the control group(P<0.05)，while the CD56+ ratio was higher than that of the control group without statistical significance.After radiotherapy，CD3+ decreased and CD56+ increased，but the differences were not statistically significant(P<0.05).CD4+ and CD4+/CD8+ were significantly lower than before，CD8+ and CD19+ were significantly higher than before，and all the differences were statistically significant(P<0.05).Conclusion All the patients show abnormal immune function and low immune function.The detection results of T，B lymphocyte and NK cells in peripheral blood can be a certain reference to determine the immune function of the patients.

Key words：lung cancer；lymphocyte subsets；flow cytometry

中图分类号：R734

文献标志码：A

作者简介：李海洋(1979-)，女，主治医师，主要从事肿瘤学研究，E-mail：firstramp@163.com.

收稿日期：2015-10-02

文章编号：1009-4822(2016)02-0213-04

DOI：10.11713/j.issn.1009-4822.2016.02.015