顶空气相色谱法评价导管消毒连接器中消毒剂的稳定性

北京市医疗器械检验所(医疗器械检验与安全性评价北京市重点实验室)（101111）林红赛 崔永平 黄永富 岳卫华

随着医学的发展，中心静脉导管在临床广泛引用，其引起的血管相关血流感染（CRBSI）也随之增多，有报道研究了美国1992年～2004年期间，CRBSI占整个医院感染的10%～20%[1]。CRBSI引发的原因很大程度上是由于实际临床过程中按照《静脉治疗护理技术操作规范》[2]的要求对接头消毒不彻底或操作不规范引起的，同时CRBSI也受到消毒手法以及消毒用物的影响[3]。

为解决上述问题，近年来，各种消毒保护帽在导管接头消毒方面受到国内外临床的青睐[4][5][6]。与消毒保护帽类似，导管消毒连接器是一种由外接头、内圆锥锁定接头、外接头海绵、内圆锥锁定接头海绵、支撑硅橡胶、连接管和70%异丙醇水溶液组成的消毒器械，该产品适用于无针接头、留置针、中心静脉导管、肝素帽等接头的消毒。由于该类医疗器械较新，暂无相应的国家或行业标准，对于这类产品的稳定性评价，亦无参考方法。鉴于该产品的主要有效成分是异丙醇，本试验参考《乙醇消毒剂卫生标准》，建立加速老化条件下异丙醇消毒剂的稳定性评价方法，为该类产品的有效期内的消毒有效性进行评价，为产品的有效期评价提供方法参考。

1 材料和方法

Agilent 7890A气相色谱仪，配氢火焰离子化检测器（安捷伦科技有限公司）；7697顶空进样器（安捷伦科技有限公司）；电子天平（梅特勒-托利多公司）；涡旋振荡器（IKA公司）；异丙醇（纯度99.8%，CNW公司生产）；实验用水为超纯水。

1.1 色谱条件 V F-W a x色谱柱（25m×250μm×0.2μm），柱温50℃保持2min，以20℃/min的速率升至150℃，保持0min，进样口温度：200℃，检测器温度：250℃；氮气：25mL/min，氢气：30mL/min，空气：400mL/min；分流比：30∶1；柱流速：1mL/min。顶空平衡温度：80℃，平衡时间：30min。

1.2 对照品储备液的制备 取100mL容量瓶，加入约60mL蒸馏水，加瓶塞，称重，精确到0.1mg。用移液器加入约102μL的异丙醇，轻轻摇匀，盖好瓶盖，称重，前后两次称重之差即为溶液中所含异丙醇的质量，加水至刻度配制成浓度为744μg·mL-1的储备液。使用时根据需要再用去离子水稀释成标准工作液。

1.3 样品的制备 取3个批次的样品于老化箱中放置14天，老化温度为54℃，取出海绵，将海绵同包装一起放入预先加有40mL水的试剂瓶中，拧紧螺纹盖，80℃水浴30min，冷却至室温，取100μL溶液，加水定容至5mL，密封于顶空瓶中。同法制备老化前的样品，每个批次做两个平行样品。

1.4 样品中异丙醇提取方法的确定 取同一批号的老化前的样品8个，取出海绵，将海绵同包装一起放入预先加有40mL水的试剂瓶中，拧紧螺纹盖，于80℃条件下分别放置20min、30min、40min和50min，取100μL溶液，加水定容至5mL，密封于顶空瓶中，进样测定，记录色谱峰面积，每个时间点进行两个平行样试验。

2 结果

2.1 系统适用性试验 取异丙醇对照品工作液一份，按1.1的色谱条件，平行进样6次。异丙醇对照品峰对称因子为0.90，理论塔板数大于15000，组分峰与相邻峰之间的分离度大于1.5，重复进样峰面积RSD为1.58%，方法的系统适用性试验符合试验要求。

2.2 线性关系 取异丙醇储备液加水配制成标准工作溶液，标准工作液浓度依次为23.25μg·mL-1、46.5μg·mL-1、93μg·mL-1、186μg·mL-1和372μg·mL-1。取对照品溶液按1.1的色谱条件进样，记录峰面积，以异丙醇的色谱峰面积（Y）为纵坐标、浓度（X）为横坐标作图，得线性回归方程：Y=1.79424X+0.4392，r=0.9 9 9 9。该结果表明，异丙醇在23.25μg·mL-1～372μg·mL-1浓度范围内线性关系良好。

2.3 重复性试验 取同一浓度样品溶液6份，按1.1项下的色谱条件进样，测定异丙醇的色谱峰面积，计算RSD为1.8%（n=6）。

2.4 加样回收率试验 精密移取已知浓度的样品溶液0.05mL，置于顶空瓶中，共9份，分别精密加入低、中、高的三个浓度的对照品溶液，密封，摇匀，按2.1的色谱条件测定，用外标法计算，异丙醇的加样回收率结果见附表1。

2.5 提取方法的确定 取按1.3制备的样品，按1.1的色谱条件测定，用外标法计算样品溶液中异丙醇的浓度，浸提不同时间的测定结果见附表2，异丙醇理论值为产品生产企业声称的加入量。通过实验结果可知，80℃条件下放置30min及以上，异丙醇含量未见显著增加，且测定结果与理论值接近，故选择80℃30min作为浸提条件。

2.6 样品测定结果 根据样品的稀释倍数计算老化前后样品中异丙醇的含量，并计算老化前后异丙醇含量的百分比，计算结果见附表3。

附表1 加样回收率试验结果

附表2 不同提取时间测得异丙醇的含量

附表3 老化前后样品中异丙醇含量测定结果

3 讨论与结论

导管消毒连接器中异丙醇是消毒的有效成分，消毒剂的稳定是评价该类产品的重要指标之一。试验建立了导管消毒连接器中异丙醇总量的测试方法，优化了样品中异丙醇的提取方法，通过对比加速老化前后的导管消毒连接器中异丙醇的总量来评价该类产品的稳定性和有效性。

GB 26373-2010中要求乙醇消毒液经54℃存放14d后，产品中乙醇含量的降解率应≤10%，建议导管消毒连接器可参考该消毒剂乙醇的指标规定其降解率的要求，通过试验结果可知，三批样品的降解率均小于10%，初步判定其稳定性试验结果达标。