气相色谱法测定酒中氨基甲酸乙酯

◎黄振波

（河源市疾病预防控制中心，广东 河源 517000）

气相色谱法测定酒中氨基甲酸乙酯

◎黄振波

（河源市疾病预防控制中心，广东 河源 517000）

采用气相色谱法对市面黄酒中氨基甲酸乙酯（EC）含量进行测定。黄酒中氨基甲酸乙酯（EC）中色谱柱为HP-5（30.00 mm×0.25 mm,0.25 μ m），进样量为1μ L，分流比为50∶1；进样口温度控制在200 ℃，柱温控制在170 ℃。结果表明：当EC质量浓度达到2～30 μ g/mL时，其能够达到最佳线性关系，r=1.000；EC加样回收率为89.67%，相对标准偏差R SD为3.99%；10种黄酒样品中，只有2种测出含有EC。由此表明，在黄酒EC测定中气相色谱法具有一定的应用价值。

气相色谱法；黄酒；氨基甲酸乙酯

氨基甲酸乙酯（EC）是一种致癌物质，可引起淋巴癌、肺肿瘤、皮肤癌等多种癌症。根据国际癌症调研机构（IARC）的调查结果发现[1]，氨基甲酸乙酯对人体的致病毒性属于2B群。黄酒作为广受我国民众欢迎的酒精饮料，其含有的EC直接影响着民众的身心健康。因此，采取有效措施积极加强黄酒中EC含量测定成了研究重点。本研究拟运用气相色谱法进行定性定量测定。

1　材料与方法

1.1样品、试剂与仪器

1.1.1样品

自市场购入10种黄酒样品。

1.1.2 试剂

无水硫酸钠（分析纯），乙醚、乙酸乙酯、甲醇均为色谱纯，D50氨基甲酸乙酯内标、氨基甲酸乙酯纯度达到99%以上。

1.1.3仪器

气相色谱仪（北京北分天普仪器技术有限公司，GC-8600），旋转蒸发器（上海玛尼仪器设备有限公司，RE-2020Z），电子天平（梅特勒-托利多，XS303S）；Agilent ChemStation化学工作站等。

1.2方法

1.2.1样品处理

采用量筒精确称取黄酒样品300 mL，将其放置于旋转蒸发烧瓶内，将水温加热至70 ℃，调节转速，使烧瓶能够以缓慢且稳定的速度进行旋转。确保样品能够在旋转蒸发器上由原本的300 mL蒸发至30～50 mL，取出样品后将其移入球型滴液漏斗内，取2∶3甲醇与乙酸乙酯配置溶液5 mL，活化氨基柱，对漏斗开关进行调节，较缓慢地将酒样通过活化之后的氨基柱，以2∶3甲醇与乙酸乙酯配置溶液5 mL进行淋洗萃取柱，以2∶3甲醇与乙酸乙酯配置溶液10 mL进行洗脱萃取柱，将洗脱液与淋洗液充分混合并将其放置到氮吹管内，并在氮吹仪器上行吹干处理，以乙腈定容至刻度2 mL，备测。

1.2.2分析条件

气相色谱条件：色谱柱为HP-5（30.00 m m×0.25 m m, 0.25 μ m）；进样量为1μ L，分流比为50∶1；进样口温度控制在200 ℃；柱温控制在170 ℃。

2　结果与分析

2.1检测条件优化

根据气象色谱检测条件，因固相萃取中的洗脱剂使用剂量和种类会给回收率造成较大的影响，加之EC该化合物具有较强极性[2]。本试验分别以正已烷-丙酮（95∶5）、乙腈-水（1∶1）、甲醇-乙酸乙酯（40∶60）等行EC标准溶液的萃取柱，并对流分进行收集，而且进行气相色谱测定分析，对净化、回收进行考察。研究结果显示，甲醇-乙酸乙酯（40∶60）具有最佳洗脱效果；另行洗脱剂量分析发现，回收率会伴随着洗脱容积体积呈现为正比，但当体积达到8 mL之后，回收率的体积不会再发生任何改变。为此，试验明确了SPE最佳洗脱剂的使用剂量为8 mL；通过优化对检测条件进行优化，色谱峰获得的分离效果更加，同时基于此行其他参数的优化，最终基于该条件获得EC离子色谱图（见图1）。

图1　氨基甲酸乙酯离子峰图

2.2标准曲线与检出限

对不同质量浓度EC标准溶液进行配制，并根据上述条件来对其进行测定，以质量浓度为X，峰高为Y行线性回归分析，得到EC标准曲线与相关系数，同时获得检出限[3]。结果显示，当EC质量浓度达到2.0～30.0 μ g/mL范围内，线性方程为：Y=32 099X+159 128，r=1.000；检出限为64.5 μ g/L。该结果表明，当EC质量浓度达到2.0～30.0 μ g/mL时，其能够达到最佳线性关系。这表明该方法对黄酒在EC定量与定性分析中具有较高准确性。

2.3回收率与精密度

在未发现EC的样品中，分别添加EC标准溶液50.0、100.0、150.0 μ g/L，并按照上述方法对样品进行处理和测定，样品回收率见表1。EC加样回收率为89.67%，相对标准偏差RSD为3.99%。

2.4样品测定

根据上述操作方法对购入的10种黄酒样品中EC含量进行测定，结果显示，本研究购入的10种黄酒样品中，8种未测出EC（见表2）。

表1　加标回收率与精密度表

表2　样品测定结果表

3　结论

本研究通过运用旋转蒸发的方式对黄酒样品进行处理，再采用氨基固相萃取小柱，并对样品中的EC进行提取，同时运用气相色谱法对EC进行定性与定量范围。色谱柱为HP-5（30.00 mm×0.25 mm,0.25 μ m）；进样量为1 μ L，分流比为50∶1；进样口温度控制在200 ℃；柱温控制在170 ℃。通过测定结果发现，气象色谱法在黄酒EC测定中，具有较高准确度和精密度，而且操作方法简单快捷，可快速发现黄酒中含有的EC，对提高黄酒质量有着重要意义[4]。

[1]Roberto Rodrguez Madrer. Determination of ethylcarbamate in ciderspirits by HPLC-FLD[J]. Food Control，2009，25（20）：139-143.

[2]崔 鹏，韩澄华，张 辉.青稞酒中氨基甲酸乙酯的气相色谱-四级杆质谱测定法[J].环境与健康杂志，2012，28（1）：71-72.

[3]刘红丽，张榕杰，卢素格.酒中氨基甲酸乙酯的测定分析[J].中国卫生工程学，2010，18（4）：299-300，303.

[4]陈达炜，苗 虹，赵云峰.分散固相萃取/气相色谱-质谱法测定酱油及食醋中氨基甲酸乙酯[J].分析测试学报，2014，32（1）：108-111.

Determination of Ethyl Carbamate in Wine by Gas Chromatography

Huang Zhenbo
（Heyuan Center for Disease Control and Prevention， Heyuan 517000， China）

To determinate the ethyl urethane （EC） content in yellow rice wine by gas chromatography，the chromatographic column was HP-5 （30.00 mm×0.25 mm， 0.25 μm）， the sample volume was 1 L， the split ratio was 50∶1； the sample inlet temperature was controlled at 200 ℃， and the column temperature was controlled at 170℃. The results showed that when the EC mass concentration was reached 2～30 g/mL， which was capable of the best linear relationship， r = 1.000； EC and sample recovery rate was 89.67%， the relative standard deviation （RSD） was 3.99%； 10 kinds of yellow rice wine samples， only two were detected containing EC. This showed that determination has certain application value of gas chromatography in Yellow Wine EC.

Gas chromatography； Wine； Urethane

TS261.7；O657.63

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.06.026

黄振波（1981-），男，汉，广东省河源市人，本科，商品检验工程师，主要研究方向为食品风险监测。