2010－2015年重庆市某三甲儿童医院新生儿感染细菌的变迁及耐药性分析

谢 伟， 景春梅

2010－2015年重庆市某三甲儿童医院新生儿感染细菌的变迁及耐药性分析

谢 伟， 景春梅

目的 了解2010－2015年重庆医科大学附属儿童医院所在地区新生儿感染细菌的变迁特征及耐药性，为临床合理使用抗菌药物和预防控制医院感染提供依据。方法 分析该期间检出病原菌的构成和前几位病原菌对抗菌药物的耐药性，采用BD Phoenix 100仪器结合纸片扩散法进行药敏试验，按CLSI标准判断结果。结果 2010－2015年检出病原菌10 569株，其中革兰阴性菌8 540株，占80.8 %；以肺炎克雷伯菌为主，其次是大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌，检出率分别为29.3 %、16.7 %、9.9 %、8.6 %、3.3 %。革兰阳性菌1 490株，占14.1 %；以金黄色葡萄球菌为主，其次是表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌，检出率分别为7.8 %、2.2 %、1.8 %。肠杆菌科细菌对亚胺培南、美罗培南耐药率＜10%，其次是铜绿假单胞菌＞10 %，而鲍曼不动杆菌耐药率均＞20 %； 碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌比例分别接近8.4 %和2.9 %。未检出耐万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的革兰阳性菌。结论 该医院所在地区新生患儿感染细菌以肺炎克雷伯菌居多，呼吸道感染最为常见，鲍曼不动杆菌检出率呈逐年上升趋势，其余细菌未见趋势性变化。耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌较多。

新生儿感染； 细菌变迁； 细菌耐药性

新生儿由于免疫系统尚未发育完善，特别是伴有基础疾病的新生儿，随着侵袭性操作的增多、住院时间的延长，新生儿医院感染一直是造成新生儿死亡的重要原因之一。由于大量或（和）不合理使用广谱抗生素，使耐药病原菌日趋增多，导致住院治疗时间延长、治疗费用增加等。因此，合理使用抗菌药物治疗新生儿感染性疾病，具有重要的价值。本文对2010－2015年我院新生儿标本中分离的细菌进行回顾性分析，了解其分布特点和耐药性，以期为有效治疗新生儿细菌感染、指导临床合理用药、减少耐药菌产生、预防医院感染提供依据。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

收集2010年1月1日－2015年12月31日就诊于我院的新生儿各类临床标本培养出的细菌，剔除同一患者相同部位的重复分离菌株。

1.2 细菌培养 / 鉴定 / 药敏试验

按照《全国临床检验操作规程》第3版进行细菌分离培养，细菌鉴定与药敏试验采用BD Phoenix 100全自动微生物鉴定 / 药敏系统，药敏结果按照CLSI标准判读。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC29213，白念珠菌ATCC14053，购自卫生部临床检验中心。

1.3 统计分析

采用 WHONET 5.6分析前5位革兰阴性菌、前3位革兰阳性菌的耐药性。2010－2015年新生儿细菌的检出构成、在不同标本中的分布、各年份细菌耐药率均采用计数资料进行统计分析，相对数用率表示。

2 结果

2.1 细菌构成

2010－2015 年新生儿各类临床标本中共分离10 569株细菌。革兰阴性菌8 540株，占80.8 %，主要为肺炎克雷伯菌肺炎亚种，其次是大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌，检出株数和检出率（占总菌数）分别为3 102株（29.3 %）、1 768株（16.7 %）、1 043株（9.9 %）、910株（8.6 %）、347株（3.3 %）。鲍曼不动杆菌检出率呈逐年上升趋势，其余细菌未见趋势性变化。革兰阳性菌1 490株，占14.1 %；主要为金黄色葡萄球菌827株，其次是表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌，检出株数分别为233株、192株，检出率占总菌数7.8 %、2.2 %、1.8 %。见表1。

2.2 标本来源分布

10 569株细菌中，呼吸道痰标本分离出9 527株，占90.2 %，静脉血、尿、分泌物、脓液、脑脊液、其他检出株数分别为812株（7.7 %）、80株（0.8 %）、61株（0.6 %）、19株（0.2 %）、18株（0.2 %）、52株（0.5 %）。

2.3 肠杆菌科细菌药敏结果

2010－2015 年肠杆菌科细菌对亚胺培南、美罗培南、环丙沙星、左氧氟沙星、阿米卡星、庆大霉素敏感率高，在78.8 %～99.0 %；头孢菌素类的药敏显示除头孢他啶外耐药率均＞50 %。碳青霉烯类药物耐药的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌占各自菌的比率为8.4 %、2.9 %、1.1 %；产超广谱β内酰胺酶（ESBL）菌株的检出率分别为47.5 %、45.8 %、2.6 %。ESBL菌株药敏结果未修正。3种主要肠杆菌科细菌对受试抗菌药物的总耐药率见表2。

2.4 不发酵糖革兰阴性杆菌药敏结果

2010－2015 年鲍曼不动杆菌对抗菌药物敏感率在73.5 %～92.1 %，对碳青霉烯类耐药率＞20.0 %；铜绿假单胞菌对抗菌药物的敏感率在71.3 %～98.4 %，对亚胺培南耐药率＞20.0 %；流感嗜血杆菌对头孢菌素类、氨苄西林-舒巴坦、阿奇霉素敏感率在86.2 %～99.6 %。氨苄西林敏感率＜30 %。见表3。

2.5 革兰阳性菌药敏结果

未检出耐万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的革兰阳性菌。对青霉素、氨苄西林耐药率均＞95 %，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率占该菌的11.3 %；表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌耐甲氧

西林检出率占各自菌的67.2 %、90.4 %。前3位革兰阳性菌对受试抗菌药物的总耐药率见表4。

表1 2010－2015年新生儿标本中细菌分布及构成比Table 1 Distribution of pathogenic bacteria from 2010 to 2015

表2 2010－2015年肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 2 Overall antimicrobial susceptibility pro fi le of top three Enterobacteriaceae species from 2010 to 2015（ %）

表3 2010－2015年鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 3 Overall antimicrobial susceptibility prof i le of Acinetobacter， P. aeruginosa and H. inf l uenzae from 2010 to 2015（ %）

3 讨论

我院是中国西部最大的综合性儿童医疗中心，患者主要来自重庆主城区及周边区县。2010－2015年我院从新生儿送检的临床标本中分离出10 569株细菌，以革兰阴性菌为主（占80.8 %），与蒋鸿超等[1]报道以革兰阴性菌为主的82.6 %基本一致。革兰阴性菌主要为肺炎克雷伯菌，与章小芳等[2]报道的肺炎克雷伯菌是医院感染新生儿肺炎的主要病原菌一致。革兰阳性菌感染以金黄色葡萄球菌为主，分离的主要病原菌种类与王红梅等[3]的报道基本一致。连续6年，呼吸道标本中细菌检出率占90.1 %，说明呼吸道感染是新生儿感染的主要途径，这可能与新生儿皮肤黏膜屏障功能不完善，上呼吸道发育没有健全，免疫力较低有关。

药敏结果显示革兰阴性菌对亚胺培南、美罗培南耐药率低，可以优先考虑应用。前5位阴性菌对四环素类、喹诺酮类、磺胺类耐药率相对较低，但应尽量避免使用[4]，因为该类药物对新生儿的牙齿、骨骼、关节软骨、中枢神经系统等的不良反应较大。前5位革兰阴性菌对庆大霉素、阿米卡星的耐药率＜30.0 %，可以慎重使用，但在用药时应该特别注意对新生儿产生的不良反应。肠杆菌科肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌耐药率较高（＞50 %），应根据药敏结果应用；这2种细菌产ESBL检出率分别为47.5 %和45.8 %，低于王红梅等[3]报道的66.5 %和66.6 %，这可能与地域环境有关。肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对哌啦西林耐药率高＞75.0 %，提示新生儿感染这两种细菌时应避免使用青霉素类。碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分别占各自菌种的8.4 %和2.9 %，其他地区未发现碳青霉烯类耐药的菌株[5]，说明重庆地区耐碳青霉烯类药物的肠杆菌较多。对新生儿常用的头孢菌素类抗生素，鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的敏感率约在70 %，可以选用[6]。需特别注意新生儿鲍曼不动杆菌的感染，从表1的数据显示，鲍曼不动杆菌的检出有逐年上升趋势，不容忽视。其对所有受试抗菌药物耐药率均在20 %～30 %，对碳青霉烯类药物耐药率达22.2 %，与唐震海等[7]报道的22.0 %一致，说明鲍曼不动杆菌的耐药性日趋严重。铜绿假单胞菌对哌啦西林耐药率为19.4 %，对亚胺培南耐药率＞20.0 %，对铜绿假单胞菌的感染可以适当谨慎应用。流感嗜血杆菌对头孢菌素类、氨苄西林-舒巴坦、阿奇霉素敏感率高在86.2 %～99.6 %，可以选用[6]，而对氨苄西林敏感率＜30 %，要慎用。

未检出耐万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的革兰阳性菌。万古霉素是目前治疗耐甲氧西林葡萄球菌全身感染最有效的药物，但新生儿应慎用。金黄色葡萄球菌对以红霉素为代表的大环内酯类抗生素耐药率达52.7 %，但因该药抗菌谱广，越来越广泛应用于新生儿期及围产期疾病中[3]。对青霉素、氨苄西林耐药率均＞95 %，与郭瑞林等[8]报道的一致。金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药率为11.3 %，与李善秀等[9]报道的10.5 %一致。表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌中耐甲氧西林菌株分别为67.2 %和90.4 %，凝固酶阴性葡萄球菌耐甲氧西林株检出率高且呈多重耐药，可能与近年来广泛使用第三代头孢菌素有关，并在药敏试验中易检出耐甲氧西林葡萄球菌株[10]。因此，应当严格执行医护工作人员手卫生、控制抗生素使用级别、频率、时间，减少医院感染机会。

总之，本次研究显示，新生儿感染、多重耐药病原菌呈上升趋势。因此，应加强新生儿患儿病原菌分布及其耐药性监测，临床在治疗过程中，应根据细菌鉴定结果和药敏试验合理使用抗菌药物，同时积极预防医院感染。

表4 2010－2015年前3位革兰阳性菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 4 Overall antimicrobial susceptibility pro fi le of top three gram-positive bacteria from 2010 to 2015（ %）

[1] 蒋鸿超，黄海林，奎莉越，等. 3205例新生儿细菌性肺炎病原菌检测及耐药分析[J]. 临床儿科杂志，2013，31（7）：695-695.

[2] 章小芳，叶丽娟. 院内感染新生儿肺炎原菌分布特点及干预对策[J]. 中国微生态学杂志，2014，26（2）：188-191.

[3] 王红梅，蒋元琴，黄宝兴，等. 2010-2013年新生儿感染性肺炎病原体分布及耐药性分析[J]. 中国感染控制杂志，2015，13（7）：411-412.

[4] 张娴. 新生儿抗生素应用的相关问题[J]. 云南医药，2015，35（4）：488-490.

[5] 谢小强，叶贞志，郭亮，等. 新生儿重症监护室886例患儿细菌感染病原菌分布及耐药性分析[J]. 广东医学，2014，35（19）：3041-3044.

[6] 李志平，于小免. 新生儿肺炎病原菌构成及药敏分析与对策[J]. 中国实用医刊，2014，41（7）：67-69.

[7] 唐震海，胡钱红，麦菁芸，等. 新生儿重症监护病房鲍曼不动杆菌感染的临床调查与耐药现状[J]. 中国新生儿科杂志，2013，28（3）：167-171.

[8] 郭瑞林 ，李凯旋，苏 冰，等. 新生儿呼吸道分离凝固酶阴性葡萄球菌耐药性分析 [J]. 检验医学与临床，2015，12（3 ）：322-323.

[9] 李善秀. 120例新生儿细菌感染性疾病病原菌分析[J]. 中国实用医刊，2010，37（20）：70-71.

[10] 刘岚，陈沅，景春梅，等. 重庆地区2000-2004年儿童常见细菌的耐药性监测[J]. 中国医院药学杂志，2006，26（11）：1437-1441.

Analysis of clinically isolated bacterial tendency and drug resistance from neonatal ward in a tertiary children’s hospital in Chongqing during 2010-2015

XIE Wei, JING Chunmei. （Department of Laboratory Medicine, Children's Hospital of Chongqing Medical University; Key Laboratory of Developmental Diseases in Childhood, Ministry of Education; Chongqing Key Laboratory of Pediatrics, Chongqing International Science and Technology Cooperation Center for Child Development and Disorders, Chongqing 400014, China）

Objective The changing patterns of pathogenic isolates and antibiotic susceptibility in Chongqing’s neonates between 2010 and 2015 were investigated for the purpose to provide evidence for rational use of antibiotics and control of nosocomial infections. Methods The distribution of pathogenic bacteria and antibiotic susceptibility were analyzed. Identification and antibiotic susceptibility testing were carried out using BD Phoenix 100 automated system and the conventional Kirby-Bauer method. The results were interpreted in accordance with the breakpoints of the Clinical and Laboratory Standards Institute. Results A total of 10 569 pathogenic bacterial strains were isolated during the period, most of which were gram-negative bacteria (80.8 %, 8 540/10 569), primarily Klebsiella pneumoniae (29.3 %), followed by Escherichia coli (16.7 %), Acinetobacter baumanmii (9.9 %), Enterobacter cloacae (8.6 %) and Pseudomonas aeruginosa (3.3 %). Gram-positive strains accounted for 14.1 % (1 490/10 569), mainly Staphylococcus aureus (7.8 %), Staphylococcus epidermidis (2.2 %), and Staphylococcus haemolyticus (1.8 %). Imipenem and meropenem showed high activity against Enterobacteriaceae (＜10 % resistant), followed by P. aeruginosa (＞10 % resistant), and A. baumannii (＞20 % resistant). The prevalence of carbapenem-resistantstrains was 8.4 % in K. pneumoniae and 2.9 % in E. coli isolates. No gram-positive isolates were resistant to vancomycin, teicoplanin or linezolid. Conclusions K. pneumoniae was the most frequently isolated pathogen in the neonates treated in Children’s Hospital of Chongqing Medical University. The prevalence of A. baumannii isolates is increasing. Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae strains are emerging.

neonatal infection; changing pattern of pathogenic bacteria; antimicrobial resistance

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 04-0428-05

10.16718/j.1009-7708.2017.04.014

2016-11-25

2017-03-13

重庆医科大学附属儿童医院检验科，儿童发育疾病研究教育部重点实验室，儿科学重庆市重点实验室， 重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地，重庆 400014。

谢伟（1979—），女，本科，主管技师，主要从事细菌耐药方面的研究。

景春梅，E-mail：444524718@qq.com。