FRD上皮组织特殊染色技术在宫颈病变检查中意义的研究

彭奕琼+林钻娣+刘永珠

[摘要] 目的 探讨叶酸受体介导的宫颈特殊染色法（FRD）在宫颈病变筛查中的临床价值。 方法 选取2013年6月～2016年12月在我院门诊和住院患者4012例进行检查，随机分成两组，每组2006例，分别进行FRD宫颈特殊染色检查，液基薄层细胞学检查，筛查出阳性患者，以阴道镜检组织的病理学诊断为金标准，比较两种手段的诊断结果。 结果 以组织病理CIN2+为阳性标准，宫颈特殊染色的敏感性78.5%，特异性为70.2%，阳性预测值76.35%，阴性预测值77.47%；细胞学检查的敏感性为81.6%，特异性为43.2%，阳性预测值60.46%，阴性预测值69.38%。 结论 FRD为检测宫颈病变的一种方便、快捷且准确检测方式，值得推荐使用。

[关键词] FRD；宫颈病变；敏感性；细胞学检查；特异性

[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2017）06-58-03

[Abstract] Objective To explore the clinical value of folate receptor mediated cervical special staining （FRD） in the examine of cervical lesions. Methods 4012 cases cured in our hospital outpatient and inpatient from June 2013 to Decmber 2016 were selected and randomly divided into two group with 2006 cases in each.FRD cervical special stain and Thinprep Cytology Test were respectively carried on the two groups to screen the positive patients.Pathological diagnosis of colposcopy was used as gold standard.Diagnosis results of the two methods were compared. Results Pathological CIN2+ was used as the positive standard.The sensitivity of cervical special staining was 78.5%，specificity was 70.2%，positive predictive value was 76.35%，negative predictive value was 77.47%.The sensitivity of cytology was 81.6%，specificity was 43.2%，positive predictive value was 60.46%，negative predictive value was 69.38%. Conclusion FRD is a convenient，rapid and accurate method for the detection of cervical lesions.It is worthy of Recommending for patients.

[Key words] FRD；Cervical lesions；Susceptibility；Cytology；Specificity

宫颈癌为目前唯一已知发病原因的恶性肿瘤。其发病机制主要由人类乳头瘤病毒（HPV）以表皮接触式进行传播，潜伏时间长，患病早期无明显的发病症状，这给宫颈癌的早期诊断带来了很大的难度。已有相关学者研究发现，若在未发生癌变时施予治疗措施可以达到逆转的较果，改善预后[1-2]。故及早的发现宫颈癌，并及时的施予治疗措施能够提高患者的生存机率。临床检测宫颈疾病的方式为病理学检测、阴道镜检测、细胞学检测[3-4]，但均未达到令人满意的效果。宫颈特殊染色技术（FRD）为一种依赖于上皮的检测方法，可应用于宫颈癌的诊断[5]。本研究旨在探讨FRD宫颈特殊染色技术，在妇科检查时通过活组织特殊染色来提示宫颈病变的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2013年6月～2016年12月在清远市人民医院妇科门诊和住院患者4012例进行检查，门诊2685例，住院患者1327例。研究对象年龄21～70岁，平均（36.2±3.5）岁；未绝经妇女3426例，绝经妇女586例。随机分成两组，每组2006例。纳入标准：（1）所有入选的研究主体均行妇科检查，且患病资料完整。（2）入选人群出现白带异常、外阴瘙痒、阴道出血等症状。（3）患者知晓同意此研究并签订知情同意书。排除准则：（1）月经期以及妊娠期妇女。（2）实施过子宫切除术者。（3）实施过红外线、LEEP、微波等手术者。（4）出血量过多者。

1.2 试剂和仪器

FRD染色液出自上海常斤生物科技有限公司；液基薄层细胞制片系统及取样购自南京东大迪艾基因技术有限公司；人乳头瘤病毒（HPV）检测购自亚能生物技术（深圳）有限公司。

1.3 方法

采用多中心、随机、交叉试验，受试者随机选取，按照以下顺序进行各项检查

1.3.1 FRD检查 拧开FRD上皮组织特殊染色液的瓶盖，同时将大小棉签插入瓶中。宫颈：将棉签浸入FRD染色液，之后涂抹宫颈约5圈，按住宫颈口约10s即可，分析其颜色改变；宫颈管：将棉签浸入FRD染色液，之后放入宮颈管中，随之转动5圈，使之染色。观察棉签颜色：未变色（淡棕黄色），提示无病变；绿色，提示炎症、尖锐湿疣或CIN1；蓝色、墨绿色或黑色，提示宫颈异常病变（CIN2+）。

1.3.2 液基薄层细胞学检查 将宫颈细胞刷置于宫颈管中1cm左右处，随之旋转5圈，制作宫颈切片，并让经验丰富的专业医生诊断。若染色表现为宫颈病变，则需要于阴道镜下进行活检。

1.3.3 阴道镜检 FRD阳性或（和）细胞学检测结果≥ASC-US（不典型鳞状上皮细胞）的患者实施阴道镜检查，部分患者同时行HPV检测。用阴道镜将阴道上皮进行放大，密切观察上皮病变情况，对病灶实施活检。病理学结果将CINⅡ级以上定义为阳性，其余为阴性。全部的操作均由经验丰富的医生进行。见图1。

2 结果

2.1 实验组FRD染色结果

亮蓝绿色834位，淡黄棕色632位，提示1469位无发病宫颈病变；淡蓝绿色204位，淡绿色234位，提示435位患者产生CINⅠ级病变，尖锐湿疣，炎症；黑色17位，蓝色22位，墨绿色63位、提示102例患者发生癌变或CINⅡ。共102例为阳性结果，1904例为阴性结果。

2.2 细胞学和阴道镜病理检查结果

液基薄层细胞学检查结果显示，细胞学结果≥ASC-US的共98例，并进行HPV、阴道镜检查。对细胞学结果≥ASC-US的患者或（和）FRD检测为阳性的患者85例行活组织检测，病理学结果证实，炎症或正常的共23例，CINⅠ为16例，CINⅡ为19例，CINⅢ级为24例，宫颈癌3例。

2.3 病理诊断和FRD染色结果比较

宫颈特殊染色的敏感性76.74%，特异性为70.2%，阳性预测值76.74%，阴性预测值23.52%。见表1。

2.4 病理诊断和细胞学检查结果比较

细胞学检查的阳性预测值64.71%，阴性预测值35.29%，敏感性为81.6%，特异性为43.2%。见表2。

3 讨论

宫颈癌在女性群体中的发病率较高，且难治愈死亡率高。目前临床上对于宫颈癌的诊断十分困难，若能做到早发现、早治疗能夠提高宫颈癌患者的治愈率。TCT检测通过液基薄层细胞涂片技术，制作出高质量上皮样本，为重要的细胞学检测方式[6-8]。但我国医疗技术及资源不平衡，对于经济落后地区很难开展昂贵的TCT及HPV检查。因此仍需进一步探讨经济方便、快速而准确的筛查方法以提高我国宫颈癌筛查的覆盖面。

亚甲蓝染色剂能够将肿瘤活体细胞进行染色，成份为乙酸、还原态亚甲蓝、叶酸衍生物。肿瘤细胞中叶酸受体的表达量明显高于正常细胞，故亚甲蓝对肿瘤细胞具有亲生性，能够将其染色[7-10]。宫颈是最易暴露、接触外界因素的女性生殖器官。利用这一生理特性，FRD多功能醋酸白溶液是可直接根据染色结果初步筛查宫颈病变。其作用机制为：由于肿瘤细胞处于强烈的氧化应激的环境中，亚甲蓝能够将肿瘤细胞染色，与肿瘤胞发生氧化还原反应过程中可以产生不同的颜色[11-13]。若有癌变细胞存在，上皮组织中涂抹功能醋酸白溶液，叶酸复合物进入细胞浆内，经过一系列氧化还原反应氧化，成为亚甲蓝[14-15]。可在棉签上显现出颜色，如棉签无变色，则表明无病变细胞；如棉签变色（紫黑色，墨绿色，深蓝绿色），则提示有CINⅡ以上宫颈病变。因此FRD多功能醋酸白溶液试验作为一种筛查方法，经济、方便、技术要求低、安全无创使亚甲蓝在肿瘤细胞的氧化还原体系中。本研究发现，FRD多功能醋酸白溶液对宫颈癌筛查灵敏度、特异度较好（与TCT检查比较差异无统计学意义），减少了漏诊率，尚不足以造成严重的过度诊断。临床试验中发现，如宫颈存在创面、活动性出血，血液与试剂结合产生黑色，对结果的判定有一定影响，且宫颈行FRD检查后呈绿色，此时如行HPV检查，可能影响HPV准确率，需有待在临床实践中进一步认证。而TCT作为细胞学检查检测，对于脱落细胞的检查仍能较及时、如实反映出来。因此FRD可能在短时期内不能完全代替TCT检查。

结果提示，FRD法于诊断宫颈癌中特异性及灵敏度较好，尤其于病理学诊断金标准比较无明显差异时，能够做为宫颈癌早期诊断的有效方式。FRD法操作简单，费用较低，结果较准确，可以被大多数医院所接受。

综上所述，FRD为检测宫颈病变的一种方便、快捷且准确检测方式，值得推荐患者使用。

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（收稿日期：2017-02-10）