柑橘潜叶蛾危害对脐橙叶片几种生理指标的影响

徐华+刘婉华+姚萍萍+戴小华

摘要：研究了柑橘潜叶蛾（Phyllocnistis citrella）对脐橙叶片丙二醛含量、SPAD值、可溶性糖含量和可溶性蛋白质含量的影响。结果表明：（1）柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片丙二醛、蛋白质含量明显高于健康叶片，且膛外叶片丙二醛、蛋白质含量明显高于膛内叶片的含量；（2）柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片SPAD值明显低于健康叶片，但膛外柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片的SPAD值与膛内的差异不明显；（3）柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片可溶性糖含量明显高于正常叶片，但膛外柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片可溶性糖含量与膛内的差异也不明显。原因可能是柑橘潜叶蛾危害了脐橙叶片，使脐橙叶片膜脂过氧化，降低了叶片的叶绿素含量，而脐橙叶片通过提高体内可溶性糖含量和可溶性蛋白质含量获得其对柑橘潜叶蛾危害的抗性。

关键词：柑橘潜叶蛾；脐橙；生理指标

中图分类号： Q945.78；S436.661.2+9

文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2016）04-0221-02

柑橘潜叶蛾（Phyllocnistis citrella）属鳞翅目细蛾总科叶潜蛾科，是危害柑橘夏、秋梢的重要害虫之一，常以幼虫蛀入嫩叶片表皮形成弯曲的虫道，导致叶片弯曲、硬化、脱落，严重时影响柑橘产量。柑橘潜叶蛾危害会使植株并发溃疡病，此外其危害的叶片会为螨类等害虫提供越冬和聚居场所[1-4]。植物体内可溶性糖含量与植物的抗性具有相关性。黄治远等研究不同品种龙眼的抗寒性发现叶片糖含量高的品种耐寒性强，受冻害轻[5]。而朱丽梅等研究发现百合高抗品种对灰霉病的抗性可能与体内较低糖含量有关。植物受到环境胁迫体内的可溶性蛋白质的含量会发生明显变化[6]。王改利等研究发现重度干旱胁迫导致蛋白质合成受阻，可溶性蛋白质含量明显低于对照[7]。张乐华等研究发现高温胁迫使井冈山杜鹃叶片可溶性蛋白质含量显著升高。外界环境因子会影响叶绿素的代谢[8]。例如，生理病害缺锌、镁等会使叶片黄化[9-10]。关义新等报道，水分胁迫会使叶绿素含量降低，且叶绿素含量和胁迫程度成负相关[11]。丙二醛常作为细胞膜脂过氧化指标，表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件的反应强弱。林艳等的研究结果显示低温胁迫下大叶女贞的叶片丙二醛含量出现上升趋势越早、上升幅度越大的植株其抗寒性越差[12]。但是到目前为止，关于柑橘潜叶蛾危害对脐橙叶片可溶性糖、可溶性蛋白质、丙二醛含量特别是SPAD值的影响，尚未见报道。本研究比较分析了膛内、膛外柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片与健康叶片可溶性糖、可溶性蛋白质、丙二醛含量和SPAD值的差异，旨在为深入了解柑橘潜叶蛾危害脐橙叶片的逆境生理机制奠定一定的理论基础。

1 材料与方法

样品采自于赣南师范学院天伦山柑橘种质资源圃，分别采集纽荷尔脐橙膛内和膛外健康叶片和被潜叶片12片，装袋标记。剪碎混匀后，称取鲜叶，采用蒽酮比色法[13]（略有改动），测定可溶性糖含量。采用考马斯亮蓝G-250法[13]（略有改动），测定可溶性蛋白质量含量。采用硫代巴比妥酸法[13]（略有改动），测定丙二醛含量。叶绿素含量的测定采用SPAD叶绿素测定仪器测定，在待测叶片上随机取5个测定点并取其平均值。每次试验3个平行且重复3次，数值为平均值±标准差。数据处理采用PAST软件。

2 结果与分析

2.1 柑橘潜叶蛾对脐橙叶片丙二醛代谢的影响

膛内、膛外被柑橘潜叶蛾危害叶片的丙二醛含量都明显高于健康叶片的含量（P<0.05），且膛外被潜叶片丙二醛含量明显高于膛内被潜叶片含量（P<0.05）（图1）。

2.2 柑橘潜叶蛾对脐橙叶片SPAD值的影响

膛内、膛外被柑橘潜叶蛾危害叶片的SPAD值都明显低于健康叶片的含量（P<0.05），但膛外被柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片的SPAD值与膛内被柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片的SPAD值差异不明显（图2）。

2.3 柑橘潜叶蛾对脐橙叶片可溶性糖含量的影响

膛内、膛外柑橘潜叶蛾危害叶片的可溶性糖含量明显高于健康叶片的含量（P<0.05）。但膛外被柑橘潜叶蛾危害的叶片可溶性糖含量与膛内被柑橘潜叶蛾危害的可溶性糖含量差异也不明显（图3）。

2.4 柑橘潜叶蛾对脐橙叶片可溶性蛋白质含量的影响

膛内、膛外被柑橘潜叶蛾危害叶片的可溶性蛋白质含量明显高于健康叶片的含量（P<0.05）。而膛外被柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片可溶性蛋白质含量高于膛内被柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片可溶性蛋白质含量，且差异显著（P<0.05）（图4）。

3 结论与讨论

柑橘潜叶蛾常危害脐橙嫩叶叶片，而该逆境胁迫会加剧叶片细胞的膜脂过氧化作用。丙二醛是植物膜脂过氧化的重要指标。柑橘潜叶蛾危害的叶片（膛内、膛外）的丙二醛含量都明显高于健康叶片的含量（图1）。说明柑橘潜叶蛾引起了脐橙叶片膜脂过氧化，伤害了脐橙叶片细胞的细胞膜。膛外柑橘潜叶蛾危害的叶片丙二醛含量明显高于膛内柑橘潜叶蛾危害的叶片含量，表明柑橘潜叶蛾对膛外叶片的危害程度大于对膛内叶片的危害程度。这可能是因为柑橘潜叶蛾主要危害植物新梢，而膛内叶片被潜叶蛾危害的时间更长，使得膛内受害叶片体内发生了生理代谢变化适应了柑橘潜叶蛾对脐橙叶片细胞膜的危害。

SPAD叶绿素仪是通过测量叶片在2种波长范围内的透光系数来确定叶片当前叶绿素的相对数量，是现在广泛使用的叶绿素活体测定方法。柑橘潜叶蛾危害的叶片SPAD值明显低于健康叶片的含量（图2），说明柑橘潜叶蛾影响了叶绿素含量。可见潜叶蛾可能因为通过降低叶绿素含量从而降低光合产量。但柑橘潜叶蛾对叶绿素代谢的影响机制是因为降低了叶绿素合成机制还是提高了叶绿素的降解机制还有待研究。

可溶性糖是与植物抗性有关的代谢物质之一。柑橘潜叶蛾危害的叶片可溶性糖含量明显高于健康叶片的含量（图3），说明脐橙叶片通过提高叶片内可溶性糖含量来提高其对柑橘潜叶蛾危害的适应能力。而柑橘潜叶蛾危害降低了叶片叶绿素的含量。说明脐橙叶片可能是通过糖的异生或降低可溶性糖向其他物质转化的机制提高体内可溶性糖的含量。但膛内和膛外柑橘潜叶蛾对脐橙叶片可溶性糖含量的影响差异不明显，说明光照对脐橙叶片通过提高体内可溶性糖含量增强其对柑橘潜叶蛾危害的抗性的影响不大。

可溶性蛋白质常作为逆境下反映植物抗逆性的参考性生理指标[14-15]。柑橘潜叶蛾危害的脐橙叶片中可溶性蛋白质明显高于健康叶片的含量（图4）。关于可溶性白蛋质的含量与植物抗逆性关系的研究较多，对于不同的胁迫和不同的植物，结论各异。曹艳春研究发现干旱胁迫下女贞叶片可溶性蛋白含量呈现先增加后降低趋势[16]，金银利等的研究结果表明黄曲条跳甲危害胁迫使萝卜、白菜和菜心等叶片在危害初期的可溶性蛋白质含量明显增加[17]。这可能是外界胁迫不同以及胁迫的时间长短不同，以及物种差异所致。由于植物体内大部分可溶性蛋白质是参与新陈代谢的酶类，因此，柑橘潜叶蛾可能提高了脐橙叶片一些新陈代谢酶的含量来抵抗其危害，从而提高自身的适应能力。另外，膛外柑橘潜叶蛾危害的叶片可溶性蛋白质含量明显高于膛内叶片可溶性蛋白质含量，说明柑橘潜叶蛾对膛外的树梢危害比较大。原因可能是柑橘潜叶蛾胁迫能诱导体内可溶性蛋白质含量提高从而增强叶片对柑橘潜叶蛾危害的抗逆性，且胁迫程度和可溶性蛋白质含量的增加呈现正相关性。

潜叶危害可以影响寄主植物的叶片形态、主要代谢、次生代谢和光合作用，反过来影响潜叶昆虫的寄主选择性、生长发育和被寄生率等[19]。本研究有助于理解植物胁迫生理及潜叶昆虫-寄主植物的生理生化关系。

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