山羊呼吸系统疾病病原探究

王三跃

摘 要 针对山羊呼吸系统疾病的防控难题，结合实例对山羊呼吸系统疾病病原展开了研究。通过研究发现，支原体病毒、寄生虫和细菌都有可能引发该疾病，所以还要确定引发疾病的真正病原，然后结合实际情况正确用药，以确保疾病的防治能够取得较好的效果。

关键词 山羊；呼吸系统疾病；病原

中图分类号：S858.27 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2017.27.048

在山羊养殖中，呼吸系统疾病为常见疾病，未得到及时控制会给养殖者带来较大损失。在目前羊业健康发展方面，该疾病已经成为阻碍羊业发展的重要疾病。所以在该疾病发生后，还要尽快完成病原分析，而并非是盲目用药。根据分析结果，则能提出合理的综合防控措施，进而使病情得到及时有效控制。因此，还应加强山羊呼吸系统疾病病原研究，以便为山羊养殖提供更多的保障。

1 山羊呼吸系统疾病的临床症状

某山羊养殖场发生了一场30多只羊发病、死亡的疾病，患病羊出现了咳嗽喘气、发热、呼吸困难、流脓涕或浆液性鼻涕等呼吸系统疾病的症状，少数患病羊出现了拉稀、呼吸衰竭等症状，最终致死15只羊。从发病经过来看，放牧人于15日发现三四只羊出现精神欠佳和体温升高的情况，主要病症为流泪、流涕，个别出现拉稀情况。2 d后发现病羊数量上升，且1只已经死亡。使用恩诺沙星配合氟苯尼考进行治疗后，并未取得效果，最终发病羊数量上升至30只，死亡15只。

2 山羊呼吸系统疾病的病原

2.1 材料及試剂

为分析病死羊疾病病原，需对病死羊的肺脏、直肠、肝脏以及粪便进行无菌采集，并使用丝状支原体山羊亚种分离株、绵阳肺炎支原体作为实验材料。实验采用的试剂有兔血琼脂平板、PPLO肉汤、细菌基因组DNA提取试剂盒、TSA、TSB、微量生化反应管及药敏试纸等。

2.2 方法与设备

在研究病原时，需完成死羊解剖，观察和记录各脏器病变情况。在支原体检测上，需完成肺脏组织采集和剪碎处理，经过研磨、离心和过滤等环节后，利用PPLO支原体培养液进行培养。在5～7 d后，连传3代，注意培养液是否发生了颜色变化，取上清液完成支原体PCR特性检测[1]。为检测死羊是否感染流感病毒，取肺脏进行匀浆、冻融、离心处理，然后取上清液，利用基因提取试剂盒进行病毒RNA提取，通过反转录、PCR扩增后利用琼脂糖凝胶电泳检测。为检测死羊是否存在寄生虫，取粪便进行寄生虫检查。为实现细菌分离鉴定，将肝脏、肺脏进行触片处理，经固定、染色后利用显微镜观察。通过无菌采集后，利用TSA、兔血琼脂等平板对肝脏、肺脏进行接种培养。在24～48 h后观察细菌生长情况，并取菌落鉴定。在实验检测、鉴定的过程中，需采用Beckman公司生产的低温离心机，Life Tech公司生产的Pro Flex PCR System，北京六一仪器厂生产的电泳仪，Thermo Forma公司生产的CO2培养箱等多种设备。

2.3 病理变化情况

从病死羊的病理情况来看，肉眼可见的多数脏器无明显病理变化，但眼球出现了下陷、眼结膜潮红等现象，且肺部两侧出现了血点或血斑，肝脏出现肿胀，胆囊萎缩，小肠年末出血，肠系膜淋巴结切面湿润。通过病理分析，可确认病死羊患有呼吸系统疾病。

2.4 病原鉴定结果

2.4.1 支原体及流感病毒检测结果

从支原体检测结果来看，经过连传3代培养，未发现培养液出现颜色变化。对肺脏上清液进行检测后发现，MO3、Mmc和Mccp均为阴性，因此可以说明病死羊未感染该三种支原体。从流感病毒检测结果来看，检测结果总体呈阴性，因此可以认为病死羊为感染流感病毒。

2.4.2 寄生虫检查结果

从粪便检查情况来看，先后使用沉淀法和漂浮法，都未发现存在有吸虫卵和隐孢子虫卵囊，但是发现了少数球虫和线虫的卵囊，属于正常饲养情况。因此，可以判断出病死羊的拉稀与感染寄生虫无关。

2.4.3 细菌鉴定结果

对各组织进行细菌鉴定时发现，肺脏中存在革兰氏阴性杆菌，数量较少，未出现在肝脏中。经过分离后，肝脏组织并未发现细菌，肺脏则发现一种细菌，分别形成红色和灰黄色两种菌落，前一种均为大菌落，后一种大小不等，表面均光滑、湿润，且为圆形隆起状态。经过24 h培养后，菌落中间出现红色色素，且开始变浑浊，底部有絮状沉淀产生。经纯化分析可以发现，两种菌落为不同革兰氏阴性杆菌株，红色的为MS1，灰黄色为MS2。对两个菌株进行鉴定发现，MS1由尿素、葡萄糖和蔗糖等构成，拥有黏质沙雷氏菌的生化特性，MS2由多糖、发酵乳糖等构成，拥有大肠杆菌生化特性。对两株细菌进行基因扩增，可以得到1 400 bp目的片段。通过测序可以发现，MS1拥有与黏质沙雷氏菌相似的核苷酸序列，同源性在99.4%～99.9%。MS2拥有与大肠杆菌相似的核苷酸序列，同源性超出了99%。针对这两种细菌，为研究能够有效杀死细菌的药物，分别开展了药物敏感性试验。从结果来看，采用新霉素、状观霉素、卡那霉素等药物可以获得更好的杀菌效果。根据试验结果，对患病羊肌肉注射卡那霉素和地塞米松，持续5～7 d。针对未患病羊，注射卡那霉素进行预防，持续3～5 d[2]。通过7 d的治疗，未出现新患病羊，之前患病的山羊病情得到了稳定控制。

3 结论

通过分析可以发现，山羊呼吸系统疾病，可能是由支原体病毒、寄生虫、细菌等多种病原引起的。为确认真正的病原，还要结合实际情况进行病理分析和检测鉴定，以排除其他致病因素的干扰，从而实现合理正确用药，以加强疾病的治疗和预防。

参考文献

[1]石海云，辛英霞，闫振富.羊肺丝虫病与羊鼻蝇的区别及防治[J].北方牧业，2013（13）：25.

[2]李文良，毛立，程素平，等.山羊源副流感病毒3型的分离与分子鉴定[J].畜牧兽医学报，2015，46（2）：344-348.

（责任编辑：刘昀）endprint