葡萄胎中E-cadherin和Laminin的表达及临床意义

张力鹏，丁岩

(新疆医科大学第一附属医院，新疆 乌鲁木齐 830054)

葡萄胎中E-cadherin和Laminin的表达及临床意义

张力鹏，丁岩

(新疆医科大学第一附属医院，新疆 乌鲁木齐 830054)

目的探讨E-cadherin和Laminin对部分性葡萄胎、完全性葡萄胎和侵蚀性葡萄胎的诊断价值。方法收集2005年1月至2016年3月新疆医科大学第一附属医院妇科75例患者的葡萄胎组织，石蜡包埋组织，采用免疫组化SP法检测包埋组织中E-cadherin和Laminin的表达水平，其中部分性葡萄胎25例，完全性葡萄胎36例，侵蚀性葡萄胎14例。结果按部分性葡萄胎、完全性葡萄胎和侵蚀性葡萄胎顺序，E-cadherin阳性检出率分别为88.0%(22/25)、69.4%(25/36)和35.7%(5/14)，表达依次降低，差异有统计学意义(χ2=11.539，P=0.003)；Laminin阳性检出率分别为84.0%(21/25)、72.2%(26/36)和28.6%(4/14)，表达依次降低，差异有统计学意义(χ2=12.648，P= 0.002）。结论免疫组化法分析E-cadherin和Laminin可以作为不同类型葡萄胎传统诊断方法的辅助手段。

葡萄胎；E-cadherin；Laminin；免疫组织化学；SP法

临床上妊娠滋养细胞疾病最常见的一种类型是葡萄胎，如未做出及时诊治，有发展为侵蚀性葡萄胎甚至绒癌的风险，血清HCG主要用于妊娠的诊断，虽然在妊娠滋养细胞相关疾病具有一定的诊断价值，但其作为诊断手段的特异性仍不强，所以，寻找早期预测葡萄胎转移及恶变的指标显得尤为重要。近年研究表明，上皮型粘钙素(E-cadherin)和层黏连蛋白(Laminin，LN)异常表达与肿瘤转移、分化及恶变密切相关[1-3]。本文采用免疫组化法检测75例葡萄胎患者病变组织中E-cadherin和LN的表达，以期对其分型、侵蚀及进行早期预测。

1 资料与方法

1.1 对象 选择2005年1月至2016年3月在新疆医科大学第一附属医院妇科就诊的葡萄胎患者75例，所有病例均经病理检查确诊。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 选取每一例葡萄胎患者的病变组织，分装后送病理检查。石蜡包埋组织切片厚度为4 μm。

1.2.2 病理处理 将确诊为葡萄胎患者的病理组织进行免疫组织化学SP法检测E-cadherin和Laminin的表达。免疫组化试剂盒、E-cadherin和Laminin抗体均购自北京中山生物技术有限公司，设阴、阳性对照，实验步骤均参照试剂盒说明进行，在显微镜下观察到棕黄色颗粒为阳性细胞，每张病理切片均随机选择10个不同象限视野，对每个不同视野的阴、阳性细胞进行计数，阳性细胞占细胞总数＜5%为-，5%～25%为+，25%～50%为++，＞75%为+++。

1.3 统计学方法 采用Excel录入数据，SPSS19.0统计软件进行数据统计处理，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 基本情况 75例入选患者均未绝经，月经史规律，此前均无妊娠滋养细胞病史，年龄22～43岁，平均年龄32.5岁。经产妇33例，有孕无育史42例(首次妊娠37例，5例未婚)。停经时间6～20周，其中＞12周21例，8～12周36例，6～8周18例。

2.2 E-cadherin在不同类型葡萄胎组织中的表达 E-cadherin在葡萄胎中的表达：(1)在葡萄胎组织中，E-cadherin通常在滋养细胞间的连接部位进行表达(图1A)，(2)侵蚀性葡萄胎组织中，E-cadherin染色明显变淡，染色呈不连续性或点状着色，阳性表达率明显下降，且多为弱阳性表达(图1B)。

2.3 Laminin在不同类型葡萄胎组织中的表达 Laminin在葡萄胎组织中的表达：(1)典型葡萄胎组织中，Laminin主要表达于胎盘绒毛滋养层上皮基底膜(图1C)；(2)基底膜完整性缺失，Laminin的表达也从图1C的连续线性发展为间断和部分缺失，表现为表达下降(图1D)。

2.4 E-cadherin和Laminin在不同类型葡萄胎组织的表达比较 E-cadherin和Laminin在部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蚀性葡萄胎中的表达逐渐减少，阳性率差异均有统计学意义（P＜0.05），见表1。

图1 E-cadherin与Laminin在不同类型葡萄胎组织中的表达(×400)

表1 不同类型组织中E-cadherin和Laminin表达比较(例)

3 讨 论

部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蚀性葡萄胎作为葡萄胎的重要组成部分，前二者虽无恶性行为，但如果未能及时诊治，有10%～20%的概率发展为侵蚀性葡萄胎甚至绒癌等。葡萄胎预后又与其组织学类型及分化程度密切相关，故通过各种方式对影响其恶变因素进行早期预测是提高葡萄胎治愈率、降低恶变率的关键。本实验选取了两个与肿瘤转移、分化及恶变相关的标记物E-cadherin和Laminin[1-3]，以了解其表达改变与葡萄胎发生发展的关系。

E-钙粘附素(E-cadherin)是一种协助同类细胞间互相粘附的钙依赖跨膜糖蛋白，对介导细胞连接非常重要。本研究显示，E-cadherin在部分性葡萄胎、完全性葡萄胎及侵蚀性葡萄胎中的表达从高到低，在侵蚀性葡萄胎中明显减少，与先前报道[4-5]相似，表明其与葡萄胎的发生发展有一定的关联。这一结论可能是随着葡萄胎增殖程度的增加，钙粘素表达下降，增加了滋养细胞的侵蚀性，对母体造成过度侵袭、使滋养细胞间的粘附连接减弱，从而使细胞容易脱落、离散、远处转移，致使普通葡萄胎向侵蚀性葡萄胎及绒癌转变。但是，据Wang等[6]报道，E-cadherin在不同葡萄胎组织中表达差异无统计学意义(P＞0.05)。Erol等[7]报道，E-cadherin、p53、Inhibin-α联合可以作为传统方法区分不同类型葡萄胎的一种辅助手段。

先前报道表明，Laminin(LN)在正常绒毛组织和葡萄胎组织中均有表达[8]。本研究的75例葡萄胎组织中，随着葡萄胎增殖程度的增加，LN的表达从连续线性发展为间断缺失，表达下降，而基底膜部分缺失又与肿瘤的侵袭性密切相关。因此，提示LN的表达在葡萄胎发展及侵袭中起一定作用，这与崔彩莲等[9]报道一致。本研究中，LN与葡萄胎的病理变化相关，而安瑞芳等[10]报道恰恰相反，LN只与孕周存在一定的关联，这可能与两个研究所选择的人群不同有关。

目前代表葡萄胎滋养细胞发生恶变的一类指标，通过检测其在不同葡萄胎组织中的表达强度，可以辅助传统检测方法对葡萄胎类型做出准确及时的诊断，以期达到合理有效的诊治，降低其恶变率，提高生存率的目的。

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Immunohistochemical analysis of E-cadherin and Laminin in hydatidiform mole.

ZHANG Li-peng,DING Yan.The First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,Xinjiang,CHINA

ObjectiveTo investigate the role of E-cadherin and Laminin in the differential diagnosis of partial hydatidiform mole(PHM),complete hydatidiform mole(CHM)and invasive hydatidiform mole(IHM).MethodsFrom January 2005 to March 2016,75 cases of hydatidiform mole tissues were collected in Department of Gynaecology,the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University.Hydatidiform mole tissues were paraffin embedded.E-cadherin and Laminin expression were investigated by immunohistochemically SP methods in paraffin-embedded tissue sections, including diagnosed cases of PHM(n=25),CHM(n=36)and HA(n=14).ResultsFrom PHMs to CHMs to IHMs,positive detection rate of E-cadherin were 88.0%(22/25),69.4%(25/36)and 35.7%(5/14)respectively,with statistically significant differences(χ2=11.539,P=0.003).Positive detection rate of E-cadherin were 84.0%(21/25),72.2%(26/36)and 28.6%(4/14)respectively,and there were statistically significant differences(χ2=12.648,P=0.002).ConclusionImmunohistochemical analysis of E-cadherin and Laminin expression could serve as a useful adjunct to conventional methods in the differential diagnosis of PHM,CHM and IHM.

Hydatidiform mole;E-cadherin;Laminin;Immunohistochemistry;SP method

R737.33

A

1003—6350（2017）06—0875—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.06.004

2016-10-02)

国家自然科学基金（编号：81660249）

丁岩。E-mail：ddy8930@126.com