孕期叶酸摄入与MTHFR基因多态性对产后抑郁的影响

李引弟，岳红云，李 华

(1.延安大学附属医院产科，陕西 延安 716000；2. 西安交通大学医学院第二附属医院普外科，陕西 西安 710004)

孕期叶酸摄入与MTHFR基因多态性对产后抑郁的影响

李引弟1，岳红云1，李 华2

(1.延安大学附属医院产科，陕西 延安 716000；2. 西安交通大学医学院第二附属医院普外科，陕西 西安 710004)

目的 探讨叶酸摄入量与亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与产后抑郁的关系。方法 将2014年1月至2016年6月之间来延安大学附属医院产科进行产检的800例孕妇纳入本项研究，采用开放式问卷调查的方式收集妊娠12周和28周妇女服用叶酸的信息，通过PCR-RFLP检测MTHFR基因 C677T和A1298C多态性。于产后8周通过爱丁堡产后抑郁量表(EPDS)进行产后抑郁诊断。统计分析叶酸摄入与MTHFR C677T和A1298C基因多态性与产后抑郁的关系。结果 800例受试者中产后抑郁症患者218例，正常582例。产后抑郁妇女与正常妇女妊娠期间每天的叶酸摄入量和不同时间补充叶酸无明显差异，但是产后抑郁妇女血清叶酸水平显著低于正常妊娠妇女(χ2=15.76，P<0.001)。两组受试者MTHFR C677T和A1298C多态性位点的基因型频率间差异存在统计学意义，其中杂合子CT(χ2=13.67，P<0.01)、AC(χ2=3.39，P=0.02)和纯合子TT(χ2=8.65，P<0.01)、CC(χ2=15.18，P<0.01)是产后抑郁发生的高风险因子。此外，不同MTHFR C677T和A1298C基因型(CC、CT、TT和AA、AC、CC)产后抑郁的妇女在孕期摄入的叶酸量、不同时间补充叶酸和血清叶酸水平无明显差异(χ2值为0.07～2.79，均P>0.05)。结论 低叶酸摄入量和不同时间补充叶酸不是产后抑郁发病的风险因素，但叶酸水平与MTHFR C677T和A1298C基因型是产后抑郁发病的独立风险因素。

产后抑郁；叶酸；亚甲基四氢叶酸还原酶；基因多态性

产后抑郁严重危害产妇的身心健康，随着人们对围产期妇女健康观念的不断改变，产妇常见的抑郁和焦虑得到了一定程度的重视与关注[1-2]。有研究表明低叶酸水平与抑郁症有关，一些临床试验也称叶酸单药或者结合抗抑郁药物治疗抑郁症有一定的疗效[3-5]。但是一些研究认为低叶酸水平与抑郁无关[6-8]。如果低叶酸水平是产后抑郁发生的重要因素，那么亚甲基四氢叶酸还原酶(Methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR) 的基因多态性也应与抑郁症的发病有关。MTHFR在叶酸代谢通路中将5,10-亚甲基四氢叶酸转化为5-甲基四氢叶酸，5-甲基四氢叶酸可以进一步进入甲基传递通路，通过同型半胱氨酸的重新甲基化为DNA甲基化和蛋白质甲基化提供甲基并且使血液中的同型半胱氨酸水平保持在一个较低的水平，这就可能影响机体情绪[8-9]。因此，本研究探讨了叶酸摄入和亚甲基四氢叶酸还原酶MTHFR C677T和A1298C基因多态性与产后抑郁的关系。

1材料与方法

1.1资料来源

将2014年1月至2016年6月之间来延安大学附属医院产科进行产检的800例孕妇纳入本项研究，且参与者均为初产妇，分娩后8周参与抑郁症检测，婴儿存活时间>12个月。排除产前具有神经、精神障碍的，且不配合调查的患者。该项研究通过医院道德伦理委员会批准。

1.2叶酸检测

叶酸摄入量检测：采用开放式问卷调查的方式，收集妊娠8周和20周妇女服用叶酸的信息[9]。无论妊娠妇女是单独服用叶酸还是与铁一起服用，都纳入本项研究。

叶酸水平检测：各组受试妇女孕12周，取晨起空腹肘静脉血5mL，分离血清，在Roche E170电化学发光分析仪上检测叶酸水平，血清叶酸正常值参考范围4.50～35.00nmol/L。

1.3MTHFR基因多态性检测

分别采取每例受试者全血2mL，使用苯酚-氯仿法从全血中提取基因组DNA。通过PCR-RFLP检测MTHFR基因 C677T和A1298C多态性。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)反应体系：1μL DNA模板，1μL上游引物和1μL下游引物，25μL Master Mix，21μL ddH2O；引物序列和扩增条件[10]如表1所示，扩增结束后，对PCR扩增产物进行酶切，37℃孵育2h，进行1.5%琼脂糖凝胶电泳，然后分析MTHFR基因多态性。

表1 2个SNPs位点引物序列和扩增条件

1.4抑郁症检测

由于产后抑郁症尚无统一的诊断标准，我们采用现阶段公认的爱丁堡产后抑郁量表(Edinburgh postnatal depression scale，EPDS)对产后8周的妇女进行诊断。EPDS包括10项调查内容，每项内容分4级评分(0，1，2，3)。10个项目的总和为受试者的总得分，12～13分为患有不同程度的抑郁性疾病，≥13分为产后抑郁症。

1.5统计学方法

2结果

2.1妊娠妇女基本特征与产后抑郁症的关系

在800例受试者中产后抑郁症患者218例，正常582例。妊娠妇女的基本特征对产后EPDS得分没有明显影响，如年龄、文化程度、孕前身体质量指数(body mass index，BMI)、胎儿性别和分娩方式。但是我们发现胎儿的性别对产后抑郁的影响较其他因素相对明显(P=0.05)，见表2。

表2 妊娠妇女基本因素对抑郁症得分的影响

2.2叶酸摄入量和叶酸水平与产后抑郁的关系

产后抑郁妇女与正常妇女妊娠期间每天的叶酸摄入量无明显差异(P=0.30)。两组受试者在妊娠12周时补充叶酸(P=0.68)、在妊娠28周补充叶酸(P=0.54)及在12和28周同时补充叶酸无明显差异(P=0.63)。这就表明叶酸的摄入量与补充时间对产后抑郁的发病没有影响。但是，产后抑郁妇女与正常妇女妊娠12周时体内叶酸水平存在显著性差异(P<0.001)，85.78%(187例)病例组妇女血清叶酸水平<4.50nmol/L，97.42%(567例)对照组妇女血清叶酸水平在4.50～35.00 nmol/L之间，见表3。

Table 3 Effect of different folic acid intake and folic acid levels on postpartum expression[±S,n(%)]

注:食品频率调查问卷(foodfrequencyquestionnaire，FFQ)。

2.3MTHFR基因多态性与产后抑郁的关系

病例组和对照组的MTHFR基因C677T和A1298C的基因型频率如表4所示，两组的C677T和A1298C多态性位点的基因型频率间差异存在统计学意义，其中杂合子CT(P<0.01)、AC(P=0.02)和纯合子TT(P<0.01)、CC(P<0.01)是产后抑郁发生的高风险因子，C677T和A1298C基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡定律，见表4。

表4 不同的MTHFR基因(C677T和A1298C)的基因型频率对产后抑郁的影响[n(%)]

Table 4 Effect of genotype frequency of MTHFR gene(C677T and A1298C) on postpartum depression[n(%)]

2.4混杂因素分析

混杂因素(叶酸摄入量、不同的补充时间和血清叶酸水平)对不同MTHFR基因型产后抑郁妇女的影响分析显示，不同MTHFRC677T和A1298C基因型(CC、CT、TT和AA、AC、CC)产后抑郁的妇女在孕期摄入的叶酸量、不同时间补充叶酸和血清叶酸水平无明显差异(P>0.05)。这就表明不同MTHFRC677T和A1298C基因型导致妇女产后抑郁不受孕期叶酸摄入量、补充时间和血清叶酸水平的影响，是妇女产后抑郁的独立影响因素，见表5。

SNP叶酸摄入量(FFQ)(μg/d)妊娠12周补充叶酸妊娠28周补充叶酸妊娠12和28周补充叶酸血清叶酸水平(nmol/L)MTHFRC677T CC(n=97)298.72±47.2289(91.75)17(17.53)9(9.28)3.60±0.76 CT(n=93)275.31±43.8386(92.47)15(16.13)8(9.68)3.31±0.27 TT(n=28)287.63±53.8125(89.29)4(14.29)2(7.14)2.93±0.92χ2/t0.320.740.380.540.07P0.770.100.680.292.32MTHFR1298C AA(n=86)301.62±57.3179(91.86)14(16.28)7(8.14)3.74±1.12 AC(n=75)288.92±50.2270(93.33)12(16.00)7(9.33)3.20±0.93 CC(n=57)273.50±46.9451(89.47)10(17.54)6(10.53)3.1±0.87χ2/t0.860.090.710.262.79P0.400.770.470.590.06

3讨论

产后抑郁是一种严重危害产妇及其家庭的疾病，我国发生率为10%～40.18%[11]。虽然产后抑郁是一个复杂的多因素导致的疾病，但目前尚无统一的诊断标准与治疗方法，一直以预防为主。为了预防产后抑郁症的出现，本研究探讨了叶酸摄入量与产后抑郁症发病的关系，而且还首次深入研究了MTHFR基因多态性与产后抑郁的相关性。

3.1 低叶酸摄入量与产后抑郁发病的关系

流行病学与临床研究表明，低叶酸水平与抑郁症发病明显相关，孕期补充叶酸可以防止产后抑郁症的出现，因此，低叶酸水平是抑郁症发病的高风险因素[3-5]。Lewis等[8]以6 908例妊娠妇女为研究对象发现低叶酸摄入量不会导致产后抑郁的发生。到目前为止，叶酸与产后抑郁的关系一直存在争议。本研究发现，孕期低叶酸摄入量与产后抑郁无关，而且不同时间补充叶酸对产后抑郁也没有影响，但血清叶酸水平与产后抑郁显著相关，这与前人研究结果相一致。通常不同的人群，饮食习惯、身处的环境、纳入排除标准和抑郁症诊断标准等因素造成结果不完全相同。

3.2 MTHFR基因多态性与产后抑郁发病的关系

由于MTHFR基因参与叶酸代谢途径，间接调节血浆同型半胱氨酸含量，可能会影响产妇情绪[12-13]。Lewis等[8]发现MTHFR C677T与产后抑郁的发生有关；Devlin等[14]也有类似的发现，MTHFR C677T与妊娠期抑郁的发生有关。本研究发现MTHFR C677T和A1298C基因多态性与产后抑郁的发生有关，其中杂合子CT、AC和纯合子TT、CC是产后抑郁发生的高风险因子。本研究又进一步检测了MTHFR C677T和A1298C基因型与产后抑郁的关系是否受混杂因素(叶酸摄入量、摄入时间和血清叶酸水平)的影响，研究结果表明不同MTHFR C677T和A1298C基因型导致妇女产后抑郁不受孕期叶酸摄入量、摄入时间和血清叶酸水平的影响，是产后抑郁发生的独立影响因素。因此MTHFR C677T和A1298C基因多态性是产后抑郁的独立影响因子。

综上所述，低叶酸摄入量和不同时间补充叶酸不是产后抑郁发病的风险因素，但叶酸水平与MTHFR C677T和A1298C基因型是产后抑郁发病的独立风险因素。妊娠妇女的MTHFR基因筛查及叶酸水平检测可以作为产后抑郁症发生的预后因子，然后采取相应措施预防或减少产后抑郁的发病。

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[专业责任编辑：韩 蓁]

Effect of folic acid intake during pregnancy and MTHFR polymorphism on postpartum depression

LI Yin-di1, YUE Hong-yun1, LI Hua2

(1.Department of Obstetrics, Affiliated Hospital of Yan’an University, Shaanxi Yan’an 716000, China; 2.Department of General Surgery, Second Affiliated Hospital of Medical School of Xi’an Jiaotong University, Shaanxi Xi’an 710004, China)

〗Objective To investigate the relationship between folic acid intake during pregnancy and methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) polymorphism and postpartum depression. Methods Altogether 800 pregnant women receiving check-up in obstetrics department in Affiliated Hospital of Yan’an University from January 2014 to June 2016 were included in this study. Information on use of folic acid supplements was collected from women at 12 and 28 weeks of gestation based on an open-ended questionnaire. MTHFR C677T and A1298C polymorphism was detected by PCR-RFLP. Postpartum depression was diagnosed in 8 weeks postpartum through Edinburgh postnatal depression scale (EPDS). Relationship between folic acid intake during pregnancy and MTHFR polymorphism and postpartum depression was analyzed by statistical analysis. Results There were 218 cases of postpartum depression and 582 normal cases in 800 subjects. No significant difference was found in daily folic acid intake and different folic acid supplementary time between women with postpartum depression and normal women. But serum folic acid level of women with postpartum depression was significantly lower than that of normal women (χ2=15.76,P<0.001). There were significant differences in genotype frequency at polymorphic site of MTHFR C677T and A1298C between two groups. Among them, heterozygous CT (χ2=13.67,P<0.01), AC (χ2=3.39,P=0.02) and homozygous TT (χ2=8.65,P<0.01), CC (χ2=15.18,P<0.01) were high risk factors of postpartum depression. In addition, women with postpartum depression with different MTHFR C677T and A1298C genotype (CC, CT, TT and AA, AC, CC) were not significantly different in daily folic acid intake, different folic acid supplementary time and serum folic acid level during pregnancy (χ2value ranged 0.07-2.79, allP>0.05). Conclusion Low intake of folic acid and different supplementary time of folic acid are not risk factors for postpartum depression, but serum folic acid level, MTHFR C677T and A1298C genotype are independent risk factors for postpartum depression.

postpartum depression; folic acid; methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR); polymorphism

2017-02-13

科技惠民计划资助项目(编号：2015HM-01-02)

李引弟(1984-)，女，主治医师，主要从事孕产妇疾病诊治及基因诊断工作。

李 华，副主任医师。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.06.005

R749.4

A

1673-5293(2017)06-0632-04