断奶日龄对仔兔胃肠道pH和消化酶活性的影响

卢，宋代军*，郭志强，谢晓红，雷 岷，李丛艳

断奶日龄对仔兔胃肠道pH和消化酶活性的影响

（1.西南大学动物科技学院，重庆 400715；2.四川省畜牧科学研究院，四川成都 610066；3.动物遗传育种四川省重点实验室，四川成都 610066）

本试验旨在研究断奶日龄对仔兔胃肠道pH和消化酶活性的影响。选择刚出生肉兔90窝，随机分成3组，每组30窝，分别在21、28、35日龄断奶，并在21、28、35、42、49日龄屠宰测定胃肠道各段的pH以及相关消化酶活性。结果表明：21日龄断奶组仔兔在28日龄时，胃和十二指肠内容物的pH显著升高（P＜0.05），在28日龄后随着日龄增加，pH又显著下降（P＜0.05）；随着断奶日龄的延迟，胃和十二指肠内容物的pH呈降低趋势，42日龄后，各断奶日龄组间差异不显著（P＞0.05）；21、28、35日龄断奶组的胃蛋白酶和21日龄断奶组的十二指肠胰蛋白酶活性在断奶后1周均显著降低（P＜0.05），35日龄后，各断奶日龄组间差异不显著（P＞0.05）；十二指肠淀粉酶、空肠和回肠的胰蛋白酶和淀粉酶活性随着断奶日龄的延迟而呈增加趋势（P＞0.05）；同时，这些酶的活性都会随着日龄增大而逐渐增加。可见，断奶日龄可影响仔兔胃肠道pH和消化酶活性，选择适宜的断奶日龄对仔兔胃肠道消化功能的发育至关重要。

断奶日龄；胃肠道pH；酶活性；仔兔

随着家兔集约化饲养的发展，为了提高母兔的繁殖性能，提高养殖场收益，早期断奶以及超早期断奶技术已经越来越多地被应用于实际生产中。在集约化生产中，仔兔通常在28～30日龄断奶。早期断奶可产生更高的经济效益，同时限制了母兔与仔兔的接触，减少了病原菌的传播，降低消化道疾病的发生。但早期断奶也有不利影响，有研究发现仔兔于28日龄断奶后出现采食量降低、生长受阻和死亡率增高[1]；早期断奶仔兔在育肥期的活重较35日龄低[2]；Hudson等[3]认为，早期断奶会损害母兔与仔兔的动物福利。因此，选择合适的断奶日龄对降低应激反应，对仔兔胃肠道消化功能的发育至关重要。断奶后10～15 d是仔兔生长发育的关键时期，研究此阶段胃肠道pH和消化酶活性变化具有很好的理论意义和实际研究价值，但目前国内外关于断奶日龄的研究主要集中在仔猪方面，在肉兔方面相对较少。本试验以新西兰肉兔为试验动物，研究断奶日龄对仔兔胃肠道pH和消化酶活性的影响，为完善肉兔早期断奶技术积累更多的资料。

1 材料与方法

1.1 试验设计 试验选择初生新西兰兔90窝，随机分为3个断奶日龄组，分别于21、28、35日龄断奶（分别称为21、28、35日龄组），每组30窝。在21、28、35、42、49 d 共5个日龄点采样，比较3个断奶组间的差异，每个采样点6个重复。

1.2 日粮配制 日粮参照Lebas[4]推荐的营养水平并结合本地饲料资源设计，制成颗粒饲料。试验日粮组成及营养成分见表1。

1.3 饲养管理 试验母兔由专人管理，饲养管理一致，产仔当日通过寄养的方式使每只母兔均带养8只仔兔，哺乳期采用母仔分离饲养。仔兔每日09：00哺乳1次，喂奶时将仔兔放入母兔笼中，哺乳10 min左右。仔兔从16日龄开始补饲，自由采食饲喂。所有参试兔在35日龄打耳号，并根据体型大小和性别进行分群分笼饲养，60 cm×60 cm笼位中饲喂3只仔兔。在42日龄注射兔瘟－巴氏杆菌二联疫苗（1.5 mL/只）。仔兔饲喂肉兔日粮直至试验结束，自动饮水，兔舍每天清洁1次。

表1 试验饲粮组成及营养成分

1.4 测定指标及方法 每组分别在第21、28、35、42、49天随机选择6只兔，公母各半，于当日早上饲喂后1 h进行屠宰，颈静脉放血处死后，立即打开腹腔，结扎幽门瓣、回盲瓣，将胃取出，将十二指肠、空肠和回肠分别结扎，按照解剖学特征小心剥离后取胃肠段内容物，分为2份，一份用于测定pH，另一份液氮速冻后于-20℃保存，待测定消化酶活性。

消化道酸度用pH-25型酸度计测定。消化酶活性测定应用酶联免疫吸附法（ELISA），测定胃蛋白酶、十二指肠、空肠和回肠食糜的淀粉酶、胰蛋白酶活性含量。试剂盒购自南京建成生物工程研究所，按操作说明进行消化酶活性测定。

1.5 统计分析 试验数据采用 SPSS 17.0统计软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较，以P＜0.05为差异显著性判断标准，结果用平均值±标准差表示。

2 结 果

2.1 断奶日龄对仔兔消化道内容物pH的影响 由表2可知，断奶日龄对胃和十二指肠内容物pH有显著影响，21日龄组和28日龄组在断奶后1周胃内容物pH显著升高（P＜0.05），21日龄组在断奶后1周十二指肠内容物pH有升高趋势（P＞0.05），35日龄组断奶前后各肠段内容物pH都无显著差异（P＞0.05）；随着断奶日龄的延后，胃和十二指肠段内容物pH呈降低趋势，21日龄组在28、35、42 d的胃和十二指肠内容物pH显著高于35日龄组（P＜0.05），28日龄组与35日龄组组间差异不显著（P＞0.05）；另外断奶后随着日龄的增加，胃和十二指肠内容物pH逐渐降低，42 d后3个处理组间差异不显著（P＞0.05）。空肠、回肠和盲肠pH断奶前后无显著差异（P＞0.05），随着日龄增大，有下降趋势（P＞0.05）。

2.2 断奶日龄对仔兔胃蛋白酶活性的影响 由表3可知，21日龄、28日龄和35日龄组在断奶后1周胃蛋白酶活性显著降低；随着断奶日龄的延后，胃蛋白酶活性呈增加趋势，21日龄组在28 d的胃蛋白酶活性显著低于28日龄和35日龄组（P＜0.05）；另外断奶后随着日龄增大，胃蛋白酶活性逐渐增加，42 d后3组间差异不显著（P＞0.05）。

2.3 断奶日龄对仔兔十二指肠酶活性的影响 由表4可知，断奶对十二指肠胰蛋白酶活性有显著影响，21日龄组在断奶后1周十二指肠胰蛋白酶活性显著降低（P＜0.05），28日龄组和35日龄组在断奶前后十二指肠胰蛋白酶活性无显著差异（P＞0.05），断奶对十二指肠淀粉酶活性影响不显著（P＞0.05）；随着断奶日龄的延后，十二指肠胰蛋白酶和淀粉酶活性呈增加趋势，21日龄组在28 d和35 d的十二指肠胰蛋白酶活性显著低于35日龄组（P＜0.05），也低于28日龄组（P＞0.05），21日龄组在28 d的淀粉酶活性显著低于28日龄组和35日龄组（P＜0.05）。另外，断奶后随着日龄的增大，十二指肠胰蛋白酶和淀粉酶活性呈增加趋势，42 d后各处理组间的胰蛋白酶活性差异不显著（P＞0.05）。

2.4 断奶日龄对空肠酶活性的影响 由表5可知，断奶日龄越早，空肠胰蛋白酶活性越低，21日龄组在28 d的空肠胰蛋白酶活性显著低于35日龄组（P＜0.05），与28日龄组差异不显著（P＞0.05）；随着日龄的增大，空肠胰蛋白酶活性逐渐增加，28 d后各处理组间的差异不显著（P＞0.05）。断奶对仔兔空肠淀粉酶活性无显著影响，3个断奶组在各日龄的淀粉酶活性差异都不显著（P＞0.05）；而随着日龄的增大，空肠淀粉酶活性逐渐增加，42 d后3个处理组的淀粉酶活性显著高于28 d以前的淀粉酶活性（P＜0.05）。

表2 断奶日龄对仔兔胃肠道内容物pH的影响

表3 断奶日龄对仔兔胃蛋白酶活性变化的影响

2.5 断奶日龄对仔兔回肠酶活性变化的影响 由表6可知，断奶日龄越早，回肠胰蛋白酶活性越低，21日龄组在28 d的回肠胰蛋白酶活性显著低于35日龄组（P＜0.05），与28日龄组比较差异不显著（P＞0.05）；随着日龄的增加，回肠胰蛋白酶活性逐渐增加，28 d后3个处理组间差异不显著（P＞0.05）。断奶对回肠淀粉酶活性无显著影响，3个断奶组在各日龄时的淀粉酶活性都无显著差异（P＞0.05），随着日龄的增加，回肠淀粉酶活性逐渐增加，3个处理组在42 d后的淀粉酶活性显著高于28 d以前的淀粉酶活性（P＜0.05）。

表4 断奶日龄对仔兔十二指肠消化酶活性变化的影响

表5 断奶日龄对仔兔空肠消化酶活性变化的影响

表6 断奶日龄对仔兔回肠消化酶活性变化的影响

3 讨 论

3.1 断奶日龄对仔兔消化道酸度的影响 断奶可影响胃肠道的酸碱环境。张振斌等[5]发现，仔猪断奶后胃酸的分泌减少，使仔猪胃内pH升高，在断奶后第1天表现尤为显著。断奶后胃内pH升高是由于仔猪不具备分泌足量酸的能力或断奶仔猪采食量高于哺乳仔猪造成[6]。本研究发现，仔兔在 21、28日龄断奶后胃内容物pH显著升高，分别在28 d和35 d达最大值；相比28和35日龄断奶，21日龄断奶仔兔的十二指肠内容物pH有升高趋势，不同处理组断奶后空肠和回肠的pH都没有显著变化，可见21日龄断奶对仔兔影响较大。由于肠液的分泌，同时断奶后胃中向肠道输送的食糜减少，故断奶后十二指肠食糜pH升高。经过十二指肠对酸性食糜的中和作用，到达空肠，回肠的未被消化的物质并不会引起这些肠段pH显著改变，本研究发现21、28、35日龄断奶仔兔盲肠pH在断奶后有不明显的降低趋势，这可能是由于断奶后固体日粮替代了母乳，盲肠微生物利用固体日粮中植物纤维产生一定的挥发性脂肪酸。断奶后，胃和各肠段的pH随着日龄的增大而降低。另外，仔兔断奶后胃和十二指肠pH虽出现短暂的升高，但一周后随着日龄的增加，各肠段pH都逐渐降低，经过2～3周的时间，胃肠道pH恢复正常，这与杨琳等[7]研究报道相一致。这种变化是与仔兔消化功能的完善，对固体日粮的适应以及肠道内微生物生态的平衡相适应的。另外，Efird等[6]和张宏福等[8]指出，断奶越早对仔猪胃内酸度的影响越大，断奶较迟的仔猪则不受影响。本试验也有相同结论，21日龄断奶组仔兔胃和十二只肠的pH在21～49 d都高于28、35日龄断奶组。对早期断奶仔兔可通过补充外源酸来避免因胃酸分泌不足导致的消化疾病。在仔猪方面，陈佳力等[9]研究发现，日粮中添加5 000 mg/kg 苯甲酸显著降低仔猪胃和结肠内容物的pH，极显著降低了试验第42天仔猪尿液的pH。但无论是何种酸，其添加效果都与断奶时间有关。许多报道均指出，酸制剂对早期断奶仔猪在断奶后前2周有效果，此后无明显效果[10]。综上可知，根据仔兔断奶日龄添加外源酸制剂可有效降低仔兔胃酸分泌不足对消化道pH的影响。

3.2 断奶日龄对仔兔胃肠道消化酶活性的影响 断奶可影响胃肠道的消化酶活性。Hedemann等[11]发现，28日龄断奶仔猪基底黏膜组织内的胃蛋白酶活性短暂性下降，后随着日龄增大而增加，第7天恢复断奶前水平，胃内容中胃蛋白酶活性下降不明显。在本试验中，仔兔在21、28、35日龄断奶后胃内容物中的胃蛋白酶活性显著降低，分别在28、35、42 d时达最低值，之后随日龄增大而增加，这与Hedemann等[11]研究结果相似。本研究发现，只有21日龄断奶组仔兔断奶后十二指肠胰蛋白酶显著降低，在其他断奶日龄或其他肠段均未降低。由于21日龄断奶组仔兔十二指肠pH相比其他组和其他肠段高，pH的差异可能导致胰蛋白酶酶活性变化。Gallois等[12]也发现，21日龄断奶仔兔胰蛋白酶活性在21～28 d显著降低，认为这可能是小肠内容物的改变和来源于植物性饲料的抗胰蛋白酶因子的作用。另外，胰蛋白酶活性会随着日龄的增大呈增加趋势。事实上在很多文献中均有报道，仔兔出生后胰蛋白酶活性变化过程变异很大，如Debray等[13]报道，仔兔胰蛋白酶活性在25～42日龄间没有显著变化；Dojanǎ等[14]则报道，仔兔胰蛋白酶活性在15～42 d活性增加，随后保持稳定。

本研究发现，仔兔在21、28、35日龄断奶后各肠段的淀粉酶活性都没有变化，但断奶后随着日龄的增大呈增加趋势，这可能是由于断奶后母乳被含淀粉固体日粮完全替代，淀粉的消化强烈刺激了仔兔的淀粉酶活性。Gutié rrez等[15]也发现，35日龄断奶仔兔胰腺产生更多的胰淀粉酶，其相比哺乳期仔兔有更高淀粉摄入量。但Gidenne等[16]和Gallois等[12]研究发现，仔兔高淀粉摄入量有更低的淀粉酶活性。这些差异可能是由于采样的方法、时间和部位不同导致，同时饲料中的其他成分也会影响仔畜胃肠道消化酶活性。杨维仁等[17]研究发现，哺乳期仔猪日粮中添加4%植物小肽可提高断奶仔猪胰脏中胃蛋白酶活性，提高十二指肠段脂肪酶和淀粉酶活性。

总之，仔兔断奶后胃肠道pH和消化酶活性的变化受多种因素的影响，对实施早期断奶的仔兔，必须供给容易消化吸收的日粮，要做到科学配料，合理搭配营养元素，另外有必要添加适量的外源酸来弥补仔兔胃酸分泌不足的特点，添加外源酶协助饲料消化，提高饲料消化率，添加益生素维护肠道健康，预防肠道疾病。

4 结 论

断奶显著提高了仔兔胃和十二指肠的pH，断奶日龄越晚影响程度越小，断奶后随着日龄的增大，胃和十二指肠内容物pH逐渐降低。

断奶显著降低了仔兔胃蛋白酶和十二指肠胰蛋白酶活性，断奶日龄越晚影响程度越小，断奶后随着仔兔日龄的增大，上述酶活性逐渐增加。综合考虑，28日龄断奶较21日龄和35日龄段奶更为合理。

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Ef f ects of Weaning Age on Gastrointestinal pH and Activity of Digestive Enzymes in Meat Rabbits

LU Yao1, SONG Dai-jun1*, GUO Zhi-qiang2, XIE Xiao-hong2, LEI Min2, LI Cong-yan2

This experiment was conducted to evaluate the eects oweaning age on digesta pH and enzyme activity odigestive tract in meat rabbits. A total o90 nests onewborn meat rabbits were randomly selected and divided into 3 groups equally, which were arranged to be weaned in 21, 28 and 35 days ater their birth. At 21, 28, 35, 42 and 49 days oage, digesta odigestive tract were collected ater slaughter. The pH othe stomach and the intestine segments and the related enzyme activity were measured. The results showed that one week ater weaning, the pH othe stomach and the duodenal content orabbits weaned at 21 days signicantly improved(P＜0.05). With the increase oage, the pH decreased signicantly (P＜0.05). Additionally, the pH othe stomach and the duodenal contents presented declining trend with the weaning days kept longer. Ater 42 days, the dierence could not be distinguishedrom three groups (P＞0.05). The activity opepsase othe 21, 28 and 35 days old weaned groups and the activity othe duodenal trypsin othe 21 days old weaned group signicantly reduced in therst week ater weaning(P＜0.05), while it did not showed strong eect on duodenum, jejunum and the activity of trypsin and amylase of the ileum(P＞0.05). But the activity othe enzyme mentioned above showed a raise tendency with the weaning days added. 35 days later, no signiicant dierence happened in each group (P＞0.05). In addition, the activity othese enzymes gradually became stronger and stronger with the increase oage. According to this, the dierent weaning age will aect young meat rabbits' digesta pH and the activity odigestive enzyme distinctly. Choosing their weaning days appropriately is vital to the development ogastrointestinal digestiveunction oyoung rabbits.

Weaning age; Digesta pH; Enzyme activity; Meat rabbits

S829.105

：A

：10.19556/j.0258-7033.2017-07-113

2016-12-23；

2017-02-20

公益性行业（农业）科研专项（201303143）；国家兔产业技术体（CARS-44-B-4）；家兔现代产业链关键技术集成研究与产业化示范（2016NZ0002）

卢（1994-），男，湖北恩施人，硕士研究生，主要从事动物营养与饲料科学研究，E-mail:1023457203@ qq.com；并列第一作者：郭志强（1981-），男，河南安阳人，硕士，助理研究员，主要研究方向为肉兔养殖，E-mail:ygzhiq @126.com

* 通讯作者：宋代军，副教授，硕士生导师，E-mail:djsong@ swu.edu.cn