猪圆环病毒2型疫苗注射方法对比试验

王鼎民+银少华+翁梅悦+欧盛绘+莫荣艳+黎益图+覃磊+黄艳+黎宏嘉+黄国杰

摘 要：为了获得较高的猪圆环病毒2型抗体水平，课题组在来宾市鼎晟种猪场开展猪圆环病毒疫苗注射方法对比试验，选择出生日期接近同批8窝品种为杜洛克×长大三元杂哺乳仔猪80头，试验为期77d，随机分成4组，每组20头，第Ⅰ组采取15日龄试验猪第1次免疫猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗，每头注射2ml；第Ⅱ组采取15日龄试验猪第1次免疫猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗，每头注射2ml，间隔2周后第2次免疫同种疫苗2ml，第Ⅲ组采取15日龄试验猪第1次免疫猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗，每头注射2ml，间隔3周后第2次免疫同种疫苗2ml，第Ⅳ组采取15日龄试验猪第1次免疫猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗，每头注射2ml，间隔4周后第2次免疫同种疫苗2ml。每组试验猪都在最后一次注射疫苗后4周抽血，ELASA方法检测猪圆环病毒Ⅱ型抗体，试验结果表明，注苗方法与猪圆环病毒2型抗体阳性率的关联非常显著，间隔2周后免疫2次猪圆环病毒2型疫苗抗体阳性率为最高，抗体水平最佳。

关键词：猪圆环病毒疫苗；注射方法；对比试验；抗体水平

一、材料与方法

1.疫苗名称及批号

青岛易邦生物工程有限公司生产，猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗，商品名为“易圆净”，批准文号兽药生字（2014）150131096，规格为20ml×10，生产批号为160922501。

2.用量及用法

15日龄以上仔猪（含15日龄）肌肉注射，每头注射2ml。

3.试验动物

在来宾市鼎晟种猪场选择出生日期接近同批8窝，品种为杜洛克×长大三元杂哺乳仔猪80头。

4.试验分组

试验猪群经过编号、饲料适应性饲喂7天后，随机分成4组，每组20头（每窝10头），并用抽签的办法分为试验Ⅰ组，试验Ⅱ组，试验Ⅲ组和试验Ⅳ组，分组情况如下表所示。

各组猪的体重差异在组内不超过±10%，组间不超过±5%。

5.试验设计

试验验为期77天，从2016年5月1日至2016年7月16日。

试验前预试期为7天，第Ⅰ组采取15日龄试验猪第1次免疫猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗，每头注射1头份2ml，；第Ⅱ组采取15日龄试验猪第1次免疫猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗，每头注射2ml，间隔2周后第2次免疫同种疫苗2ml，第Ⅲ组采取15日龄试验猪第1次免疫猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗，每头注射2ml，间隔3周后第2次免疫同种疫苗2ml，第Ⅳ组采取15日龄试验猪第1次免疫猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗，每头注射2ml，间隔4周后第2次免疫同种疫苗2ml。试验期间各试验组的哺乳母猪、哺乳仔猪及断奶后保育猪实行相同的饲养管理，同一日龄断尾去势，保证饲料、环境温度一致的情况下，饲料添加相同药物保健。每组试验猪都在最后一次注射疫苗后28d抽血，采用武汉科前试剂盒，ELISA方法检测猪圆环病毒2型抗体。

6.饲喂方法

各组试验猪不限料，哺乳母猪、哺乳仔猪及断奶仔猪以吃饱不剩料为原则， 每日4餐，喂湿料，料水比例为1：1～2，以手抓成团而松手后又散开为宜，吃完料后，再放水到料槽，自由饮水。

7.饲养管理

各组试验猪均在同一栋猪舍，饲喂同一种饲料，猪舍温度一致，条件一致，产房和保育舍每天进行1次清粪处理，试验期间注意观察各组猪的精神和健康状况。

8.抗体阳性判定标准

圆环抗体≥0.16判为阳性，<0.16判为阴性。

9.测定指标

血清中猪圆环病毒2型抗体阳性率计算公式：

抗体阳性率（%）=∑抗体呈阳性头数÷∑送检血清头数×100%

10.统计方法

根据送检血清检测报告对数据进行整理，抗体阳性率采用X2检验。

二、结果与分析

1.试验结果

各组试验猪的抗体阳性率见表1。

2.X2检验

假设免疫方法处理与猪圆环病毒2型抗体阳性率的关联不显著。

计算理论频数，按4组合计的平均抗体阳性率57.89%，则理论上第Ⅰ组阳性频数为18×57.89%=10.42头，第Ⅰ组阴性频数18×（1-57.89%）=7.58头，以此类推，计算第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组阳性和阴性理论频数。

计算X2=14.402

df=（4-1）（2-1）=3

查X2值表，X20.01，3=11.34，求得的X2值>X20.01，3，即P<0.01。表明免疫方法处理与猪圆环病毒2型抗体阳性率的关联非常显著。

3.不同免疫方法对猪圆环病毒2型抗体阳性率的影响

从表1可知：在免疫方法方面，第Ⅱ组间隔2周2次注苗的免疫方法，猪圆环病毒2型抗体阳性率为最高，其次是第Ⅰ组1次注苗的免疫方法，再次是第Ⅳ组间隔4周2次注苗的免疫方法，最差是第Ⅲ组间隔3周2次注苗的方法。

4.讨论

猪病毒性疫苗注射属于特异性免疫，健康的机体注射疫苗后产生免疫应答反应，随之產生免疫记忆性，并产生记忆细胞，间隔合适的时间再次注射同种疫苗，能有效刺激记忆细胞，激发强大和持久的抗体。从本次试验可知，间隔2周注射相同的猪圆环病毒2型疫苗能获得最佳抗体，从而有效预防猪圆环病毒2型病毒。

从本次试验可知，间隔2周注射相同的猪圆环病毒2型疫苗获得最佳抗体，本次试验仅对猪圆环病毒2型疫苗这一种猪病毒性疫苗进行试验，其他种类的猪病毒性疫苗是否遵循这一规律，还有待进一步试验研究。

三、结语

试验结果表明，免疫方法与猪圆环病毒2型抗体阳性率关联非常显著，特别是间隔2周后免疫2次猪圆环病毒2型疫苗抗体阳性率为最高，抗体水平最佳。

参考文献：

[1] 张峥. 猪圆环病毒2型疫苗效果对比试验[J].当地畜牧，2013，（9）：78-79.