奶牛临床型乳腺炎病原菌分离鉴定与药敏试验建议

武利宏

（临江镇农业畜牧服务中心，黑龙江同江 156400）

奶牛临床型乳腺炎病原菌分离鉴定与药敏试验建议

武利宏

（临江镇农业畜牧服务中心，黑龙江同江 156400）

探究奶牛临床型乳房炎病原菌分离鉴定与药敏试验建议。选择某地患有临床型乳房炎病牛的奶样30份，分别进行病原的分离鉴定与药敏试验。其中大肠杆菌和热带假丝酵母菌是最主要的两种病原菌，菌株数达到34株，占79.06%，并且两种及其以上菌所造成混合感染的奶样共有11份。本次所分离的热带假丝酵母菌对抗真菌药物高度敏感的主要是酮康唑和制霉菌素，敏感性比较低主要是氟康唑、两性霉素B以及伊曲康唑。通过对奶牛临床型乳房炎病原菌进行必要的分离鉴定与药敏试验。有助于将其中最主要的病原菌类型和合理的抗生素药物准确的筛选出来，进而可以为临床用药提供必要的指导，乳房炎的发病率也可以得到有效的降低，从而有助于奶牛业的长远发展。

奶牛；临床型乳房炎；病原菌分离鉴定；药敏试验

乳房炎在一定程度上是导致奶牛养殖业出现损失的疾病，该病的出现不仅导致牛奶的质量与产量都大大的下降，并且奶牛的正常的使用年限也大大的缩短，由此造成奶牛淘汰率的不断增加。目前，人们从奶牛的乳腺中所分离出来的微生物多达130种，具体包括支原体、病菌、真菌以及细菌等等。临床上关于乳房炎的防治主要以抗生素为主，然而基于广泛或者不合理的应用，致使多种细菌对抗生素产生非常强烈的耐药性，然后在乳中残留的抗生素在一定程度上严重危害这人类的身体健康。本次研究的主要目的是探究奶牛临床型乳房炎病原菌分离鉴定与药敏试验建议，选取了某地患有临床型乳房炎病牛的奶样30份，以其作为分析对象，详情如下：

1 材料与方法

1.1 培养基与试剂

培养基主要为营养肉汤培养基，沙堡氏、伊红美蓝以及三糖铁琼脂，取新生牛血清。利用抗菌药物过敏纸片和细菌生化微量鉴定管。

1.2 奶羊

本次研究中所用到的奶样主要是从患有临床型乳房炎病牛身上取到的，奶羊采集之前需要用温水对病牛的乳房进行全面的清洗，然后对乳头及其周围利用75%的酒精进行必要的消毒处理，待酒精完全挥发以后，开始进行第3把后奶样的收集。

1.3 细菌分离和鉴定

在培养基中接种奶样，将温箱的温度控制在37℃，进行为期18～72h的培养，对细菌生长的具体情况进行全面的观察并且最好详细的记录，完成革兰氏染色后可以利用镜检对细菌的具体形态与染色的特性进行仔细的观察[1]，将单个可疑菌落挑选出来纯培养。同时，采用常规方法鉴定细菌的生化特性。

1.4 药敏试验

选择15种常用抗菌药物和5种抗真菌药物（酮康唑、氟康唑、两性霉素B、制霉菌素、伊曲康唑）的过敏纸片，以美国国家临床实验室标准化委员会所制定的Kirby-Bauer琼脂扩散法，对分离菌株对抗菌药物的敏感性进行科学测定，在37℃的环境中进行24h的培养以后对抑菌环的直径进行精确的测量[2]。

判定标准：不敏感：抑菌环的直径小于10mm；中度敏感：抑菌环的直径在10～20mm之间；高度敏感：抑菌环的直径超过20mm。

2 结果

2.1 分离培养鉴定

本次进行细菌分离培养与鉴定的乳样共有30份，一共将6种43个菌株检测出来，具体分布如下表1。其中大肠杆菌和热带假丝酵母菌是最主要的两种病原菌，菌株数达到34株，占79.06%，并且两种及其以上菌所造成混合感染的奶样共有11份。

表1 奶牛乳房炎病原菌的检出结果

2.2 药敏试验结果

本次所分离的热带假丝酵母菌对抗真菌药物高度敏感的主要是酮康唑和制霉菌素，敏感性比较低主要是氟康唑、两性霉素B以及伊曲康唑，如下表2。

表2 奶牛乳房炎致病真菌药敏试验结果（mm）

3 讨论

导致奶牛乳房炎的病原体错综复杂，种类非常多，与各种条件的关系都十分密切，如地域、饲养管理以及季节等，同一奶牛场中病原体的种类和所占比例在不同时期均有所不同[3]。经过本次研究发现，导致乳房炎出现的病原体主要有两种，即大肠杆菌和热带假丝酵母菌，菌株数多达34株，占79.06%，并且两种及其以上菌所造成混合感染的奶样共有11份。通过对真菌分离鉴定结果的分析，不难发现真菌是造成本次奶牛乳房炎的主要因素，而这与国内外的报道不大相同。

随着临床上大量的对抗生素、免疫制剂以及激素的使用，致使奶牛患有真菌性乳房炎的数量较之前有了显著的增加，尽管少数抗生素有助于致病真菌在动物体内进行快速的生长与繁殖，进而导致酵母菌在存在抗生素的条件下长势旺盛的现象，相应的这为什么顽固性乳房炎在临床经过多种药物的治疗以后，虽症状有所减轻但是又不断反复出现的情况[4]。

同时，乳房炎与病原真菌也有很大的关系，在本次研究中所分离的热带假丝酵母菌对抗真菌药物高度敏感的主要是酮康唑和制霉菌素，敏感性比较低主要是氟康唑、两性霉素B以及伊曲康唑。

综上所述，通过对奶牛临床型乳房炎病原菌进行必要的分离鉴定与药敏试验，有助于将其中最主要的病原菌类型和合理的抗生素药物准确的筛选出来，进而可以为临床用药提供必要的指导，即在使用抗生素治疗的过程中需要充分考虑病原菌的耐药性和防止真菌出现继发性感染的危险。实际使用时需要将药敏试验的结果结合起来，进而有助于降低乳房炎的发病率，从而有助于实现奶牛业的长远发展。

[1]康晓冬，刘溪源，杨慧君，等.宁夏地区奶牛临床型乳房炎病原菌分离鉴定及药敏试验[J].黑龙江畜牧兽医，2014，11（24）：65-67.