禽流感灭活疫苗免疫效果评价试验

邓 飞，张 睿，李 丽，张 毅，丁梦蝶，邱明双

（四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都 610041）

禽流感灭活疫苗免疫效果评价试验

邓 飞，张 睿，李 丽，张 毅，丁梦蝶，邱明双

（四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都 610041）

随机抽取6个厂家的重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-8株）和6个厂家的禽流感二价灭活疫苗（H5N1 Re-6株+H9N2 Re-2株）进行免疫效果评价试验。结果表明，二免后28d，H5亚型二价灭活疫苗组的免疫抗体合格率在95.24%以上；二价灭活疫苗组H5和H9亚型抗体合格率在94.74%以上，免疫效果较好。

禽流感；灭活疫苗；免疫效果

为了准确评价重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-8株）及禽流感二价灭活疫苗（H5N1 Re-6株+H9N2 Re-2株）的免疫效果，我们在四川省某规模化鸡场开展了本试验。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 检测试剂 禽流感病毒H5亚型血凝抑制抗原，批号：2016001；禽流感病毒H5亚型阳性血清，批号：2015011；禽流感病毒H9亚型血凝抑制抗原，批号：2016001；禽流感病毒H9亚型阳性血清，批号：2015001。试剂生产厂家：哈尔滨维科生物技术开发公司。

1.1.2 试验用疫苗 随机抽取6家疫苗企业的重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-8株），用A、B、C、D、E、F表示；6家疫苗企业的禽流感病毒二价灭活疫苗（H5N1 Re-6株+H9N2 Re-2株），用G、H、I、J、K、L表示。各组疫苗均按使用说明严格保存，并在保质期内使用。

1.1.3 试验动物 从某规模场选择12日龄、同一品种、同一批次的雏鸡360只作为试验鸡。

1.2 方法

1.2.1 试验分组及免疫程序 将360只雏鸡随机分成12组，每组30只。按照疫苗说明书进行免疫注射，12日龄时进行首次免疫，首免后28d进行二免。

1.2.2 血清样品采集 分别在免疫前0 d、二免后28 d采血，无菌分离血清后-20℃保存。

1.2.3 抗体检测 采用血凝抑制试验分别进行H5和H9亚型禽流感抗体检测，检测方法按照国家标准《GB/T 18936-2003高致病性禽流感诊断技术》进行。

1.2.4 结果判定 按照《2016年国家动物疫病监测与流行病学调查计划》，禽流感灭活疫苗免疫的家禽，HI抗体效价≥4log2为免疫合格个体，免疫合格个体数量占群体总数的70%（含）以上为免疫合格群体，检测最高效价为10log2，高于10log2按10log2计算。

2 结果

2.1 重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗免疫抗体检测结果 A、B、C、D、E、F 6组免疫前0d，仅D组有3份样品的母源抗体效价≥4log2，A、B、C、F组各一份样品的抗体效价≥4log2，其余均＜4log2；母源抗体合格率在0～10%之间。二免后28d，平均抗体效价均在8log2以上，抗体合格率除B组为95.24%外，其余5组均为100%（结果详见表1）。

表1 重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗免疫抗体检测结果

2.2 禽流感二价灭活疫苗免疫抗体检测结果

2.2.1 H5亚型禽流感抗体检测结果 G、H、I、J、K、L各组免疫前0d，G、J、K组分别仅有2份样品的母源抗体效价≥4log2，H组有一份≥4log2，其余均＜4log2；母源抗体合格率在0～6.67%之间。二免后28d，平均抗体效价均在7log2以上，抗体合格率为94.74%～100.00%（结果详见表2）。

2.2.2 H9亚型禽流感抗体检测结果 G、H、I、J、K、L各组免疫前0d，仅H组母源抗体平均效价为5log2，抗体合格率为80%；其余5组母源抗体效价均＜4log2，抗体合格率在0～16.67%之间。二免后28d，平均抗体效价均在7log2以上，抗体合格率为94.74%～100.00%（结果详见表3）。

表2 禽流感二价灭活疫苗H5亚型免疫抗体检测结果

表3 禽流感二价灭活疫苗H9亚型免疫抗体检测结果

3 结论

3.1 本试验母源抗体检测结果显示，各试验组雏鸡除H组H9亚型的抗体效价水平较高外，其余各组仅个别鸡只母源抗体效价≥4log2，母源抗体效价普遍较低，表明本试验选择的雏鸡首免日龄（12日龄）是合适的。

3.2 二免后28 d，H5亚型禽流感抗体效价均较高，各组抗体合格率也高，免疫不合格个体为极少数，其可能原因不排除个体差异。试验结果表明12个厂家的疫苗对H5亚型禽流感的免疫效果均较好，能达到农业部规定的要求。

3.3 低致病性禽流感H9亚型尽管死亡率较低，但能使产蛋鸡的产蛋率由90%～95%急剧下降到20%[1]，同时禽流感病毒具有较高的变异性，往往造成严重的经济损失，因此H9亚型的禽流感免疫也应引起高度重视。本试验使用6个厂家的禽流感二价灭活疫苗进行免疫，结果H9亚型免疫抗体效价与合格率均较高，免疫效果较好。

3.4 疫苗免疫程序、接种日龄、接种次数、间隔时间以及免疫操作规范性都会影响免疫效果。各养殖场应根据本地流行毒株制定合适的免疫程序，规范免疫。同时，坚持“养重于防、防重于治、综合防治”的理念，加强饲养管理，做好定期监测。

[1]王鑑.禽流感病毒疫苗免疫效果的分析[J].中国畜禽种业，2010（3）：148-150.

Immune Effect Evaluation of Avian Influenza Virus Inactivated Vaccine

DENG Fei，ZHANG Rui，LI Li，et al.
（Animal Disease Prevention and Control Center of Sichuan Province，Sichuan Chengdu 610041，China）

Immune effect of recombinant AIV H5 subtype bivalent inactivated vaccine（Re-6+Re-8）and AIV bivalent inactivated vaccine（H5N1 Re-6+H9N2 Re-2）which were selected from 6 manufacturers were evaluated in this paper.The results showed that the qualified rate of immune antibody in the H5 subtype bivalent inactivated vaccine group was above 95.24%，the qualified rate of H5 and H9 subtype antibody were above 94.74%in the bivalent inactivated vaccine group.The results indicated that the effect of inactivated vaccine was better.

Avian influenza；Inactivated vaccine；Immune effect

S851.347.201

B

1001-8964（2016）12-0021-02

2016-10-11

邓 飞（1982-），女，四川成都人，硕士研究生兽医师，从事动物疫病防控工作。