血清TNF-α、IL-6、IL-8检测在重症支原体肺炎患儿中的价值

顾浩翔，陆 敏，车大钿，李 嫔

（1.上海交通大学附属儿童医院呼吸内科，上海200040；2.上海市儿童医院儿童内分泌科，上海200333）

血清TNF-α、IL-6、IL-8检测在重症支原体肺炎患儿中的价值

顾浩翔1，陆 敏1，车大钿1，李 嫔2

（1.上海交通大学附属儿童医院呼吸内科，上海200040；2.上海市儿童医院儿童内分泌科，上海200333）

目的 探讨血清TNF-α、IL-6、IL-8检测在重症支原体肺炎患儿中的应用价值。方法 选取我院于2012年4月至2015年2月入院治疗的支原体肺炎儿童患者90例，观察组45例为重症支原体肺炎，对照组45例为一般支原体肺炎，采用流式荧光法，测定患儿发病极期、恢复期血清TNF-α、IL-6及IL-8的水平。结果 观察组与治疗组TNF-α、IL-6及IL-8在极期时的值分别为1.13±0.21、230.5±36.4、0.26±0.08 pg/mL和0.82±0.17、185±31.1、0.18±0.04 pg/mL，差异具有统计学意义（P＜0.05）；在恢复期，观察组与治疗组TNF-α、IL-6及IL-8的值分别为0.81±0.34、135.32±30.8、0.162 ±0.07 pg/mL和0.62±0.12、109.24±25.5、0.140±0.02 pg/mL，差异具有统计学意义（P＜0.05）；两组患者，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平治疗后均显著降低，前后差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 TNF-α、IL-6及IL-8等炎性细胞因子在重症支原体肺炎的发生发展和疾病转归中起重要作用，可作为监测支原体肺炎严重程度的指标。

肿瘤坏死因子； 白细胞介素6； 白细胞介素8； 重症支原体肺炎； 儿童； 应用价值

支原体肺炎现已成为儿童下呼吸道感染，特别是小儿社区获得性肺炎的常见病症之一［1］。支原体肺炎以发热、咳嗽、无痰或白色黏液痰等为主要临床特征，患儿在使用抗生素后，还可能存在治疗较为困难或者长时间症状无明显改善，逐渐发展成为重症支原体肺炎的现象［2］。TNF-α（肿瘤坏死因子-α）、IL-6（白细胞介素6）、IL-8（白细胞介素8）等细胞因子及炎症介质对于重症支原体肺炎的发病机制和病情程度等有正相关联系［3-5］，本次研究对90例不同程度支原体肺炎儿童极期和恢复期的TNF-α、IL-6及IL-8进行测试，在于探寻NF-α、IL-6及IL-8等炎性细胞因子在重症支原体肺炎的发生发展和疾病转归中具体作用。

材料和方法

1 研究对象

选取2012年4月至2015年2月在我院进行治疗的支原体肺炎患儿90例，均符合支原体肺炎诊断标准（儿童肺炎支原体肺炎诊治专家共识（2015年版），经实验室检查和影像学检查得到确诊。按病情轻重分为两组。将重症支原体肺炎的患儿定为观察组，共45例；将一般支原体肺炎的患儿定为对照组。观察组患儿符合如下基本情况：①血清支原体抗体IgM阳性率在1：160以上；②符合重症肺炎诊断标准；③有缺氧表现并且有不同程度的肺外损害。排除标准：①无肺结核、支气管哮喘等其他呼吸系统疾病②检测未发现除类胸膜肺炎微生物（PPLO）外其他病毒感染。其中男23例，女22例；年龄5～13岁，平均9.1±3.3岁，病史2～14 d；合并症：心包积液6例，胸腔积液15例，中枢神经系统病变7例，肝脾大5例，皮疹13例。对照组男20例，女25例；年龄5～16岁，平均9.1±4.6岁，病史3～9 d；对照组为一般支原体肺炎，无明显呼吸困难、缺氧及肺外合并症等。两组患者的基本资料对比，年龄、性别等一般资料上比较差异不显著（P＞0.05），具有可比性，适合临床研究。研究前所有患儿家长都详细听取试验流程的介绍，并签署了自愿参加本次研究的知情同意书。

2 研究方法

采用流式荧光法（FIA）检测血清特异性MP-IgM抗体，分别于发病初期（或入院初期），治疗前后，发病极期（3～7 d）及恢复期（8～10 d），空腹抽取每例患者4 mL全血，血样分别置于美国BD公司分离胶试管中，-20℃下保存待检。检验仪器使用Luminex200流式荧光检测仪（美国Luminex公司），先将配对三种检测物的微球混合，加入待测血清。该混浊液中，抗体与抗原特异性相互配对，荧光标记在此阶段添加。进而，微球被微量液体传输系统排成单列通过检测器。通过检测器内荧光确认微球的编号，其他荧光判断该编号微球上的荧光强度，最后经由计算机处理后得出TNF-α、IL-6及IL-8等细胞因子及炎症介质的含量。

3 观察指标

记录并统计TNF-α、IL-6及IL-8在极期和恢复期的数值。

4 统计学处理

采用SPSS 15.0软件进行数据分析。计数资料以频数表示，比较采用χ2检验；计量资料以（±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，比较采用独立样本t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

结果

1 两组患者极期测定情况

观察组与治疗组TNF-α、IL-6及IL-8在极期时的值分别为1.13±0.21、230.5±36.4、0.26±0.08 pg/mL和0.82±0.17、185±31.1、0.18±0.04 pg/mL，差异具统计学意义（P＜0.05），表明TNF-α、IL-6及IL-8对于支原体肺炎的反应，水平越高，肺炎越严重。试验具体数据见表1。

表1　两组患者极期TNF-α、IL-6及IL-8检测结果的比较表（pg/mL）

2 两组患者恢复期测定情况

观察组与治疗组TNF-α、IL-6及IL-8在恢复期时的值分别为0.81±0.34、135.32±30.8、0.162± 0.07 pg/mL和0.62±0.12、109.24±25.5、0.140± 0.02 pg/mL，差异具统计学意义（P＜0.05）。试验具体数据见表2。

表2　两组患者恢复期TNF-α、IL-6及IL-8检测结果的比较表（pg/mL）

3 两组患者治疗前后TNF-α、IL-6及IL-8水平

重症支原体患者不论是观察组还是对照组，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平在治疗后显著降低，前后差异具有统计学意义（P＜0.05）。

表3　两组患者治疗前后TNF-α、IL-6及IL-8含量比较（pg/mL）

讨论

在儿童肺炎中，重症支原体肺炎是难于治疗、病因复杂、病程冗长、病情危重的一种［6］。从近时期治疗的方式来看，我国抗生素滥用的现象日渐严重，并且随着生态破坏、环境污染以及其他影响儿童生活环境因素的发展，重症支原体肺炎的发病率在我国儿童中呈逐年递增的态势［7］。

观察组TNF-α、IL-6及IL-8在极期与恢复期的值明显高于治疗组，差异具统计学意义（P＜0.05）；两组患者，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平治疗后均显著降低，前后差异具有统计学意义（P＜0.05）。数据显示了TNF-α、IL-6及IL-8等炎性细胞因子在重症支原体肺炎的发生发展和疾病转归中起重要作用。以往研究，多关注于TNF-α、IL-6及IL-8等炎性细胞因子与支原体肺炎相关性，并未考虑TNF-α、IL-6及IL-8等炎性细胞因子过度表达的原因。TNF-α、IL-6及IL-8等炎性细胞因子过度表达的原因，可能在于参与了MP的发病机制。目前，MP的发病机制仍未有定论。两种主流观点：其一直接由病原体导致，其二间接由病原体激发了免疫炎症反应。IL-6一方面可促进抗体的产生，另一方面会诱导T淋巴细胞分化，促进释放炎症因子。同样的，TNF-α水平低时可保护抗体，增强自身免疫，而浓度偏高，便成为炎症递质，诱发炎症逐渐严重。而 IL-8可激活中性粒细胞，促进其释放溶酶体酶与超氧化物。病原体侵入体内，导致机体产生免疫反应，产生多种细胞因子，一方面产生IL-6、TNF-α、IL-8，利用其促炎作用，消除微生物，另一方面，生成IL-10，抑制炎症发生。若某一方失衡，就会导致机体稳态紊乱。

目前，研究人员多数认为，对于重症肺炎的转归，炎性细胞因子介导的炎症反应在其中起了重要作用，而且因为肺炎支原体与人体某些组织存在部分共同抗原［8］，在其进入人体后，会产生相应组织的自身抗体，使得多系统的免疫损害，肺炎支原体的发病机制与直接毒性作用及免疫损害有关。肺炎支原体在进入人体后，促使机体免疫系统产生免疫应答，这一过程中，多种细胞因子和其他体液因子同时产生，保护机体抵抗病原体侵袭，因为肺炎支原体的应答过于强烈，多余的炎性细胞因子累积产生毒害效果［9］。

本研究的结果显示，观察组与治疗组TNF-α、IL-6及IL-8在极期时的值分别为1.13±0.21、230.5± 36.4、0.26±0.08 pg/mL和0.82±0.17、185±31.1、0.18±0.04pg/mL，差异具统计学意义（P＜0.05），这说明TNF-α、IL-6及IL-8在重症支原体肺炎中起重要作用；在恢复期，观察组与治疗组TNF-α、IL-6及IL-8的值分别为0.81±0.34、135.32±30.8、0.162±0.07pg/mL和0.62±0.12、109.24±25.5、0.140±0.02pg/mL，差异具统计学意义（P＜0.05），结果表明：随着病情的好转，两组患者的TNF-α、IL-6及IL-8水平都有降低，结果揭示了TNF-α、IL-6及IL-8对于支原体肺炎的反应，水平越高，支原体肺炎越严重；不论是观察组还是对照组，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平治疗后显著降低，前后差异具有统计学意义（P＜0.05）。

本次研究的不足之处在于研究的对象只有90例，有些片面性，不能代表全部情况，而且设计的观察指标有限，也有一定的局限性，这有待在今后的研究里改善，进一步进行探讨研究。

综上所述，TNF-α、IL-6及IL-8等炎性细胞因子在重症支原体肺炎的发生发展和疾病转归中起重要作用。利用流式荧光法检测TNF-α、IL-6及IL-8水平变化对临床诊断治疗及预后有一定的临床价值，检测TNF-α、IL-6及IL-8的水平，可作为监测支原体肺炎严重程度的指标。

［1］钟晓，田宝琳，焦安夏，等.儿童难治性肺炎支原体肺炎44例临床分析.中国实用儿科杂志，2015，30（8）：622-624.

［2］梁粤.肺炎支原体肺炎患儿外周血IL-10/IL-17表达与肺功能变化的相关性研究.临床儿科杂志，2015，33（8）：686-689.

［3］魏红玲，常艳美，鲁珊.肺炎支原体肺炎合并肺栓塞一例.中华儿科杂志，2015，53（2）：143-144.

［4］陈莉莉，刘金荣，赵顺英，等.常规剂量甲泼尼龙治疗无效的儿童难治性肺炎支原体肺炎的临床特征和治疗探讨.中华儿科杂志，2014，52（3）：172-176.

［5］张丽君，安淑华，李金英，等.肺炎支原体肺炎患儿气道黏液栓形成的危险因素.临床儿科杂志，2015，33（5）：432-436.

［6］陈蒙，杨军，赵德育.两岁以下儿童肺炎支原体肺炎临床特点分析.临床儿科杂志，2014，32（12）：1135-1137.

［7］李文，尹育华.难治性肺炎支原体肺炎32例临床特点及早期诊治.中华实用儿科临床杂志，2015，30（4）：316-317.

［8］梅玉霞，蒋瑾瑾，蔡斌，等.儿童难治性支原体肺炎临床危险因素分析.临床儿科杂志，2014，32（12）：1138-1140.

［9］中华医学会儿科学分会呼吸学组，《中华实用儿科临床杂志》编辑委员会.儿童肺炎支原体肺炎诊治专家共识（2015年版）.中华实用儿科临床杂志，2015，30（4）：1304-1308.

（潘子昂编辑）

Evaluation of Serum TNF-α，IL-6，IL-8 in Children with Severe Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia

GU Hao-xiang1，LU Min1，CHE Da-dian1，LI Bin2
（1.Department of Respiratory Medicine，Shanghai Children's Hospital，Shanghai Jiao Tong University，Shanghai 200040，China；2.Department of Pediatric Endocrine，Children's Hospital of Shanghai，Shanghai 200333）

Objective To investigate serum TNF-α（tumor necrosis factor-α），IL-6（interleukin-6），IL-8（interleukin-8）detection in children with severe mycoplasma pneumoniae pneumonia.Methods We collected 90 pediatric patients with refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia who were admitted in our hospital were selected from April 2012 to February 2015.In the observation group，there were 45 patients with severe mycoplasma pneumoniae pneumonia，in the control group，there were 45 patients with mycoplasma pneumoniae pneumonia.TNF-α，IL-6 and IL-8 levels were detected at different clinical stages.Results The levels of TNF-α，IL-6 and IL-8 of observation group in the acute phase were 1.13±0.21，230.5±36.4 and 0.26±0.08，and treatment group were 0.82±0.17，185±31.1，0.18±0.04.The difference between two groups were statistically significant（P＜0.05）；In the recovery phase，the levels of TNF-α，IL-6 and IL-8 of observation group were 0.81±0.34，135.32±30.8 and 0.162±0.07 and treatment group were 0.62±0.12，109.24±25.5 and 0.140±0.02 The difference between two groups were statistically significant（P＜0.05）. TNF-α，IL-6 and IL-8 levels significantly reduced after treatment in both groups The differences between before and after treatment were statistically significant（P＜0.05）. Conclusion TNF-α，IL-6 and IL-8 like other inflammatory cytokines play important roles in the development and prognosis of severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia.They can be used as indicators to monitor the severity of the disease.

TNF-α； IL-6； IL-8； Severe mycoplasma pneumoniae pneumonia； Children； Value

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.09.004

2016-05-30；

2016-06-22

李嫔（1963—），女，博士学位，主任医师，教授，博士生导师。主要研究方向：儿童内分泌疾病，性早熟，矮小症，糖尿病。Tel：18917128019；E-mail：Libin66655@126.com