Ki—67与非小细胞肺癌患者EGFR突变的关系及其对预后的影响

张煜坤++++++戈伟

[摘要] 目的 探讨Ki-67LI值与非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变的关系及预测价值，分析Ki-67LI值对非小细胞肺癌患者生存期的影响。 方法 回顾性分析武汉大学人民医院2015年7月～2016年7月经病理证实为非小细胞肺癌患者并行EGFR突变检测的共100例，分析Ki-67LI值与EGFR突变关系及其与患者预后的关系。 结果 行EGFR突变检测共100例，其中发生突变共57例，突变率为57%。女性、非吸烟以及病理类型为腺癌的患者更容易出现EGFR突变（P < 0.01），EGFR突变情况与Ki-67有关，Ki-67LI值升高更易出现在EGFR突变阳性患者中（P < 0.05），并且Ki-67LI值是影响非小细胞肺癌患者预后的独立因素（OR=2.503；95%CI：1.077～5.815；P=0.033）。 结论 Ki-67LI值可以预测非小细胞肺癌患者的预后，并且与非小细胞肺癌患者EGFR突变相关。

[关键词] 非小细胞肺癌；Ki-67；EGFR突变；预后

[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）11（b）-0079-04

[Abstract] Objective To investigate the relationship between Ki-67LI and EGFR gene mutation in non-small cell lung cancer （NSCLC）， as well as to further analyze the effect of Ki-67LI on the survival of patients with non-small cell lung cancer （NSCLC）. Methods From July 2015 to July 2016， total of 100 patients with non-small cell lung cancer were treated in Renmin Hospital of Wuhan University. And 100 patients were examined by EGFR mutation. The relationship between Ki-67LI and EGFR mutation and its relationship with prognosis were investigated. Results A total of 100 cases were detected by EGFR mutation， among them， 57 cases were mutated and the mutation rate was 57%， the incidence of which was more frequent in women， non-smokers， adenocarcinoma patients （P < 0.01）， and also found that EGFR mutations were associated with Ki-67， Ki-67LI values were more likely to occur in patients with EGFR mutations-positive （P < 0.05）， and Ki-67LI was also an independent factor in the prognosis of patients with non-small cell lung cancer （OR=2.503， 95%CI： 1.077-5.815， P=0.033）. Conclusion The value of Ki-67LI can independently predict the prognosis of non-small cell lung cancer patients， which is has a close relationship with EGFR mutations.

[Key words] Non-small cell lung cancer； Ki-67； EGFR mutation； Prognosis

肺癌是全球致死率最高的恶性肿瘤，已经超过乳腺癌成为发达国家女性癌症死亡的主要原因[1]。非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）占所有肺癌病例的75%～80%，总体5年生存率低于15%[2]。随着对分子靶向治疗的深入研究，分子靶向治疗在表皮生长因子（NSCLC）治疗中扮演了十分重要的角色。尤其是针对EGFR突变的酪氨酸激酶抑制剂（TKI）的出现，使EGFR突变阳性患者的中位总生存期>2年[3]。EGFR是酪氨酸激酶活性的细胞膜受体，主要与肿瘤细胞的增殖、迁移、血管生成、抑制凋亡及药物抵抗有关[4]。EGFR敏感突变被确定为预测EGFR-TKIs疗效最可靠的预测标志[5]，所以筛选相关标志物预测EGFR突变是非常有必要的。Ki-67指数是恶性肿瘤增生的标志物[6]，目前对于Ki-67标记指数（labeling index，LI）能否预测EGFR基因突变状态尚未明确。因此，本文回顾性分析我院NSCLC患者140例，来进一步探讨Ki-67标记指数水平与EGFR基因突变的关系及对患者生存期的影响。

1 资料与方法

1.1 一般資料

选取2015年7月～2016年7月在武汉大学人民医院经病理证实为NSCLC患者并行EGFR突变检测的100例患者，其中男性41例，女性59例。按照病理类型不同分组，其中腺癌60例，鳞癌33例，其他类型7例。按照有无吸烟史分类，吸烟45例，不吸烟55例。行EGFR突变检测的患者中年龄<60岁45例，≥60岁55例。TNM分期标准，其中Ⅰ～Ⅱ期60例，Ⅲ～Ⅳ期40例。入选标准：①经病理诊断明确；②抗肿瘤治疗前接受胸部CT扫描、脑CT或MR、腹部B 超或CT或全身ECT骨扫描检查（部分患者行PET-CT检查）进行了肿瘤基线的评估；③未接受任何放、化疗等抗癌治疗；④生存期大于1个月；⑤病例及随访资料完整，且经过被研究对象或其家属知情同意。排除标准：①合并有其他原发肿瘤者；②病理诊断组织学分类不清者；③病理诊断为小细胞肺癌者。endprint

1.2 随访

随访时间自诊断明确之日起至末次随访或死亡时间，随访方式包括门诊复查、电话和信件随访。总生存率（overall survival rate，OS）从诊断明确之日至随访终止日期或死亡，以月为单位；末次随访时间为2017年7月。

1.3 统计学方法

采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，应用Kaplan-Meier法计算生存率，多因素分析采用Cox比例风险模型进行，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 EGFR突变与临床病理因素之间的关系

全组患者行EGFR突变检测共100例，发生突变率为57%（57/100）。其中女性发生EGFR突变率为43%（43/100），男性发生EGFR突变率为14%（14/100），未吸烟者发生EGFR突变率为41%（41/100），吸烟者发生EGFR突变率为16%（16/100）。病理类型中，腺癌患者发生EGFR突变率为48%（48/100），鳞癌患者发生EGFR突变率为6%（6/100），其他类型患者发生EGFR突变率为3%（3/100）。女性、非吸烟及腺癌患者的EGFR突变率明显高于男性、未吸烟及鳞癌患者，差异均有统计学意义（P < 0.01），而不同年龄、病变部位及分期患者的EGFR突变率比较差异无统计学意义（P > 0.05）。

2.2 Ki-67与EGFR突变之间的关系

结果显示，Ki-67LI值升高更易出现在EGFR突变阳性患者中（P < 0.05），见表1，其与EGFR状态的关系见图1。

2.3 Ki-67标记指数对NSCLC患者生存期的影响

全组患者中，Ki-67LI值<20%的患者共38例，≥20%的患者共62例，Ki-67LI值高表达组的总OS较低表达组有统计学意义（P < 0.05，图2）。进一步行Cox风险模型分析，Ki-67LI水平是影响NSCLC患者生存期的独立因素（OR=2.503，95%CI：1.077～5.815，β=0.917，P=0.033）。

3 讨论

EGFR属于跨膜受体络氨酸激酶ErbB家族的成员之一，可激活细胞生长和增殖的相关信号途径[7]。在恶性肿瘤中，EGFR的突变通过持续的活化介导产生不受控制的细胞分裂[8]。在欧洲和亚洲血统从未吸烟的肺癌女性患者中EGFR基因突变率为10%～15%[9]。因此EGFR突变检测是患者能否从酪氨酸激酶抑制剂治疗中获益的重要组成部分。随着肺癌系列致癌驱动基因的相继确定，我国及国际上多项大型临床研究证明靶向治疗药物能够明显改善和延长有相关驱动基因的NSCLC患者的预后和生存期[10-11]。Welsh等[12]研究发现，用厄洛替尼联合全脑放疗治疗40例出现脑转移的NSCLC患者，结果发现总反应率为86%，中位随访28.5个月，中位生存时间11.8个月。其中进行了EGFR 基因检测共17例患者，EGFR 野生型患者中位生存时间9.3个月，EGFR突变患者中位生存时间19.1个月。提示EGFR-TKIs 联合放疗可使NSCLC脑转移患者获得更长的生存时间。其中外显子18～21是EGFR突变的常见位点，这赋予了患者对EGFR酪氨酸激酶抑制剂的敏感性，这些外显子能编码EGFR激酶结构域的一部分[13]。大约90%的这些突变发生在外显子19缺失和外显子21上的L858R点突变，与患者接受厄洛替尼或吉非替尼治疗达到70%的反应率相关[14]。吴应龙等[15]针对晚期EGFR突变阳性NSCLC患者进行的Ⅲ期随机，开放标签，ENSURE研究的分析显示，一线厄洛替尼对比吉西他滨/顺铂化疗，可显著改善患者的PFS，且3级以上的的不良反应显著低于化疗。

本研究中，发现EGFR突变在女性、非吸烟、腺癌患者中更为常见（P < 0.05），这与接受EGFR-TKI治疗的优势人群一致，因此EGFR突变检测对于NSCLC患者的个体化治疗有着至关重要的作用。已经研究了几种分子生物学标志物对NSCLC的预后或预测作用。其中一个就是30年前发现的在一些恶性疾病中被广泛研究的Ki-67。Ki67抗体首先是利用霍奇金淋巴系L428细胞核对小鼠进行免疫制备出的。Ki-67蛋白的生物学功能是由位于10号染色体长臂（10q25）上的基因编码，而且似乎Ki-67与核糖体RNA转录有关。因此，Ki-67失活会抑制核糖体RNA合成。Ki-67被广泛认为是细胞增殖的标志物，主要表达于细胞周期的活跃期，即G1期、S期、G2期和有丝分裂期[16]。然而，少量的Ki-67也可在静止细胞中检测到[17]。Ki-67与肿瘤良恶程度关系即Ki-67标记指数与肿瘤恶性程度呈正相关。是鉴别肿瘤良恶程度及侵袭力的重要标志之一[18]。本研究中，Ki-67LI值越高，NSCLC患者EGFR突变率越高（P < 0.05）。分析其对患者生存期的影响同时也发现，Ki-67LI值高表达组的总OS较低表达组有统计学意义（P < 0.05）。但是Dingemans等[19]通过对接受铂类化療的36例Ⅲ～Ⅳ期NSCLC患者按照Ki-67标记指数分为<30%，30%～60%和>60%进行分析显示，Ki-67与患者的缓解率、OS在统计学上没有显著的差异。Yan等[20]也发现Ki-67对NSCLC患者的OS没有统计学意义，本研究结果与上述研究相反，可能与本文Ki-67标记指数的选择不同（Ki-67指数分为<20%，≥20%）及样本的入组差异有关。

综上所述，Ki-67LI值可以预测NSCLC的生存期，而且本研究初步发现了CEA、Ki-67水平与EGFR突变的关系，对于EGFR突变状态未知的患者，通过CEA水平、Ki-67检测可以为临床医生选择EGFR突变检测提供一定的参考依据，从而使患者更好地从EGFR-TKI治疗中获益。因此，Ki-67与NSCLC的关系还是值得进一步研究的。endprint

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