以金纳米簇为荧光探针测定产品中微量硒

李进 张隆隆 刘宇华 黄晓君 周建湘（广东福寿仙生物科技有限公司，广东 广州 510470）

以金纳米簇为荧光探针测定产品中微量硒

李进 张隆隆 刘宇华 黄晓君 周建湘（广东福寿仙生物科技有限公司，广东 广州 510470）

合成了鸡蛋白蛋白（CEA）保护的水溶性金纳米簇（CEA-AuNCs），研究了硒对金纳米簇荧光猝灭的影响，确定了最优分析条件。在最佳实验条件下,硒在0.5-10μg/g范围时,金纳米簇的荧光猝灭程度与硒浓度呈线性关系,线性回归方程为:F0/F=0.05910C+1.0021,线性相关系数为0.9992。对5个样品进行了测定,5次测定值的相对标准偏差＜4%,加标回收率在94%-106%范围内。

中草药；化妆品；硒；金纳米簇；荧光探针

硒是一种人体必需的准金属微量元素，但硒化物对皮肤有强烈的刺激性，造成红斑、水疮或溃疡。氧化硒会引起皮肤剧痛和麻木，经吸收会造成内脏中毒。因此,硒的定量检测具有重要意义。金纳米簇的优异荧光特性，引起分析化学的广泛关注。本文利用硒对金纳米簇荧光猝灭特性，建立了硒的分析新方法。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

F-4500型荧光分光光度计(日本日立公司)。鸡蛋白蛋白（国药集团化学试剂有限公司);氯金酸(湖南试剂厂);硒标准使用液[ρ(Se)=1.0μg/ml]:将硒标准储备溶液逐级稀释成硒标准使用溶液。其他辅助试剂均为分析纯。实验用水为二次去离子水。

1.2 金纳米簇的制备

取10mL氯金酸溶液(10 mmol/L，37℃)加入到10mL鸡蛋白蛋白溶液(50 mg/mL，37℃)中搅拌混匀，2分钟之后，加入1mL 1mol/L的NaOH溶液，然后将混合液置于37℃水浴中连续搅拌20个小时。反应结束后，得到棕色溶液，所制备的金纳米簇置于冰箱（4℃）避光储存备用。

1.3 硒含量的测定

依次向5mL比色管中加入0.2mL金纳米簇、0.5mL硒稀释溶液和2mL pH 5.9的磷酸二氢钾-磷酸氢二钠缓冲液(PBS),用水定容,混匀。在30℃水浴中反应15min,以520nm为激发波长,测定其荧光强度(F),按同样的方法测定试剂空白的荧光强度(F0)。

2 结果与讨论

2.1 反应时间和反应温度的选择

向金纳米簇溶液中加入10μg/mL的硒溶液时,体系荧光强度迅速下降,5min后基本达到稳定,并在60min内不变。在后续实验中,反应时间定为10min。因此可以实现对硒的快速检测。研究了温度对反应体系的影响。实验表明,在30℃左右时反应迅速,重现性好。因此,后续实验均在30℃水浴中进行。

2.2 缓冲体系pH值和浓度的选择

研究考察了不同pH值（4.5-8.0）的PBS缓冲溶液对反应体系相对荧光的影响，结果表明,在

p H 5.0-6.5时,硒溶液对金纳米簇的荧光猝灭程度随p H的增大而增大;当pH为6.5时,反应体系的荧光猝灭程度最大,并且稳定。当pH＞6.5时,荧光猝灭程度随p H升高反而降低。后续实验均在pH为6.5的体系中进行。

2.3 分析特性

研究了硒浓度对金纳米簇荧光的猝灭情况,在0.5-10μg/g范围时，体系荧光猝灭程度与硒浓度呈线性关系,其线性回归方程为F0/F=0.05910C+1.0021，相关系数为0.9968,检测限为0.1μg/g,能满足化妆品中硒的测定要求。

2.4 产品中微量硒的测定

称取中草药、化妆品试样1-2g置于消化管中，加入10mL硝酸由低温至高温加热消解，当消解液体积减少到2 mL-3 mL,移去热源,冷却。加入高氯酸继续加热消解,不时缓缓摇动使均匀,消解至冒白烟，取下。稍冷后加入盐酸4 mL继续加热至产生白烟，立即取下，并用水定容，取得待测溶液。

按前面所述测定方法对硒含量及回收率测定，测定3种中草药和2种市售化妆品，并每个样平行测定5次，5次测定值的值的相对标准差小于4%,加标回收率在94%-106%范围内,表明该法的准确性和精密度均较高,可用于硒的定量分析。

表1 样品中硒含量测定

3 结语

本文基于硒对金纳米簇荧光强度的猝灭，建立了微量硒测定的新方法。具有灵敏度高、检出限低、方法快速简便等优点，适于实际应用中测定中草药、化妆品的硒含量。

李进（1987-），男，硕士学历，湖南益阳人。